使用合成核苷酸作探针实验——在氯化钠/柠檬酸钠中杂交
基因探针(probe)又称“寡核苷酸探针”,简称“探针”,就是一段与目的基因或DNA互补的特异核苷酸序列,它可以包括整个基因,也可以仅仅是/基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之转录而来的RNA。实验材料核苷酸试剂、试剂盒SSC焦磷酸钠SDS仪器、耗材培养箱水浴锅实验步骤1. 制备双份的转印细菌菌落或噬斑的硝酸纤维素滤膜(处理和干烤过)。2. 在室温下用3× SDS / 0.1%SDS溶液500 ml 洗膜3~5次。3. 然后在65℃洗膜至少1.5 h 以上直至过夜。 4. 在预杂交液中37℃预杂交1 h。 5. 在装有20 ml 以上的SSC杂交液的可封口的杂交袋中可移入多达20张的滤膜。6. 在毎 个杂交袋中每毫升杂交液加入0.125 ng 至1.0 ng 的每种32P标记的寡核苷酸。7. 在以下给定的温度条件下寡核......阅读全文
地高辛标记探针的化学发光检测实验
地高辛系统是过提供的另一种非同位素标记方法,其检测方法是通过偶联上一种或数种荧光染料或酶的抗地高辛抗体,或用间接免疫荧光来测定。实验材料DNA试剂、试剂盒抗体实验步骤1. 用地髙辛标记探针与带DNA或RNA印迹的正电荷尼龙膜杂交。 2. 根据厂商的推荐条件,封闭和结合抗体。3. 对X光片曝光约
使用合成核苷酸作探针实验
实验材料 核苷酸试剂、试剂盒 SSC焦磷酸钠SDS仪器、耗材 培养箱水浴锅实验步骤 1. 制备双份的转印细菌菌落或噬斑的硝酸纤维素滤膜(处理和干烤过)。2. 在室温下用3× SDS / 0.1%SDS溶液500 ml 洗膜3~5次。3. 然后在65℃洗膜至少1.5 h 以上直至过夜。 4.
DNA片段探针的应用实验——甲酰胺法
所谓探针,一般是指用来检测某一特定核苷酸序列或基因序列的DNA片段或RNA片段。但要使探针DNA片段能实际应用,必须使DNA或RNA分子带上可识别的信号标志,以便跟踪观察探针与其同源的核苷酸序列发生杂交反应的位置,被探测DNA或RNA片段上的大小、杂交信号的强弱等。目前应用最多的是核素标记方法或非核
细胞凋亡检测实验——荧光探针双标记法
实验方法原理本实验用1μg/ml 三尖杉酯碱HT在体外诱导培养的HL-60细胞发生凋亡,同时也有少数细胞发生坏死。用Hoechst33342和碘化丙啶(propidium iodide,PI)对细胞进行双重染色,可以区别凋亡、坏死及正常细胞。三尖杉酯碱(HT)是我国自行研制的一种对急性粒细胞白血病,
地高辛标记探针的化学发光检测实验
化学发光法 实验材料 DNA 试剂、试剂盒
地学实验室及仪器扫盲(1)离子探针实验室
实验设备 名称:二次离子探针质谱仪(SIMS) 仪器描述:法国Cameca公司生产的IMS 1280是国际最新型的二次离子质谱仪。仪器同时装备有气体双等离子体源和铯离子源两个离子源,而且不同离子源的切换非常方便;具有先进的离子透镜系统,具有较高的离子传输效率;在应用过程中,离子束直径可以降至数
高地辛标记的DNA探针制备实验——基本方法
实验材料DNA试剂、试剂盒dTTPdUTPEDTASDS仪器、耗材水浴锅培养箱实验步骤1. 建立一个标准100 μl 反应体系,用10 μl,10×地高辛·11-dUTP/dTTP贮液,DNA酶Ⅰ酶量不变,15℃温育2 h。2. 取小份在微型胶中进行电泳以检测探针大小。3. 继续反应直到获得大
用检测和驱动-DNA-探针进行差异杂交实验
试剂、试剂盒 洗涤缓冲液 SDS SSC Blocking 溶液 经过剪切的鲑鱼精 DNA探针
用检测和驱动-DNA-探针进行差异杂交实验
试剂、试剂盒 洗涤缓冲液SDSSSCBlocking 溶液经过剪切的鲑鱼精 DNA探针仪器、耗材 沸水浴杂交炉实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂高严格性洗涤缓冲液(0.2XSSC,5 g/LSDS),预热到 68°C(可选,见第 9 步)低严格性洗涤缓冲液(2XSSC,5 g/LSDS),预
微生物实验室技术基因探针技术
基因探针技术基因探针技术利用具有同源性序列的核酸单链在适当条件下互补形成稳定的DNA?RNA或DNADNA链的原理,采用高度特异性基因片段制备基因探针来识别细菌。基因探针的优点是减少了基因片段长度多态性所需要分析的条带数。如法国生物一梅里埃公司的GEN?PROBE基因探针检测系统,对于分离到的单个菌
杂交信号的放大实验——地高辛标记探针的信号
实验材料杂交信号试剂、试剂盒地高辛SSCBSA荧光素仪器、耗材加湿盒水浴锅培养箱实验步骤1. 用地高辛标记的探针与切片杂交并洗片(见“荧光原位杂交实验”基本方案步骤1~6)。 2. 加50 μl 10 μg/ml 的羊抗地高辛抗体Fab片段于玻片上,盖以22 mm2 大小的Parafilm 膜,
DNA片段探针的应用实验——水溶液中杂交
实验材料DNA试剂、试剂盒杂交液洗膜液仪器、耗材培养箱实验步骤1. 除了于65℃在杂交液Ⅰ中温育的条件外,预杂交按甲酰胺法进行。 2. 按甲酰胺法制备探针并用2 ml 杂交液Ⅰ稀释。3. 滤膜在65℃杂交过夜,然后移去杂交液,用低严紧性洗膜液Ⅰ洗膜2次。4. 用高严紧性洗膜液Ⅰ在65℃迅速洗
用检测和驱动-DNA-探针进行差异杂交实验
下面 4 个探针用于差异筛选杂交。1. 检测者特异性消减探针(正向消减探针)。2. 驱动者特异性消减探针(反向消减探针)。3. 从检测者 mRNA(或检測者基因组 DNA) 直接合成的 cDNA 探针。4. 从驱动者 mRNA(或驱动者基因组 DNA) 直接合成的 cDNA 探针。本实验来源于 PC
基于扫描探针表面原子识别的前期实验研究
如今扫描隧道显微镜(STM)已经成为表面科学中一种极其重要的测量分析手段,用于对固体表面形貌的测量和费米面附近电子态的探测,但是它无法直接识别表面原子的种类。本文介绍了将扫描探针与电子能谱技术相结合以便在微区表面识别原子的预研究工作,包括两个相关实验:超快电压脉冲阈值实验和扫描探针俄歇谱仪(Scan
基因探针基因探针的基本介绍
基因探针基因探针(probe)就是一段与目的基因或DNA互补的特异核苷酸序列,它可以包括整个基因,也可以仅仅是/基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之转录而来的RNA。 1.探针的来源 DNA探针根据其来源有3种:一种来自基因组中有关的基因本身,称为基因组探针(genomic probe
探针台的高精度探针台
目前世界出货量第一的型号吸收了最新的工艺科技例如OTS,QPU和TTG相关技术,这种全新的高精度系统为下一代小型化的设计及多种测试条件提供保证。特性1:OTS-最近的位置对正系统(光学目标对准) OTS通过对照相机相对位置的测量来保证其绝对位置的精度。这是非常引人注目的技术,来源于东京精密的度量技
地学实验室及仪器扫盲(5)电子探针实验室
实验设备 名称:SX51型电子探针 型号:SX51 性能指标:法国CAMRCA公司生产 1994年10月安装使用 配备3道波谱仪(WDS) 、OXFORD公司LINK ISIS能谱仪(EDS)以及阴极发光(CL)探头。 空间分辨率7nm; 8块分光晶体,可分析Na-U间的元素。
探针电流
探针电流 探针电流直接影响到束斑直径、图像信号强度、分辨率以及图像清晰及失真程度等参数,而这些参数间又存在矛盾。电流越大电子束的束斑直径越小,使分辨率增大,景深也增大。但是信号弱时,亮度有时会显得不足、信噪比降低。对于一些高分子材料、生物样品或一些不导电的样品采用较大的探针电流,
生物素酰化探针的检测实验——比色法
与放射性标记探针的比活不同,生物素标记探针的可检出性在于每千碱基对中掺入的生物素分子的数量,它可用比色法检测。实验材料DNA试剂、试剂盒磷酸酶缓冲液封阻液牛血清蛋白TENBT仪器、耗材离心机分光光度计摇床实验步骤1. 用DNA稀释缓冲液,稀释生物素酰化标准DNA,浓度为0、1、2、5、10和20
生物素酰化探针的制备实验——切口平移法
在标准的切口平移实验体系中,生物素-11-dNTP取代了dNTP,DNA酶I 的浓度调整到可生成长100~500个核苷酸的范围,其他生物素酰化的核苷酸也可代替生生物素-11-dNTP。实验材料DNA试剂、试剂盒DNA聚合酶dNTP2-疏基乙醇生物素甘油NaClEDTASDS无水乙醇仪器、耗材注射器电
以-RNA-为靶目标-FISH-探针的标记实验
标记的 RNA、DNA 或者核酸类似物可以通过荧光原位杂交(FISH) 的方法检测细胞标本内的 RNA。目标 RNA 通常是由基因组 DNA 转录来的信使 RNA(mRNA)。由于髙特异的核酸碱基互补配对原则,特定的 RNA 分子可以从众多共表达的 mRNA 分子中筛选出来。对选择的 mRNA 分子
寡核苷酸探针在溶液中的杂交实验
试剂、试剂盒 寡核苷酸杂交液 寡核苷酸预杂交液 SSC 或 SSPE TEAC1 洗涤液 TMAC1或 TEACl TMAC1 洗涤液
以-RNA-为靶目标-FISH-探针的标记实验
标记的 RNA、DNA 或者核酸类似物可以通过荧光原位杂交(FISH) 的方法检测细胞标本内的 RNA。目标 RNA 通常是由基因组 DNA 转录来的信使 RNA(mRNA)。由于髙特异的核酸碱基互补配对原则,特定的 RNA 分子可以从众多共表达的 mRNA 分子中筛选出来。对选择的 mRN
寡核苷酸探针在溶液中的杂交实验
Jabobs等 ( 1988)介绍了在含季铵盐缓冲液中杂交的方法与原理。下述为该法的简单变通方案。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)上册,作者:黄培堂。试剂、试剂盒寡核苷酸杂交液寡核苷酸预杂交液SSC 或 SSPETEAC1 洗涤液TMAC1或 TEAClTMAC1 洗涤液核酸和寡核苷酸放射性标
寡核苷酸探针在溶液中的杂交实验
试剂、试剂盒 寡核苷酸杂交液寡核苷酸预杂交液SSC 或 SSPETEAC1 洗涤液TMAC1或 TEAClTMAC1 洗涤液核酸和寡核苷酸放射性标记的寡核苷酸探针仪器、耗材 杂交装置振荡培养器实验步骤 材料溶液和缓冲液稀释贮存液至适当浓度。寡核苷酸杂交液6XSSC(或 6XSSPE)0.05mol/
钙离子荧光探针:比值型荧光探针
前面我们介绍了荧光指示剂法可以将Ca2+检测的实验与其他技术结合使用,如可以与流式细胞仪、荧光分光光度计、或者荧光显微镜进行联合检测 。紫外光型主要包括Quin-2、Indo-1、Fura-2等,数量较少,可见光型数目较多,包括Fluo-3、钙黄绿素、Rhod-2等。荧光指示剂根据测光原理和数据
探针引物和探针有什么区别
如果你做的事荧光定量PCR,其引物和一般引物在构成上是没有什么区别的,只是要更加注意引物二聚体、PCR产物大小等问题。染料法不需要其他东西,探针法还需要taqman探针,这个探针的设计是比较有讲究的,并且上面有荧光集团和猝灭基团。具体设计,一般使用相关软件进行。
实验室检验检测工具扫描探针显微镜
扫描探针显微镜(Scanning Probe Microscope,SPM)是扫描隧道显微镜及在扫描隧道显微镜的基础上发展起来的各种新型探针显微镜(原子力显微镜AFM,激光力显微镜LFM,磁力显微镜MFM等等)的统称,是国际上近年发展起来的表面分析仪器,是综合运用光电子技术、激光技术、微弱信号检测技
生物素酰化探针的检测实验——化学发光法
实验材料DNA试剂、试剂盒生物素磷酸酶仪器、耗材紫外灯离心机实验步骤1. 用夹子固定已转印的尼龙膜的边角于一小片干的吸水纸上,样品面朝上,放进温箱内12~80℃放15~30 min 或温室晾干过夜。 2. 将带核酸的面朝上暴露于紫外灯下,用最适的时间交联。3. 用生物素探针与膜杂交,用适当强度
扫描探针电子能谱仪的研制及相关实验研究
随着表面科学的蓬勃发展和表面分析技术的快速进步,人们不再满足于一种分析技术获得一种表面信息的状况,更加希望能够用一种多功能分析系统较为完备地表征固体表面。将扫描隧道显微镜(STM)和电子能谱技术的结合组建的扫描探针电子能谱仪(Scanning Probe electron energy spectr