化学法测定DNA的含量——二苯胺显色法
化学法测定DNA含量可以用于:(1)转化、转染之前的质粒浓度估测;(2)对获取的DNA含量进行检测。实验方法原理DNA 在酸性条件下加热,其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂,生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸,而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊糖,与二苯胺试剂反应生成蓝色物质,在595nm 波长处有最大吸收。DNA 在40-400μg 范围内,光吸收与DNA的浓度成正比。在反应液中加入少量乙醛,可以提高反应灵敏度。实验材料DNA样品试剂、试剂盒DNA 钠盐 NaOH 溶液二苯胺冰乙酸过氯酸乙醛仪器、耗材分光光度计水浴锅实验步骤1. 制作DNA 标准曲线:取12 支洁净干燥试管加入DNA标准溶液,加完各试剂后,充分混匀。于60℃水浴中保温1h,冷却后于595nm 波长处以1,2 管为空白调零,测定各管光密度(OD595nm)。取两管的平均值,以DNA 的含量为横坐标,光密度为纵坐标,绘制标准曲线。......阅读全文
比色法测定COD步骤
这种方法很简单只需要几个步骤:1.消化您的样品和试剂空白。(试剂空白只是去离子水的一个样品,其处理方式与实际样品相同,只要您的试剂批次持续,您甚至可以重复使用空白。)2.让消化的样品和空白冷却。3.使用空白样品瓶将仪器归零。4.阅读样本数据
比色法测定之甲醇
一、原理空气中的甲醇被水吸收后,在酸性溶液中甲醇被高锰酸钾氧化成甲醛,再与变色酸作用生成紫色化合物,比色定量。二、干扰及消除甲醇与其他醇共存时,对本法有干扰,此时应选用气相色谱法进行测定。三、方法的适用范围当采样体积为20L时,取5ml样品溶液测定,检出下限浓度为0.3mg/m3,其测量范围为 0.
食品中的亚硝酸盐检测方法可见分光光度法
水样中的亚硝酸盐测定是应用苯胺-a-萘酚分光光度法,其原理为:苯胺与亚硝酸盐在盐酸介质中重氮化,然后在NaOH溶液中与a一萘酚生成桔红色偶联产物。 实验结果表明:偶联产物的最大吸收波长为480nm,线性范围为0~0.96mg/L,其线性相关系数为0.9976,表观摩尔吸收系数为ε480=2.5
DNA制品可用哪几种方法测定其含量
测定DNA浓度的方法有两种,即利用分光光度计法测定DNA的紫外光吸收值;另一种方法是测定样品中溴化乙锭发射的荧光的强度来计算核酸的含量.紫外光吸收法:因为组成核酸的碱基(G,A,T,C)在260nm处具有强吸收峰,所以通过测定260nm的吸收峰即可对DNA进行定量.但有时也会因为所处溶液的pH值不同
考马斯亮蓝微盘比色法测定蛋白质含量实验
实验方法原理 考马斯亮蓝G-250存在两种不同的颜色形式,红色和蓝色。它和蛋白质通过范德华力结合,在一定蛋白质浓度范围内,蛋白质和染料结合符合比尔定律(Beer?蒺s law)。此染料与蛋白质结合后颜色由红色形式变为蓝色形式,最大光吸收由465nm变成595nm,通过测定595nm处光吸收的
考马斯亮蓝微盘比色法测定蛋白质含量实验
实验方法原理考马斯亮蓝G-250存在两种不同的颜色形式,红色和蓝色。它和蛋白质通过范德华力结合,在一定蛋白质浓度范围内,蛋白质和染料结合符合比尔定律(Beer?蒺s law)。此染料与蛋白质结合后颜色由红色形式变为蓝色形式,最大光吸收由465nm变成595nm,通过测定595nm处光吸收的增加量可知
苯胺分光光度法测定二氧化硫的结果分析
计算式中:W——测定时所取样品溶液中二氧化硫含量,μg; Vt——样品溶液总体积,ml; Va——测定时所取样品溶液体积,ml; Vn——标准状态下的采样体积,L。
苯胺分光光度法测定二氧化硫的方法原理
二氧化硫被四氯汞钾溶液吸收后,生成稳定的二氯亚硫酸盐络合物,再与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺作用,生成紫红色络合物,根据颜色深浅,用分光光度法测定。主要干扰物质为氮氧化物、臭氧、锰、铁、铬等。加入氨基磺酸铵可消除氮氧化物的干扰,采样后放置一段时间可使臭氧自行分解,加入磷酸和乙二胺四乙酸二钠盐可以消除或减小某
余氯测定的注意事项
氯在水溶液中非常不稳定,特别是在浓度较低时,含量会迅速减少。受到阳光和其他强光的照射或受到搅动,氯的还原速度会加快。因此取样后不能贮存,必须立即开始氯的测定,同时避免光线照射和搅动水样。在测定过程的所有操作都要避免阳光直接照射,最好在尽可能低的温度下和柔和的光线下进行,而且所有的比色法都需要用颜色和
余氯检测注意事项
氯在水溶液中非常不稳定,特别是在浓度较低时,含量会迅速减少。受到阳光和其他强光的照射或受到搅动,氯的还原速度会加快。因此取样后不能贮存,必须立即开始氯的测定,同时避免光线照射和搅动水样。 在测定过程的所有操作都要避免阳光直接照射,zui好在尽可能低的温度下和柔和的光线下进行,而且所有的比色法都
二苯基硫卡巴腙比色法测定铜合金中的微量锌
一、方法要点锌在弱碱性溶液中与二苯基硫卡巴腙生成红色的络合物,可溶于四氯化碳中呈显明的红色。在弱酸性溶液中反应不完全,其反应程度如何视二苯基硫卡巴腙在四氯化碳中的浓度而定。为了阻止铜、汞、银、金、铋、铅、镉与二苯基硫卡巴腙反应,在pH4~5.5范围内萃取,同时加入适当量的硫代硫酸钠,可达到阻止以上元
食品中二氧化硫含量的测定方法
摘要:随着人们生活水平的提升,人们对于食品安全的关注度也在逐渐增高。其中,关于食品中二氧化硫含量也逐渐引起了人们的重视。测定食品中二氧化硫的残留量,保护消费者的利益成为食品检测中的一项重要工作。 食用豌豆淀粉是凉粉凉皮的主要材料。豌豆淀粉就是把豌豆磨碎后去皮,淀粉都是呈半湿状态,尤其是在天气
核酸的定量测定实验——二苯胺法
实验方法原理DNA 分子中2-脱氧核糖残基在酸性溶液中加热降解, 产生2-脱氧核糖并形成ω-羟基-γ-酮基戊醛, 后者与二苯胺试剂反应生成蓝色化合物, 其反应为: 蓝色化合物在595 nm 处有最大吸收峰, 且DNA 在40~400 μg 范围内时, 光密度与DNA 浓度呈正比。在反应液中加入少量乙
比色法测定的原理及特点
原理就是以有色化合物的显色反应为基础,通过比较(目视比色法)或测量(光电比色法)有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法.特点...光电比色法一般来说比目视比色法较灵敏、准确现在来说应该是比较老的技术了吧.特点也不突出了吧.
动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定2
试剂和器材试剂1.DNA标准溶液(须经定磷确定其纯度):取小牛胸腺DNA钠盐以0.01mol/L氢氯化钠溶液配成200 µg/mL的溶液。2.样品待测液:准确称取DNA干燥制品以0.01mol/L氢氯化钠溶液配成100 µg/mL左右的溶液。在测定RNA制品中的DNA含量时,要求RNA制品的每mL待
3,5二硝基水杨酸比色法测定还原糖
【原理】 3,5-二硝基水杨酸溶液与还原糖(各种单糖和麦芽糖)溶液共热后被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内,还原糖的量和棕红色物的颜色深浅呈一定比例关系。在540nm波长下测定棕红色物质的消光度值,查标准曲线,便可求出样品中还原糖的含量。 【仪器与用具】 25ml血糖管或刻度试管;大离心管或玻
测定糖的含量-(3,5二硝基水杨酸比色法)
一. 目的 了解3,5-二硝基水杨酸比色法测定糖的原理 掌握总糖定量测定的操作方法 二. 原理 还原糖是指含自由醛基或酮基的单糖(如葡萄糖)和某些具有还原性的双糖(如麦芽糖)。 它们在碱性条件下,可变成非常活泼的烯二醇。遇氧化剂时,具有还原能力,烯二醇本身则被氧化成糖酸及其他产物
电化学法测定氧含量所需仪器介绍
仪器①由气泵、流量控制装置、控制电路及显示屏组成。②采样管及样气预处理器。③技术指标:参见定电位电解法测定一氧化氮测试仪的技术指标。
染料染色法测定细胞数
结晶紫检测法: 1、在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104~10×4 WEHI-164细胞的培养液(含10%小牛血清的RPMI-1640培养液),37℃ 5% CO2的二氧化碳培养箱中培养2~3小时,让细胞帖壁。 2、用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品,根据需要3
比色法测定在线COD
比色法测定在线COD我公司推出SO412-1515在线COD测定仪根据国家标准GB11914-89,采用重鉻酸钾高温消解,比色法测定 广泛应用于废水处理、纯净水、循环水、锅炉水等系统以及电子、电镀、印染、化学、食品、制药等制程领域,以及地表水及污染源排放等环境监测等远程监控系统。以下是仪器具体的技
苯胺分光光度法测定二氧化硫的注意事项
①温度对显色有影响,温度越高,空白值越大。温度高时发色快,褪色也快,最好使用恒温水浴控制显色温度。②因六价铬能使紫红色络合物褪色,产生负干扰,故应避免用硫酸-铬酸洗液洗涤玻璃器皿。若已用硫酸-铬酸洗液洗过,则需用(1+1)盐酸溶液浸洗,再用水充分洗涤,以将六价铬洗净。③用过的具塞比色管及比色皿应及时
紫外分光光度法测定DNA蛋白质含量
一、实验目的 学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理; 掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术; 掌握UV-1700紫外可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。 二、实验原理 紫外可见吸收光谱法又称紫外可见分光光度法,它是研究分子吸收190nm~750nm波长范围内的吸
紫外分光光度法测定DNA蛋白质含量
一、实验目的 学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理; 掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术; 掌握UV-1700紫外可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。 二、实验原理 紫外可见吸收光谱法又称紫外可见分光光度法,它是研究分子吸收190nm~750nm波长范
蘑菇罐头中漂白剂的测定:盐酸副玫瑰苯胺比色法
一、目的与要求: 1、掌握盐酸副玫瑰苯胺比色法测定S02的方法与原理。 2、熟悉72I型分光光度计的工作原理和使用方法。 二、原理: 二氧化硫被四氯汞钠吸收液吸收后,生成稳定的络合物,再与甲醛和盐酸副玫瑰苯胺作用,并经分子重排后,生成紫红色的络合物。颜色的深浅与二氧化硫的浓度成正比,可
运用高效液相色谱仪检测苯胺含量
苯胺是一种在许多工业生产中使用的化学物质。高铁血红蛋白血症是人类苯胺中毒明显的症状,急性苯胺中毒可导致发绀(蓝色和蓝色皮肤颜色)中毒还可能出现头晕、头痛、心跳不规则、抽搐、昏迷甚至死亡直接接触苯胺也会刺激皮肤和眼睛。 采用等度高效液相色谱法对水中苯胺进行了测定详细的检测方法如下。 1、仪
关于氯硫二苯胺的用法用量介绍
1、(1)氯硫二苯胺口服25~75mg,每天2~3次,1~2周内逐渐增至每天400~600mg,2~3次分服。维持量每天100~300mg,2~3次分服。(2)氯硫二苯胺肌内注射:可用于控制严重症状,一般每次25~50mg,深部肌内注射。(3)静脉注射:偶可用于极度躁动患者,每次不超过50mg,
简述氯硫二苯胺的适应症
1、用于控制精神分裂症,主要用于Ⅰ型精神分裂症(以精神运动性兴奋和幻觉妄想为主),尤其对急性患者效果显著,但不能根治。对慢性精神分裂症患者疗效较差,对Ⅱ型精神分裂症患者无效,甚至加重病情。还可用于治疗其他精神病的兴奋躁动、紧张不安、幻觉、妄想等症状,对忧郁症状及木僵症状的疗效较差。 2、镇吐:
概述氯硫二苯胺的药理作用
1、氯硫二苯胺的抗精神病作用:目前认为,氯硫二苯胺通过阻断与情绪和思维有关的边缘系统的多巴胺受体而起抗精神病作用。而阻断网状结构上行激活系统的α肾上腺素受体,则与镇静安定的作用有关。正常人服用治疗量后,出现安静、活动减少、感情淡漠、注意力降低、对周围事物不感兴趣等反应。安静时可诱导入睡,但易被唤
简述氯硫二苯胺的禁忌症
1、有吩噻嗪类过敏史和骨髓抑制患者禁用氯硫二苯胺。 2、闭角型青光眼、前列腺增生及昏迷患者禁用氯硫二苯胺。 3、尿毒症、严重心血管疾病及肝损害的患者禁用氯硫二苯胺。 4、有癫痫史或有脑器质性病变的患者慎用或禁用氯硫二苯胺。 5、糖尿病、甲状腺功能低下者慎用和禁用氯硫二苯胺。
比色法测定土壤速效磷的方法
主要仪器及试剂配制仪器:塑料杯,往复式振荡机,分光光度计或光电比色计试剂: (1)0.03molL-1NH4F—0.025 molL-1HCl浸提剂称取1.11克NH4F溶于800毫升水中,加1.0molL-1HCl25毫升,然后稀释至1升,贮于塑料瓶中,其它试剂同前法。 (2)钼锑抗试剂