随机引物法
此法系可用于从低熔点琼脂糖凝胶中回收 DNA 的放射性标记 ( Feinberg 和 Vogelstein 1983,1984)。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理此法系可用于从低熔点琼脂糖凝胶中回收 DNA 的放射性标记 ( Feinberg 和 Vogelstein 1983,1984)。实验材料大肠杆菌 DNA 聚合酶Ⅰ Klenow 片段模板 DNA试剂、试剂盒醋酸氨牛血清白蛋白乙醇溴化乙啶NA 终止 贮存缓冲液随机引物缓冲液仪器、耗材碱性琼脂糖凝胶或变性聚丙烯酰胺凝胶沸水浴Sephadex G-50 离心柱实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液醋酸氨(10 mol/L)牛血清白蛋白(10 mg/ml)乙醇溴化乙啶(10 mg/ml)或 SYBR Gold 染液NA 终止/贮存缓冲液(50 mmol/L Tris-Cl (pH 7.5),50 mmol/L NaCl,5 mmol/L EDTA (p......阅读全文
寡核苷酸的性质
寡核苷酸极易与它们的互补对链接。
寡核苷酸微阵列
中文名称寡核苷酸微阵列英文名称oligonucleotide array定 义将一定长度、序列不同的寡核苷酸有序地排列固定在支持物(如玻璃片、尼龙膜等)上,供分子杂交分析的系统。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
反义寡核苷酸简介
反义寡核苷酸(AON)是一类通过序列特异地与靶基因DNA或mRNA结合而抑制该基因表达,在基因水平调控的分子药物。而硫代反义寡聚核苷酸(phosphorothioate oligonucleotides,简称PS2ODNs),是用硫原子将磷酸骨架上的非成键氧原子取代后形成的一类新的寡核苷酸类似物
寡核苷酸的相关操作
In this section, you will find techniques related to oligonucleotides, such as oligo purification by acrylamide gel, annealing two oligos to make doub
关于寡核苷酸的简介
寡核苷酸(Oligonucleotide),一般是指2~10核苷酸残基以磷酸二酯键连接而成的线性多核苷酸片段,但在使用这一术语时,对核苷酸残基的数目并无严格规定,在不少文献中,把含有30甚至更多核苷酸残基的多核苷酸分子也称作寡核苷酸。寡核苷酸可由仪器自动合成,它可作为DNA合成的引物(Prime
寡核苷酸阵列的概念
微阵列(DNA Microarray)也叫寡核苷酸阵列(Oligonucleotide array),是人类基因组计划(Human Genome Project,HGP)的逐步实施和分子生物学的迅猛发展及运用的产物,它是生物学家受到计算机芯片制造和广为应用的启迪,融微电子学、生命科学、计算机科学和光
细胞化学词汇寡核苷酸
寡核苷酸(Oligonucleotide),一般是指2~10核苷酸残基以磷酸二酯键连接而成的线性多核苷酸片段,但在使用这一术语时,对核苷酸残基的数目并无严格规定,在不少文献中,把含有30甚至更多核苷酸残基的多核苷酸分子也称作寡核苷酸。寡核苷酸可由仪器自动合成,它可作为DNA合成的引物(Primer)
寡核苷酸的应用介绍
寡核苷酸常用来作为探针确定DNA或RNA的结构,用于基因芯片、电泳、荧光原位杂交等过程中 。寡核苷酸合成的DNA(脱氧核糖核酸)可以用于链聚合反应,能放大确定几乎所有DNA的片段,在这个过程中寡核苷酸是作为引物,和DNA 中标记的互补片段结合,作成DNA的复制品。调控寡核苷酸用于抑制RNA片段,防止
简并寡核苷酸诱变实验
小段DNA序列中产生大量突变 实验材料 大肠杆菌 试剂、试剂盒
寡核苷酸的基本介绍
寡核苷酸(Oligonucleotide),一般是指2~10核苷酸残基以磷酸二酯键连接而成的线性多核苷酸片段,但在使用这一术语时,对核苷酸残基的数目并无严格规定,在不少文献中,把含有30甚至更多核苷酸残基的多核苷酸分子也称作寡核苷酸。寡核苷酸可由仪器自动合成,它可作为DNA合成的引物(Prime
寡核苷酸探针技术介绍
利用寡核苷酸探针可检测到靶基因上单个核苷酸的点突变。常用的寡核苷酸探针主要有两种:单一已知序列的寡核苷酸探针和许多简并性寡核苷酸探针组成的寡核苷酸探针库。单一已知序列寡核苷酸探针能与它们的目的序列准确配对,可以准确地设计杂交条件,以保证探针只与目的序列杂交而不与序列相近的非完全配对序列杂交,对于一些
寡核苷酸的应用介绍
寡核苷酸常用来作为探针确定DNA或RNA的结构,用于基因芯片、电泳、荧光原位杂交等过程中 。寡核苷酸合成的DNA(脱氧核糖核酸)可以用于链聚合反应,能放大确定几乎所有DNA的片段,在这个过程中寡核苷酸是作为引物,和DNA 中标记的互补片段结合,作成DNA的复制品。调控寡核苷酸用于抑制RNA片段,防
寡核苷酸的主要应用
反义寡核苷酸(AON)是一类通过序列特异地与靶基因DNA或mRNA结合而抑制该基因表达,在基因水平调控的分子药物。而硫代反义寡聚核苷酸(phosphorothioate oligonucleotides,简称PS2ODNs),是用硫原子将磷酸骨架上的非成键氧原子取代后形成的一类新的寡核苷酸类似物(图
简并寡核苷酸诱变实验
实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 DNA聚合酶dNTP甘油NaClEDTASDS无水乙醇仪器、耗材 水浴锅离心机分光光度计实验步骤 1. 设计寡核苷酸,其3‘端含有由8个核苷酸组成的回文结构,且包含某一限制性内切酶的识别位点;如果可能的话,5’端也应有一含某个限制性内切酶位点的序列。中间区段则应含目
寡核苷酸的主要应用
寡核苷酸常用来作为探针确定DNA或RNA的结构,用于基因芯片、电泳、荧光原位杂交等过程中 [2] 。寡核苷酸合成的DNA(脱氧核糖核酸)可以用于链聚合反应,能放大确定几乎所有DNA的片段,在这个过程中寡核苷酸是作为引物,和DNA 中标记的互补片段结合,作成DNA的复制品。调控寡核苷酸用于抑制RNA
寡核苷酸引物的作用
PCR技术中的引物的本质和作用。引物是一小段单链DNA或RNA,引物可以做为DNA复制开始时DNA聚合酶的结合位点,在细胞外的条件下,只有通过引物,DNA才可以开始进行复制。引物是人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与感兴趣区域一端的一条DNA模板链互补,另一个引物与感兴趣区域另一端的另一条DNA模
寡核苷酸的应用特点
寡核苷酸常用来作为探针确定DNA或RNA的结构,用于基因芯片、电泳、荧光原位杂交等过程中 。寡核苷酸合成的DNA(脱氧核糖核酸)可以用于链聚合反应,能放大确定几乎所有DNA的片段,在这个过程中寡核苷酸是作为引物,和DNA 中标记的互补片段结合,作成DNA的复制品。调控寡核苷酸用于抑制RNA片段,防止
简并寡核苷酸诱变实验
本方法的一个重要特点就是将单链的简并寡核苷酸转变成同源双链分子后直接克隆进常规载体。由于不同的寡核苷酸可通过其3’末端的回文结构杂交,因此,寡核苷酸实际上起互为引物的作用,在大肠杆菌DNA聚合酶I klenow片段作用下延伸。实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒DNA聚合酶dNTP甘油NaClEDTASDS
寡核苷酸探针的简介
基因探针,即核酸探针,是一段带有检测标记,且顺序已知的,与目的基因互补的核酸序列(DNA或RNA)。基因探针通过分子杂交与目的基因结合,产生杂交信号,能从浩瀚的基因组中把目的基因显示出来。根据杂交原理,作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件:①应是单链,若为双链,必须先行变性处理。②应带有容
寡核苷酸的优化设计
关键词:寡核苷酸;优化设计中图分类号:Q524 在核酸分子杂交、DNA序列测定和通过PCR放大DNA片段等实验中,都需要使用寡核苷酸作为探针或引物,而对这些反应的质量起最重要影响作用的,就是这些寡核苷酸探针或引物。用优化的寡核苷酸进行实验能够很快得到好的结果,而用不够合适的寡核苷酸时,常常得
简述寡核苷酸的应用
寡核苷酸常用来作为探针确定DNA或RNA的结构,用于基因芯片、电泳、荧光原位杂交等过程中 [2] 。 寡核苷酸合成的DNA(脱氧核糖核酸)可以用于链聚合反应,能放大确定几乎所有DNA的片段,在这个过程中寡核苷酸是作为引物,和DNA 中标记的互补片段结合,作成DNA的复制品。 调控寡核苷酸用于
寡核苷酸微阵列的定义
中文名称寡核苷酸微阵列英文名称oligonucleotide array定 义将一定长度、序列不同的寡核苷酸有序地排列固定在支持物(如玻璃片、尼龙膜等)上,供分子杂交分析的系统。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
关于寡核苷酸的应用介绍
寡核苷酸常用来作为探针确定DNA或RNA的结构,用于基因芯片、电泳、荧光原位杂交等过程中 。 寡核苷酸合成的DNA(脱氧核糖核酸)可以用于链聚合反应,能放大确定几乎所有DNA的片段,在这个过程中寡核苷酸是作为引物,和DNA 中标记的互补片段结合,作成DNA的复制品。 调控寡核苷酸用于抑制R
寡核苷酸微阵列的定义
中文名称寡核苷酸微阵列英文名称oligonucleotide array定 义将一定长度、序列不同的寡核苷酸有序地排列固定在支持物(如玻璃片、尼龙膜等)上,供分子杂交分析的系统。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
简并寡核苷酸基因混编实验
简并寡核苷酸基因混编 实验材料 pBSII KS 质粒 大肠杆菌 DH5α
简并寡核苷酸基因混编实验
蛋白酶生化性质的改善可以通过对该酶基因的错掺突变和 DNA 混编方法实现。混编技术可用于同一基因的一组突变体,或者对相关家族基因的片段进行新的组合,产生嵌合突变基因产物。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒编著。实验材料pBSII KS 质粒大肠杆菌 DH5α试剂、
筛选寡核苷酸针的原则
筛选寡核苷酸针的原则下面是筛选寡核苷酸针的一些原则。一.长18~50nt,较长探针杂交时间较长,合成量低;较短探针特异性会差些。二.碱基成分:G+C含量为40%~60%,超出此范围则会增加非特异杂交。三.探针分子内不应存在互补区,否则会出现抑制探针杂交的“发夹”状结构。四.避免单一碱基的重复出现(不
寡核苷酸介导的诱变实验
实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 PEGTEATP寡核苷酸诱变引物T4多核苷酸激酶EDTASSC仪器、耗材 水浴锅电泳仪培养箱实验步骤 1. 将一个单链噬菌体产生的噬斑转移至含有1 ml 灭菌TY培养基的1.5 ml 微量离心管中,60℃温育5 min,以杀灭细菌细胞,剧烈振荡以释放琼脂中的噬菌体,
随机寡核苷酸诱变的概念
中文名称随机寡核苷酸诱变英文名称random oligonucleotide mutagenesis定 义通过合成一系列突变寡核苷酸引物对基因组某个区域进行聚合酶链反应扩增,获得大量突变的DNA,以研究突变对功能的影响。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
寡核苷酸介导的诱变实验
基本方案 实验材料 大肠杆菌 试剂、试剂盒