杆状病毒毒种贮液的制备

实验材料 杆状病毒试剂、试剂盒 胎牛血清重组病毒仪器、耗材 培养箱培养瓶转子实验步骤 从单层培养中制备: 1a. 以毎瓶1.8×107 Sf9细胞的密度,将细胞接种于两个150 cm2 培养瓶,在含10%胎牛血清的完全培养液中培养。于27℃让细胞贴壁3 h,然后移去完全培养液。以感染复数为0.1的病毒量,加入5 ml 含野生型或重组病毒的无血清完全培养液。于27℃温育1 h。 2a. 去掉病毒接种物,代之以20 ml 10%胎牛血清的完全培养液,于27℃温育1 h。每天在光学显微镜下检查细胞有无包涵体出现或细胞病变效应。 3a. 当大多数细胞含有包涵体或显示出细胞病变效应时(通常在感染后4至5天),收获病毒。将感染的培养物移入灭菌试管中,于4℃以1 000 g 离心10 min,将上清移至一新的灭菌试管,分别吸取1 m......阅读全文

杆状病毒毒种贮液的制备

实验材料 杆状病毒试剂、试剂盒 胎牛血清重组病毒仪器、耗材 培养箱培养瓶转子实验步骤 从单层培养中制备: 1a.  以毎瓶1.8×107 Sf9细胞的密度,将细胞接种于两个150 cm2 培养瓶,在含10%胎牛血清的完全培养液中培养。于27℃让细胞贴壁3 h,然后移去完全培养液。以感染复数为

杆状病毒毒种贮液的制备实验

杆状病毒是一类具有囊膜包裹的双链环状DNA病毒,其基因组大小为80~180 kb,在自然界中以节肢动物作为专一性宿主进行感染和传播。实验材料杆状病毒试剂、试剂盒胎牛血清重组病毒仪器、耗材培养箱培养瓶转子实验步骤从单层培养中制备: 1a.  以毎瓶1.8×107 Sf9细胞的密度,将细胞接种于两个15

常用贮液与溶液(一)

1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):

常用贮液与溶液(二)

100 mmol/L dNTP 溶液(dNTP solutions)可以购买到100mmol/L纯dNTPs贮液,-80℃可贮存至少6个月。10mmol/L dNTP混合液成分及终浓度配制20ul溶液各成分的用量10mmol/L dATP10mmol/L dCTP 10mmol/L dGTP10mm

重组杆状病毒的纯化实验

实验材料 杆状病毒试剂、试剂盒 琼脂牛血清仪器、耗材 培养瓶冻存管实验步骤 1.  制备病毒上清的系列稀释液,该病毒上清获得自在无血清完全培养液中转染 pAC360β-gal DNA的细胞。在含150 μg/ml X-gal 的琼脂糖顶层覆盖物下病毒形成蚀斑。 2.  当蚀斑形成后,用灭菌巴斯德吸管

杆状病毒储液制备实验

基本方案 从悬浮培养中制备 基本方案 从单层培养中制备 噬斑试验测定滴度             实验方法原理 实验材料

杆状病毒储液制备实验

实验方法原理 实验材料 悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒 含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材 150 mm 培养瓶 27℃ 培养箱 倒置显微镜 带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机 带螺口盖的冻存管 液氮罐 500 ml 旋转细

重组杆状病毒的纯化实验——编码β半乳糖苷酶

杆状病毒是一类在自然界中专一性感染节肢动物的DNA病毒,可用于(1)作为基因工程病毒杀虫剂 ,提高害虫防治效率(2)作为超高效的真核基因表达载体 ,生产有用的工程蛋白(3)研究杆状病毒基因组的结构与功能(4)研究真核基因表达的调控机制。实验方法原理由于昆虫杆状病毒环状双链DNA基因组很大 (约 13

液相色谱仪贮液器概述

液相色谱仪贮液器是用来存放流动相的容器,供给符合要求的流动相以完成液相色谱分析工作。一、贮液器材质:贮液器材质应耐腐蚀,对洗脱液呈化学惰性,可为玻璃、不锈钢和聚四氟乙烯等材料。二、贮液器容积:贮液器容积与色谱柱的粗细、输液泵的种类和所采用的液相色谱系统有关,一般容积约为0.5~2L,以便在不重复加液

提高入贮种质量对种子低温低湿样品柜安全贮种的重要性

    不可否认,种子低温低湿样品柜所运用的低温低湿储藏技术是我国种子产业迈向现代化贮藏管理的重要举措,有效保证了种子经营部门种子的安全越夏,延长了种子的使用寿命,目前采用种子低温低湿样品柜储藏的种子种类涉及到粮、棉、油、甜菜、红麻、瓜果、蔬菜等七大类作物,经济有效的保证了种子质量,不过在使用种子

高效液相色谱仪贮液器概述

高效液相色谱仪贮液器是用来存放流动相的容器,供给符合要求的流动相以完成液相色谱分析工作。一、贮液器材质:贮液器材质应耐腐蚀,对洗脱液呈化学惰性,可为玻璃、不锈钢和聚四氟乙烯等材料。二、贮液器容积:贮液器容积与色谱柱的粗细、输液泵的种类和所采用的液相色谱系统有关,一般容积约为0.5~2L,以便在不重复

酚麻美敏口服液的贮-藏

  遮光,密封,置阴凉处保存

杆状病毒储液制备实验——从单层培养中制备

实验材料单层培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1

杆状病毒储液制备实验——噬斑试验测定滴度

实验材料对数生长期单层培养的 Sf 9 细胞试剂、试剂盒杆状病毒储液昆虫细胞培养液仪器、耗材琼脂糖顶层覆盖物台盼蓝顶层覆盖物(选用)60 mm 组织培养皿27℃ 培养箱1.5 ml 带螺口盖的冻存管实验步骤1. 用含 10% 胎牛血清的 TNM-FH 培养液稀释处于对数生长期的 Sf 9 细胞至约

杆状病毒储液制备实验——从悬浮培养中制备

实验材料悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1

杆状病毒介绍

状病毒是一类在自然界中专一性感染节肢动物的DNA病毒,病毒粒子呈杆状,基因组为双链环状DNA分子,DNA以超螺旋形式压缩包装在杆状衣壳内,大小在90~180 Kb之间。目前杆状病毒作为高效、安全的无公害生物虫剂广泛应用于害虫防治。 杆状病毒只来源于无脊椎动物,虽然已发现600多种杆状病毒,但进行

贮液容器连接件泄露测试仪---徽涛

贮液容器连接件泄漏测试仪 一,用途采用可编程控制器,触摸屏,压力传感器,加压装置,机载打印机等组成,中英文菜单显示,人机对话设定各项参数自动运行测试。生产单位,批次可任意输入,操作方便。并采用三级密码,信息安全可靠。产品规格、测试压力值设定、保持时间设定,打印设定、测试、加压、减压、时间、标定,检定

用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验

实验方法原理 空斑形成单位 (plaque forming units, PFUs)试验,是将不同稀释倍数的动物病毒与平铺于平板表面的宿主细胞混合,当病毒颗粒在一大片宿主细胞上引发感染时,会造成细胞被溶解而形成空斑,每个空斑系由一个病毒颗粒所造成,计算空斑数目再乘以稀释倍数,即可得知原来的病毒感

用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验4

在细胞培养板内做病毒空斑形成单位试验实验材料病毒试剂、试剂盒95% 酒精胰酶含 5%小牛血清的 Eagle仪器、耗材细胞培养板实验步骤(1) 用细胞培养板 (6孔),若用旧板,洗净后浸于 95% 酒精中5 min, 再用紫外线照射 2-4 h备用,新板可直接使用。(2) 将传代细胞系经胰酶消化分散后

用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验2

虫媒病毒在鸡胚成纤维细胞中的空斑形成单位试验实验方法原理病毒常杀死被病毒感染的细胞 即产生致细胞病变作用。用只染活细胞(如中性红)或只染死细胞(如台盼兰)的染料对单层细胞染色以检测空斑。也可以使用活性染料溴化二苯基四氮唑(MTT) 进行染色,使用 MTT 的优点是黄色的 MTT 能将活细胞染成深蓝色

用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验3

用传代细胞系平皿法测量病毒空斑形成单位实验材料病毒细胞系试剂、试剂盒含 10% 小牛血清、89%水解乳蛋白一酵母浸液培养液仪器、耗材培养皿实验步骤(1) 将单层细胞 (2X 106/ml, 6 ml)培养在直径 60 mm 的平皿上,生长液为含 10% 小牛血清、89%水解乳蛋白一酵母浸液培养液,加

盐酸倍他司汀口服液的不良反应及贮

  不良反应  用本品偶有口干、胃部不适、心悸、皮肤瘙痒等,个别病例偶有恶心、头晕、头胀、出汗等,一般不影响继续服药。  贮藏  密封,在干燥处保存。

杆状病毒滴度检测

实验概要本实验介绍了检测病毒滴度的方法。实验原理根据噬菌斑数计算病毒滴度。主要试剂1. 4% agarose gel:2g agrose   50ml 水,高压灭菌2. 2×Grace(unsupplemented):9.14g粉末(invitrogen) 0.07gNaHCO3 H2O,调PH6.

痢特灵片的贮----藏

  遮光,密闭保存。

排毒嫩肤-8种蔬菜越吃越美

  导读:现在越来越多的研究数据表明,美容和排毒有着密不可分的关系,健康和排毒的关系同样也十分密切。那么,想要身体健康,皮肤水水嫩嫩,排毒就很重要了。现在就随小编一起看看,哪8种蔬菜,MM们吃了既健康又排毒吧!冬菇(Mushrooms)  功效:提高人体排毒能力,降低胆固醇  冬菇含

用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验_蚀斑试验法

实验方法原理空斑形成单位 (plaque forming units, PFUs)试验,是将不同稀释倍数的动物病毒与平铺于平板表面的宿主细胞混合,当病毒颗粒在一大片宿主细胞上引发感染时,会造成细胞被溶解而形成空斑,每个空斑系由一个病毒颗粒所造成,计算空斑数目再乘以稀释倍数,即可得知原来的病毒感染单位

杆状病毒表达系统的应用

用杆状病毒做载体,可高效表达外源基因,到目前为止已有几百个包括动植物、病毒、细菌、真菌的基因在昆虫细胞或幼虫体内得到高效表达。这个表达体系的主要特点是可以获得大量抗原性、免疫原性较好的,与天然蛋白功能相似的可溶性重组蛋白。这一特点优于细菌、酵母和哺乳动物细胞表达体系。重组杆状病毒感染昆虫细胞后,可以

杆状病毒表达系统的应用

杆状病毒是近年来被广泛用于高效表达外源蛋白的载体系统,本文就杆状病毒表达系统的生物学特性、转染载体、重组病毒的筛选、基因表达调控及其发展应用等方面作一概述。

杆状病毒转染载体的分类

用于表达融合型蛋白的转染质粒是一类早期构建的转染质粒,它包括pAC系列[4],如pAC101、pAC311、pAC360等。在每个载体中,多角体蛋白基因启动子下游ATG启始密码后含有一个单一的BamHⅠ酶切位点,当外源基因和多角体基因的读码框架正确时,就可以获得含1个或几个多角体蛋白N端氨基酸的融合

杆状病毒昆虫细胞表达系统

实验步骤一、杆状病毒表达载体最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成,其位于病毒基因组多角体座位,替代了非必需的野生型多角体基因。在实验室中