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实验材料 杆状病毒试剂、试剂盒 胎牛血清重组病毒仪器、耗材 培养箱培养瓶转子实验步骤 从单层培养中制备： 1a. 以毎瓶1.8×107 Sf9细胞的密度，将细胞接种于两个150 cm2 培养瓶，在含10%胎牛血清的完全培养液中培养。于27℃让细胞贴壁3 h，然后移去完全培养液。以感染复数为0.1的病毒量，加入5 ml 含野生型或重组病毒的无血清完全培养液。于27℃温育1 h。 2a. 去掉病毒接种物，代之以20 ml 10%胎牛血清的完全培养液，于27℃温育1 h。每天在光学显微镜下检查细胞有无包涵体出现或细胞病变效应。 3a. 当大多数细胞含有包涵体或显示出细胞病变效应时（通常在感染后4至5天），收获病毒。将感染的培养物移入灭菌试管中，于4℃以1 000 g 离心10 min，将上清移至一新的灭菌试管，分别吸取1 m......阅读全文
杆状病毒是一类在自然界中专一性感染节肢动物的DNA病毒，可用于（1）作为基因工程病毒杀虫剂 ,提高害虫防治效率（2）作为超高效的真核基因表达载体 ,生产有用的工程蛋白（3）研究杆状病毒基因组的结构与功能（4）研究真核基因表达的调控机制。实验方法原理由于昆虫杆状病毒环状双链DNA基因组很大 (约 13
实验材料 杆状病毒试剂、试剂盒 琼脂牛血清仪器、耗材 培养瓶冻存管实验步骤 1. 制备病毒上清的系列稀释液，该病毒上清获得自在无血清完全培养液中转染 pAC360β-gal DNA的细胞。在含150 μg/ml X-gal 的琼脂糖顶层覆盖物下病毒形成蚀斑。