光活化的核苷酸类似物介导的RNA蛋白的交联实验
光化学交联技术是研究核搪核蛋内复合物中 RNA 与蛋白的相互作用的有效手段。 其基本原理是未经任何化学修饰的 RNA -蛋白天然复合物在短波长紫外线（254 nm ) 照射时，RNA 中的核苷酸和蛋白质中的氨基酸会产生光化学反应，转变为活性状态，进而形成分子间共价交联。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法原理光化学交联技术是研究核搪核蛋内复合物中 RNA 与蛋白的相互作用的有效手段。 其基本原理是未经任何化学修饰的 RNA -蛋白天然复合物在短波长紫外线（254 nm ) 照射时，RNA 中的核苷酸和蛋白质中的氨基酸会产生光化学反应，转变为活性状态，进而形成分子间共价交联。实验材料FPLC纯化的核苷酸Sephadex G-50试剂、试剂盒缓冲液A甘油乙酰化牛血清白蛋白缓冲液B缓冲液C肝素缓冲液F酚氯仿异戊醇无RNase的DNaseI叠氮苯酰溴缓冲液D缓冲液CTBE缓冲液蛋白上样缓冲液SDS变性聚丙烯酰胺凝胶转......阅读全文
关于G蛋白介导的信号转导途径的介绍
G蛋白可与鸟嘌呤核苷酸可逆性结合。由γ亚基组成的异三聚体在膜受体与效应器之间起中介作用。小G蛋白只具有G蛋白亚基的功能，参与细胞内信号转导。信息分子与受体结合后，激活不同G蛋白，有以下几种途经： （1）腺苷酸环化酶途径 通过激活G蛋白不同亚型，增加或抑制腺苷酸环化酶（AC）活性，调节细胞内c
磷酸交联AFFIGEL－10－亲和介质实验——磷酸酪氨酸交联
实验方法原理磷酸酪氨酸在肽交联时所用的无水条件下是不溶的，因此交联必须在水相条件下进行。按此节的步骤最终能产生 10 ml 柱床体积的亲和树脂；与肽类似，每毫升 Affi-Gel 10上能交联 3 μmol 磷酸酪氨酸。实验材料磷酸酪氨酸Affi-Gel 10试剂、试剂盒NaOH （可选）碳酸氢钠乙
环核苷酸依赖性蛋白激酶分析实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 具有环核苷酸依赖性蛋白激酶活性的酶样品
环核苷酸依赖性蛋白激酶分析实验
实验方法原理 实验材料 具有环核苷酸依赖性蛋白激酶活性的酶样品10 mg／ml 组蛋白 2B（溶于水）试剂、试剂盒 [γ-32P] ATP 溶液5 × 环核苷酸依赖性蛋白激酶反应缓冲液20 × 环核苷酸仪器、耗材 30℃ 水浴实验步骤 1. 每个分析反应按以下比例将反应组分加入 1.5 ml 微量离
环核苷酸依赖性蛋白激酶分析实验
蛋白激酶的分析是使用标记的供体底物，当酶样品中含有磷酸转移酶活性时，蛋白 质或多肽受体底物中标记物的积累就很容易被检出。实验材料具有环核苷酸依赖性蛋白激酶活性的酶样品10 mg／ml 组蛋白 2B（溶于水）试剂、试剂盒[γ-32P] ATP 溶液5 × 环核苷酸依赖性蛋白激酶反应缓冲液20 × 环核
引物介导的原位标记技术实验
实验材料 中期染色体分裂相抗地高辛抗体试剂、试剂盒 三磷酸核苷Tth 或 Taq DNA 聚合酶NaClEDTA20 X SSCTween-20乙醇脱脂奶粉（粉末）10 X dNTP反应终止液洗脱液封闭液仪器、耗材 盖玻片染色缸恒温装置实验步骤 一、标准一步反应PRINS 技术的操作规程有两套，一套
引物介导的原位标记技术实验
实验材料 中期染色体分裂相 抗地高辛抗体 试剂、试剂盒 三磷酸核苷 Tth 或 Taq DNA 聚
磷酸钙介导的真核细胞转染实验
实验材料 真核细胞试剂、试剂盒 CaCl2HEPES缓冲液氯化铯PBS仪器、耗材 培养箱锥形管离心管实验步骤 1. 在转染前一天将细胞分入10 cm 组织培养平板中。当被转染的细胞是贴壁细胞，倍增时间为18~24 h时，一般按1：15从长满的培养皿中分细胞效果较好，转染的当天，细胞应在培养
磷酸钙介导的真核细胞转染实验
磷酸钙法 高效转染法 实验材料 真核细胞 试剂、试剂盒
引物介导的原位标记技术实验
引物介导的原位标记技术（primed in situ labeling，PRINS) 是一种对细胞及组织的特异 DNA 序列染色的杂交技术，它能够得到和 FISH 技术相同类型的结果。实验材料中期染色体分裂相抗地高辛抗体试剂、试剂盒三磷酸核苷Tth 或 Taq DNA 聚合酶NaClEDTA20 X
方案7－位点特异性蛋白质DNA－光交联法实验
实验材料DNA 聚合酶 I Klenow 片段限制性内切酶A 和 B单链 DNA 结合蛋白单链 DNA 模板T4 DNA 连接酶T4 DNA 聚合酶T4 多聚核苷酸激酶T7 DNA 聚合酶上游引物试剂、试剂盒10 X 退火缓冲液ATP对叠氮化苯甲酰甲溴生物素-11-dATP生物素-11-dCTP生物
鸟嘌呤核苷酸解离抑制蛋白的定义
中文名称鸟嘌呤核苷酸解离抑制蛋白英文名称guanine nucleotide dissociation inhibitor;GDI定 义一种对G蛋白的活性起负调节作用的蛋白质。抑制G蛋白释放鸟苷二磷酸（GDP）和与鸟苷三磷酸（GTP）结合，使G蛋白维持在无活性的状态。应用学科细胞生物学（一级学科）
糖核苷酸转运蛋白的基本信息
中文名称糖核苷酸转运蛋白英文名称sugar nucleotide transporter定 义一种膜结合蛋白质。其功能是帮助糖核苷酸从胞质转运到高尔基体内腔中去。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），糖类（二级学科）
鸟嘌呤核苷酸解离抑制蛋白的定义
中文名称鸟嘌呤核苷酸解离抑制蛋白英文名称guanine nucleotide dissociation inhibitor;GDI定 义一种对G蛋白的活性起负调节作用的蛋白质。抑制G蛋白释放鸟苷二磷酸（GDP）和与鸟苷三磷酸（GTP）结合，使G蛋白维持在无活性的状态。应用学科细胞生物学（一级学科）
新蛋白质交联抗体的标记和修饰使用方法
介绍现在的研究中，一个大生物分子与另一个大分子的共价结合，如抗体与酶或酶与DNA的共价结合，仍是研究人员实验中的重点之一。其中有几种方法可用于交联两个生物分子。一种常见的方法是使用一种小分子交联剂（如Sulfo-SMCC）。SMCC的一端有胺反应性NHS酯基与蛋白质的游离胺（-NH2）反应，另一端有
哪些因素引起蛋白质交联
蛋白质的变性是蛋白质空间和形态、功能发生的变化，最简单的例子就是，把打碎的鸡蛋里面加入盐的成分，鸡蛋由浑浊状态变成透明状态，这就是蛋白质的变性化学交联和酶交联.蛋白质化学交联剂主要是戊二醛,酶交联剂主要是转谷氨酰胺酶;通过蛋白质交联可改变食品组织结构和功能性质蛋白质是由基因组成的，基因是由每一段的D
Nature－子刊：研究lncRNA功能的新方法
长非编码RNA（lncRNA）是长达两百个核苷酸以上的转录本。虽然lncRNA没有编码任何蛋白质，但它们在不同组织和发育阶段的表达依然具有特异性，这说明lncRNA具有重要的生物学意义。细胞中绝大多数lncRNA位于细胞核，它们对应的DNA区域有的与蛋白编码基因重叠，有的位于基因间或者内含子中。
Buccutite™全新一代的蛋白交联技术的原理与运用（二）
（3）快速串联抗体标记试剂盒： PE和APC偶联的串联染料经常在流式细胞仪和其他应用中使用，因为它们对于多参数可视化非常有用。由于串联染料可以被同一激光激发，但有不同的发射结果，因此使用串联染料可以提高实验效率。所有的Buccutite™快速串联抗体标记试剂盒都具有相
Buccutite™全新一代的蛋白交联技术的原理与运用（一）
Buccutite™交联技术提供了一种将蛋白质与另一种大分子（例如抗体或酶）偶联的有效方法。与常用的SMCC交联技术相比，Buccutite™交联技术更结实，产率更高，它利用两个独特的排他性的接头：Buccutite™MTA 和Buccutite™ FOL，每个基团末端都具
免疫球蛋白G(IgG)的纯化——蛋白A交联琼脂糖凝胶亲和层析
实验步骤 蛋 白 A 通 常 用 于 人（除 IgG3 夕 h 小 鼠 IgG1 结合力也较弱）、兔 、豚鼠和猪抗体的纯化。材 料腹 水 或 M Ab上 清（单 元 1. 4)PBS, pH8. O和pH7. 3lmol/L NaOH蛋 白 A 交联琼脂糖凝胶CL-4B (Pharmacia Bio
ApoE4显著恶化tau蛋白介导的神经退化
2017年9月23日/生物谷BIOON/---在将近25年之前，人们鉴定出一种ApoE4基因变异体是阿尔茨海默病的一种主要风险因子，这种变异体让一个人患上这种神经退行性疾病的几率增加了高达12倍。然而，人们并不清楚为何这种变异体是如此危险。当ApoE4蛋白存在时，β-淀粉样蛋白（Aβ）团块在大脑
断裂型内合肽介导的蛋白质环化
环化蛋白质具有3个明显的特性：①提高稳定性和活性，这是由于环化的蛋白质可以减少非折叠状态的构象熵值；②折叠速度快，这是因为其减少了折叠途径的数目的缘故；③对N端和C端特异性的蛋白酶具有抗性，因此能改善在体内的稳定性。由于以上特性，环化蛋白质在蛋白质工程和医药工业中备受重视。以IMPACT～TWIN(
水生所揭示Smad蛋白介导BMP信号的调控机制
BMP蛋白是一类形态发生素(morphogen)，对胚胎早期发育的背腹轴向决定起着关键作用，其功能丧失将导致腹侧发育的严重缺陷。BMP信号由3类受体型Smad——Smad1、Smad5、Smad8 (Smad9)来介导。然而，这些受体型Smad是如何在胚胎发育早期进行精细调控，在整体水平上调
发现介导癌细胞关键生命活动的蛋白质
蛋白质是生命的组成部分——在细胞内，蛋白质结合成大型的大分子复合物，即蛋白质的联合体，它们相互协作以完成特定的功能。大量的癌症研究集中在寻找这些蛋白质复合物的抑制剂。像mTOR和ATR这样的激酶，以及像端粒酶这样在肿瘤中过度表达的酶，都属于这类复合物。 有一些蛋白质(称为伴侣蛋白和共同伴侣蛋白
紫外交联的基本定义
DNA结合蛋白与DNA结合位点的结合后经紫外照射后可形成共价键。如果DNA预先经过标记，则共价结合的复合物经电泳分离和制作放射自显影图谱，能够快速准确的检测DNA结合蛋白及其分子量。
关于交联聚乙烯的简介
聚乙烯（PE）是五大通用塑料之一，其产量和消费量位居各种合成树脂之首，在工业、农业和日常生活中得到广泛的应用。但是聚乙烯的耐高温性能较差。力学性能及耐化学性能有时也不能满足实际使用的要求。因此对聚乙烯进行改性一直是聚乙烯产品开发应用的关键，聚乙烯交联技术就是提高其材料性能的一种重要技术。经过交联
紫外交联仪的特点
·为使核苷酸固定在杂交膜上，传统的方法是将膜置于80℃真空烘箱中烘2小时在本紫外交联仪上仅需在254nm紫外光下照射几秒钟即可。 ·紫外照射可使杂交信号比传统烘烤法提高5-10倍。 ·由于紫外交联仪配置了一种紫外能量程序设计系统（Joules/c㎡）,即其中的时间积分仪连续检测紫外光的照射。
概述交联聚乙烯的应用
交联聚乙烯由于具有优异的性能，被用作火箭、导弹、电机、变压器等所需要的耐高压、高周波、耐热的绝缘材料和电线电缆包覆物．制造热收缩管、热收缩膜、各种耐热管材、泡沫塑料、耐腐蚀的化学设备衬里、部件及容器，制造阻燃建材等。目前用量最大的领域主要是电线电缆、管材和泡沫塑料等。
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验—依赖环核苷酸
试剂、试剂盒激酶分析缓冲液组蛋白 2B 储存液环核苷酸依赖的蛋白质激酶分析缓冲液环核苷酸储存液实验步骤1. 在置于冰上的离心管内配制含下列成分的 20 μl 反应混合物：5X 激酶分析缓冲液 4 μl，10 mg/ml 组蛋白 2B 储存液 1 μl，[γ-32P] ATP（终浓度为 5 μCi/5
生长素的类似物介绍
吲哚乙酸可以人工合成。生产上使用的是人工合成的类似生长素的物质如吲哚丙酸、吲哚丁酸、萘乙酸、2,4－D、4-碘苯氧乙酸等，可用于防止脱落、促进单性结实、疏花疏果、插条生根、防止马铃薯发芽等方面。愈伤组织容易生根；反之容易生芽。