光活化的核苷酸类似物介导的RNA蛋白的交联实验
光化学交联技术是研究核搪核蛋内复合物中 RNA 与蛋白的相互作用的有效手段。 其基本原理是未经任何化学修饰的 RNA -蛋白天然复合物在短波长紫外线（254 nm ) 照射时，RNA 中的核苷酸和蛋白质中的氨基酸会产生光化学反应，转变为活性状态，进而形成分子间共价交联。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法原理光化学交联技术是研究核搪核蛋内复合物中 RNA 与蛋白的相互作用的有效手段。 其基本原理是未经任何化学修饰的 RNA -蛋白天然复合物在短波长紫外线（254 nm ) 照射时，RNA 中的核苷酸和蛋白质中的氨基酸会产生光化学反应，转变为活性状态，进而形成分子间共价交联。实验材料FPLC纯化的核苷酸Sephadex G-50试剂、试剂盒缓冲液A甘油乙酰化牛血清白蛋白缓冲液B缓冲液C肝素缓冲液F酚氯仿异戊醇无RNase的DNaseI叠氮苯酰溴缓冲液D缓冲液CTBE缓冲液蛋白上样缓冲液SDS变性聚丙烯酰胺凝胶转......阅读全文
脂染介导的－DNA－转染实验
实验材料 指数生长的哺乳动物细胞培养物 试剂、试剂盒 脂染试剂 NaCl 枸橼酸钠
脂染介导的－DNA－转染实验
下述方法是 Mark Evans 所研究的一种方法的改进（Alexion Pharmaceuticals,New Haven,Connecticut)。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W.拉塞尔。实验材料指数生长的哺乳动物细胞培养物试剂、试剂盒脂染试剂N
生物粒子介导的－DNA－转染实验
下面是拫据 Horch 等（1999)、Sanford 等（1993)、主要基因枪生产商的出版物（US/EG Bulletins 1688 and 2087;Bio-Rad) 以及 Steve Finkbeiner(University of California,San Francisco) 建立
补体介导的细胞毒实验
实验方法原理带有特异抗原的靶细胞（如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞）与相应抗体结合后，在补体的参与下，引起靶细胞膜损伤，导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料（例如：伊红-Y、台盼蓝）可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色，故可用于指示死细胞或濒死细胞，而活细胞不着色。此即补体依赖性细胞毒试验，利用细胞
补体介导的细胞毒实验
实验方法原理 带有特异抗原的靶细胞（如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞）与相应抗体结合后，在补体的参与下，引起靶细胞膜损伤，导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料（例如：伊红-Y、台盼蓝）可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色，故可用于指示死细胞或濒死细胞，而活细胞不着色。此即补体依赖性细胞毒试验，利用细
生物粒子介导的－DNA－转染实验
试剂、试剂盒 CaCl2乙醇甘油亚精胺质粒DNA细胞生长培养基仪器、耗材 基因枪金或钨粒子镜头纸微量离心管需转染的细胞或组织实验步骤 材料缓冲液与溶液贮存液、缓冲液与试剂的成分见附录1。稀释贮存液至所需浓度CaCl2(2.5mol/L)乙醇未曾打开过的纯乙醇一瓶。乙醇有吸湿性，在空气中会吸收水分。在
脂质体介导的细胞转染实验
实验概要学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法—脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法，观测外源蛋白的表达（绿色荧光蛋白），为染色准备实验材料。实验原理外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂
生物粒子介导的－DNA－转染实验
生物粒子介导的 DNA 转染实验 试剂、试剂盒 CaCl2 乙醇
补体介导的细胞毒实验
实验方法原理 带有特异抗原的靶细胞（如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞）与相应抗体结合后，在补体的参与下，引起靶细胞膜损伤，导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料（例如：伊红-Y、台盼蓝）可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色，故可用于指示死细胞或
补体介导的细胞毒实验
实验方法原理 带有特异抗原的靶细胞（如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞）与相应抗体结合后，在补体的参与下，引起靶细胞膜损伤，导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料（例如：伊红-Y、台盼蓝）可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色，故可用于指示死细胞或
蛋白质（抗体）和酶（过氧化物酶）的交联实验
实验材料半胱胺试剂、试剂盒过氧化物酶SMCC-溶液仪器、耗材交联葡聚糖 G-25 色谱柱分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」将 10 mg 过氧化物酶溶解到 1 ml 0.1 mol/L pH 7.0 放入磷酸二氢钾中，加热至 30℃，并加入 60 ul SMCC 溶液（终浓度 15 m
蛋白质（抗体）和酶（过氧化物酶）的交联实验
实验方法原理 实验材料 半胱胺试剂、试剂盒 过氧化物酶SMCC-溶液仪器、耗材 交联葡聚糖 G-25 色谱柱分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」将 10 mg 过氧化物酶溶解到 1 ml 0.1 mol/L pH 7.0 放入磷酸二氢钾中，加热至 30℃，并加入 60 ul SMC
蛋白质（抗体）和酶（过氧化物酶）的交联实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 半胱胺
核糖体RNA的组成及结构
组成 rRNA一般与 核糖体蛋白质结合在一起，形成 核糖体（ribosome），如果把rRNA从核糖体上除掉，核糖体的结构就会发生塌陷。 原核生物的核糖体所含的rRNA有5S、16S及23S三种。S为 沉降系数（sedimentation coefficient），当用 超速离心测定一个粒子的
交联聚乙烯化学交联法的概述
化学交联则是采用化学交联剂使聚合物产生交联，由线性结构转变为网状结构。 交联剂的选择应视聚合物品种，加工工艺和制品性能而定，理想的交联剂除满足一些具体的要求外，还应具有如下基本要求：交联率高，交联结构稳定；加工安全性大，使用方便，加入树脂后的有效期适中，无过早或过晚交联之弊；不影响制品的加工性
大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ－Klenow片段实验—随即寡核苷酸引物介导
实验方法原理此法是一种用以产生高放射比活、放射标记均匀分布的04八片段的切口平移方法。实验材料DNA试剂、试剂盒TEdNTP仪器、耗材水浴锅实验步骤1. 用合适的限制性内切酶消化DNA，DNA片段经电泳纯化或乙醇沉淀，用TE缓冲液重悬。 2. 在冰浴中混合下列物质：（1）2.5 μl 0.5mm
DNA交联的概念
中文名称DNA交联英文名称DNA crosslink定 义DNA分子的两条链或同一DNA链的不同区段的侧链间形成的共价相互作用。通过交联能增加DNA分子的刚性。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
探索RNA与蛋白的相互作用，你需要这两种检测
从DNA到蛋白质，这是一个相当复杂的过程。转录DNA的代码，这只是万里长征的第一步。随后，大量蛋白质编辑RNA，带领它从细胞核到细胞质，控制其稳定性，并指导其翻译。 据印第安纳大学的副教授Sarath Chandra Janga介绍，数百个RNA结合蛋白（RBP）参与了这个过程。Janga正在
揭秘Piezo蛋白介导机体触觉的分子机制
我们的身体能够感知多种机械刺激，我们的触觉能够有效区分微风吹过皮肤的感觉和疼痛的按压感，而其它系统则能够检测到肌肉的伸展，甚至血压；我们感知这些东西的能力需要一种外力，其能够在遍布机体不同组织的感觉神经元细胞的微小末梢转化为电信号，其中两个相关蛋白：Piezo1和Piezo2离子通道就能够通过允
农杆菌介导的大麦转化方法实验
实验材料 植物凝胶pBract 质粒pSoup 质粒试剂、试剂盒 利福平卡那霉素仪器、耗材 MG L 培养基实验步骤 1. 组织培养基的准备提前准备好所需浓度 2 倍的植物凝胶，高压灭菌（见注 3 ) 。所有的组织培养基都要过滤灭菌，因此除了无菌的储备液，其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀
脂质体介导的真核细胞转染实验
实验材料 哺乳动物细胞试剂、试剂盒 质粒DNA完全培养基氯化铯DMEM仪器、耗材 培养皿培养箱聚苯乙烯管实验步骤 1. 按5×105细胞/孔的量在六孔板中接种指数期生长的细胞，在37℃ 5%CO2培养箱中 培养过夜，直至细胞80%汇片。（如果用100 mm 培养皿代替六孔扳，则培养细胞至80%汇片
农杆菌介导的大麦转化方法实验
实验材料植物凝胶pBract 质粒pSoup 质粒试剂、试剂盒利福平卡那霉素仪器、耗材MG L 培养基实验步骤1. 组织培养基的准备提前准备好所需浓度 2 倍的植物凝胶，高压灭菌（见注 3 ) 。所有的组织培养基都要过滤灭菌，因此除了无菌的储备液，其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀，调到合适的
农杆菌介导的大麦转化方法实验
实验材料：植物凝胶 pBract 质粒
脂质体介导的真核细胞转染实验
脂质体介导短暂表达 脂质体进行稳定转染 哺乳动物细胞的选择标记 实验材料 哺乳动物细胞
碱基类似物的的定义
化学结构与核酸的碱基成分类似的化合物。通常指人工合成的，如嘌呤类似物有8-吖鸟嘌呤，6-巯基嘌呤，二氨基嘌呤；嘧啶类似物有5-溴尿嘧啶，5-氟尿嘧啶等。多数作为碱基、核苷、核苷酸的代谢颉颃物质而起作用，对核酸的合成起阻碍作用，并阻碍细菌或动植物细胞的繁殖生长。被用于治疗恶性肿瘤或核酸合成等机制的研究
关于交联聚乙烯化学交联的分类介绍
（1）过氧化物交联及交联剂 过氧化物交联，一般采用有机过氧化物为交联剂，在热的作用下，分解而生成活性的游离基，这些游离基使聚合物碳链上生成活性点，并产生碳一碳交联，形成网状结构。该技术需要高压挤出设备，使交联反应在机筒内进行，然后使用快速加热方式对制品加热，从而产生交联制品。所以采用过氧化物交
采用PACE分析RNA肽相互作用实验
聚丙烯酰胺共电泳（poiyacrylamide coelectrophuresis，PACE ) 检测是相对较晚发展起来的定量分析蛋白质、肽与 DNA 或 RNA 相互作用的方法。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法原理聚丙烯酰胺共电泳（poiyacrylamide coelec
采用PACE分析RNA肽相互作用实验
实验方法原理 聚丙烯酰胺共电泳（poiyacrylamide coelectrophuresis，PACE ) 检测是相对较晚发展起来的定量分析蛋白质、肽与 DNA 或 RNA 相互作用的方法。
采用PACE分析RNA肽相互作用实验
实验方法原理 聚丙烯酰胺共电泳（poiyacrylamide coelectrophuresis，PACE ) 检测是相对较晚发展起来的定量分析蛋白质、肽与 DNA 或 RNA 相互作用的方法。实验材料 低放射性标记物RNA 底物试剂、试剂盒 TBE 凝胶储存缓冲液电泳缓冲液丙烯酰胺储存液过硫酸铵考
关于G蛋白介导的信号转导途径的介绍
G蛋白可与鸟嘌呤核苷酸可逆性结合。由γ亚基组成的异三聚体在膜受体与效应器之间起中介作用。小G蛋白只具有G蛋白亚基的功能，参与细胞内信号转导。信息分子与受体结合后，激活不同G蛋白，有以下几种途经： （1）腺苷酸环化酶途径 通过激活G蛋白不同亚型，增加或抑制腺苷酸环化酶（AC）活性，调节细胞内c