经培养外周血细胞的染色体制备实验
尽管从其他细胞也可以制备染色体,但人类外周血白细胞是最容易同步化的,从而可以对其染色体进行高分辨分析。实验材料用 Vacutainer (BectonDickinson) 或加有不含防腐剂的肝素纳.(25U ml) 的注射 器获取肝素化的全血试剂、试剂盒完全的 RPMI 10% FBS (胎牛血清)培养基100 X 植物血凝素氨甲蝶呤脱氧胸嘧啶核苷秋水仙素氯化钾固定剂仪器、耗材无菌锥形聚丙烯离心TB注射器实验步骤基本方案 外周血培养和分裂中期细胞收获1.应用含有肝素钠的 Vacutainer 或含有 25U/ml 血的无防腐剂肝素钠(不要应用其他抗凝剂)的注射器,经静脉穿刺采集外周血。尽快开始培养(推荐),或 4°C 保存不超过 4d。室温运输。2.用带有 21 G 针头的 TB 注射器,接种 0.25 ml 全血至无菌 15 ml 聚丙烯离心管,内含 5 ml 完全 RPMI,其中含有 10%FBS 及庆大霉素。<3 周......阅读全文
细菌细胞的制备实验实验
细胞抽提物的制备核糖体及多核糖体的分离70S核糖体的纯化多核糖体的纯化将核糖体解离为大亚基和小亚基实验材料细胞 试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液
培养细胞单细胞悬液的制备
实验材料胰蛋白酶细胞试剂、试剂盒EDTA·2NaPBS仪器、耗材离心管实验步骤一、培养细胞的特征一般细胞培养分为悬浮培养和贴壁培养,由于细胞的增殖有可能形成大小不等的细胞团块或连接成片。如果两个或多个细胞粘连在一块或细胞碎片过多都将影响 FCM 结果,进而导致实验失败。所以,制备合格的培养细胞单细胞
培养细胞单细胞悬液的制备
实验材料 胰蛋白酶细胞试剂、试剂盒 EDTA·2NaPBS仪器、耗材 离心管实验步骤 一、培养细胞的特征一般细胞培养分为悬浮培养和贴壁培养,由于细胞的增殖有可能形成大小不等的细胞团块或连接成片。如果两个或多个细胞粘连在一块或细胞碎片过多都将影响 FCM 结果,进而导致实验失败。所以,制备合格的培养细
培养细胞单细胞悬液的制备
实验材料 胰蛋白酶 细胞 试剂、试剂盒 EDTA·2Na PBS
培养细胞单细胞悬液的制备
实验材料 胰蛋白酶 细胞 试剂、试剂盒 EDTA·2Na PBS
唐氏综合征对外周血细胞染色体核型分析
细胞遗传学研究发现,在21号染色体长臂21q22区带为三体时,该个体具有完全类似唐氏综合征的临床表现,相反,该区带为非三体的个体则无此典型症状。由此推论,21q22区可能是唐氏综合征的基因关键区带,又称为唐氏综合征区。按染色体核型分析可将唐氏综合征患儿分为三型: (1)标准型占全部病例的95%
正常细胞常规核型的标本制备实验_微量全血培养
正常细胞常规核型的标本制备可应用于:(1)进行核型分析;(2)与肿瘤核型进行对比研究。实验方法原理采用微量全血培养人体外周血中淋巴细胞,在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的
正常细胞常规核型标本制备_人淋巴细胞染色体标本制备
实验方法原理在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋白质,使染色体清晰且分散良好。再结合离心技术去掉红细胞碎片,然后采用空气干燥法制片获得中期染色体标本。实验材料HeLa细胞
从组织培养细胞中制备粗微体实验
实验材料细胞 试剂、试剂盒环己酰亚胺 匀浆缓冲液
从组织培养细胞中制备粗微体实验
实验材料 细胞 试剂、试剂盒 环己酰亚胺 匀浆缓冲液
从组织培养细胞中制备粗微体实验
实验材料细胞试剂、试剂盒环己酰亚胺匀浆缓冲液仪器、耗材培养皿实验步骤1. 培养基中加入环己酰亚胺(溶于蒸馏水,贮存液浓度 0.1 mol/L,-20℃ 保存。如果不溶,试着加热到 40℃ 以帮助溶解)(终浓度 10 μmol/L),37℃ 保温 5~10 分钟。2. 培养皿从 37℃ 转移到冷室,立
CHO细胞染色体制备[Harvard-Medical-School]
Mitshison Lab, Department of Systems Biology, Harvard Medical Schoolhttp://mitchison.med.harvard.edu/protocols/chr1.htmlBuffers:Swelling Buffer (PME):
人癌细胞染色体制备及观察
一、实验目的学习人类染色体制备的常规方法,了解人癌细胞染色体及其变异。二、实验原理目前大多数癌症都建立了相应的细胞株或细胞系,体外培养的癌细胞多属于连续的周期细胞,可以用来制备染色体。国内外制备动物和人类染色体的常规方法是空气干燥法,该方法的关键包括:1.秋水仙素的预处理:秋水仙素又叫秋水仙碱,它是
羊水细胞染色体制备方法(原位法)
细胞培养1. 将羊水(约20ml)转移到无菌的离心管中,1000rpm离心10分钟;2. 去除上清液,用于其它分析,保留细胞悬液约0.5~1ml,用培养基混匀到2~2.5ml左右;3. 将细胞悬液平分到3只Chromslide培养皿中;4. 培养24/48小时后,向每只Chromslide培养皿中加
酿酒酵母培养基的制备实验——YPAD培养基的制备
试剂、试剂盒酵母提取物蛋白胨葡萄糖偏硫酸腺嘌呤琼脂水仪器、耗材锥形瓶实验步骤1. 在 1 L 的带螺旋盖的瓶中或锥形瓶中将下面的成分溶于 500 ml 水中,置于振荡器上。酵母提取物 6.0 g,蛋白胨 12.0 g,葡萄糖 12.0 g,偏硫酸腺嘌呤 60.0 mg,琼脂 10.0 g,加水到 6
骨髓培养基简化了染色体制备流程
骨髓培养基根据间充质干细胞的生长需要,包含必需和非必需氨基酸、维生素、无机化合物、生长因子、胎牛血清以及其他补给成分。本品非常适用于培养骨髓间充质干细胞,能使人骨髓间充质干细胞在理想营养平衡状态下进行多代扩增而不发生分化,能大大缩短细胞培养时间。产品严格无菌,无病毒和支原体,性能稳定。 骨髓培
细胞培养染色体显示法
1) 传代培养细胞染色体显示法 1.培养细胞:取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80%~90%汇合单层培养细胞。 2.加秋水仙素:使用终浓度为0.02~0.8微克/毫升营养液,温箱继续培养6~10小时;或用低温封闭法:把培养细胞置于4℃条件下6~12小时后,再于37℃温箱继续培养6
外周血T细胞的检测
用荧光标记三参数检测外周血T细胞亚群 用荧光标记双参数检测外周血T细胞亚群 用荧光标记单参数检测外周血T细胞亚群 外周血T细胞亚群的检测分析
外周血B细胞的检测
外周血CD19+、CD20+细胞检测 活性B细胞检测 实验步骤
外周血B细胞的检测
外周血CD19+、CD20+细胞检测 活性B细胞检测 实验步骤
外周血T细胞的检测
用荧光标记三参数检测外周血T细胞亚群 用荧光标记双参数检测外周血T细胞亚群 用荧光标记单参数检测外周血T细胞亚群 外周血T细胞亚群的检测分析
肉汤培养基制备实验
仪器、耗材鲜牛肉末蛋白胨氯化钠蒸馏水实验步骤去脂、去筋鲜牛肉末50g,加水100ml,搅匀,放冰箱过夜,取出煮沸30分钟,用纱布过滤,补足水量为100ml,即为牛肉浸液。加入蛋白胨1g,氯化钠0.5g,加热溶解。调整PH值为7.6,煮沸10分钟,过滤,分装,高压灭菌备用。
Down综合征的对外周血细胞染色体核型分析检查介绍
细胞遗传学研究发现,在21号染色体长臂21q22区带为三体时,该个体具有完全类似唐氏综合征的临床表现,相反,该区带为非三体的个体则无此典型症状。由此推论,21q22区可能是唐氏综合征的基因关键区带,又称为唐氏综合征区。按染色体核型分析可将唐氏综合征患儿分为三型: (1)标准型占全部病例的95%
染色体制备
实验方法原理 固定阻滞于分裂中期的细胞,在低渗液中膨胀,将细胞滴在载玻片上,染色,观察 [ Rothfels and Siminovitch,1958;Rooney and Czepulkowski,1986 ] 。实验材料 D-PBS0.25%胰蛋白酶对数期的培养细胞秋水仙酰胺试剂、试剂盒 低渗溶
染色体制备
实验方法原理 固定阻滞于分裂中期的细胞,在低渗液中膨胀,将细胞滴在载玻片上,染色,观察 [ Rothfels and Siminovitch,1958;Rooney and Czepulkowski,1986 ] 。
染色体制备
实验方法原理固定阻滞于分裂中期的细胞,在低渗液中膨胀,将细胞滴在载玻片上,染色,观察 [ Rothfels and Siminovitch,1958;Rooney and Czepulkowski,1986 ] 。实验材料D-PBS0.25%胰蛋白酶对数期的培养细胞秋水仙酰胺试剂、试剂盒低渗溶液醋酸
染色体制备
实验方法原理固定阻滞于分裂中期的细胞,在低渗液中膨胀,将细胞滴在载玻片上,染色,观察 [ Rothfels and Siminovitch,1958;Rooney and Czepulkowski,1986 ] 。实验材料D-PBS
大鼠神经元细胞分离培养实验_解离神经元培养物的制备
实验材料母鼠试剂、试剂盒BSS仪器、耗材无菌器械显微镜实验步骤1. 杀死怀孕 18 天母鼠(常用过量 CO2 使其窒息),用无菌器械取出胚胎,放在无菌的培养皿中。2. 取下胚胎的头,放在盛有 4 ml 不含 Ca2+ 和 Mg2+ 的平衡盐溶液(BSS)的培养皿中。3. 从头颅骨上取下脑,放在 35
外周血免疫细胞检测
实验材料 静脉全血 试剂、试剂盒 肝素 鼠抗人目的单克隆抗体 溶红细胞液 生理盐
外周血免疫细胞检测
实验材料 静脉全血 试剂、试剂盒 肝素 鼠抗人目的单克隆抗体 溶红细胞液 生理盐