经培养外周血细胞的染色体制备实验
尽管从其他细胞也可以制备染色体，但人类外周血白细胞是最容易同步化的，从而可以对其染色体进行高分辨分析。实验材料用 Vacutainer (BectonDickinson) 或加有不含防腐剂的肝素纳.（25U ml) 的注射 器获取肝素化的全血试剂、试剂盒完全的 RPMI 10% FBS (胎牛血清）培养基100 X 植物血凝素氨甲蝶呤脱氧胸嘧啶核苷秋水仙素氯化钾固定剂仪器、耗材无菌锥形聚丙烯离心TB注射器实验步骤基本方案 外周血培养和分裂中期细胞收获1.应用含有肝素钠的 Vacutainer 或含有 25U/ml 血的无防腐剂肝素钠（不要应用其他抗凝剂）的注射器，经静脉穿刺采集外周血。尽快开始培养（推荐），或 4°C 保存不超过 4d。室温运输。2.用带有 21 G 针头的 TB 注射器，接种 0.25 ml 全血至无菌 15 ml 聚丙烯离心管，内含 5 ml 完全 RPMI，其中含有 10%FBS 及庆大霉素。<3 周......阅读全文
羊水细胞染色体标本的制备
一、原理人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养，但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞，依据其外形和生长特征可区分为以下三类：上皮细胞（E）、成纤维细胞（F）和羊水细胞（AF）。E细胞在胰酶消化的连续培养中不再生长，所以在培养过程中的生长期最短。AF细胞在再培
羊水细胞染色体标本的制备
一、原理 人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养，但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞，依据其外形和生长特征可区分为以下三类：上皮细胞（E）、成纤维细胞（F）和羊水细胞（AF）。E细胞在胰酶消化的连续培养中不再生长，所以在培养过程中的生长期最短。AF细
染色体CBG标本制备实验
实验方法原理 异染色质在整个分裂间期及分裂期都是浓缩的，因而其大小较为恒定。它们通常位于着丝粒附近，或在染色体臂上呈现“团块”，这些染色质主要由C显带技术呈现，故称为C带。CBG即C带、Ba（OH）2、Giemsa的简写。C带的根本特征是选择性地从染色体臂抽取DNA，但在C带区有很强抗性，仍保留大部
染色体CBG标本制备实验
基本方案 实验方法原理 异染色质在整个分裂间期及分裂期都是浓缩的，因而其大小较为恒定。它们通常位于着丝粒附近，或在染色体臂上呈现“团块”，这些染色质主要由C
染色体GTG标本制备实验
基本方案 实验方法原理 非显带染色体除可根据形态分辨部分染色体，其他多数染色体难以确认，而显带技术则可使染色体纵向长度上出现不同带纹，以辨认全部染色体。GT
染色体GTG标本制备实验
非显带染色体除可根据形态分辨部分染色体，其他多数染色体难以确认，而显带技术则可使染色体纵向长度上出现不同带纹，以辨认全部染色体。GTG即G 带，Trypsin（胰酶），Giemsa的简写。Giemsa染料是噻嗪——曙红染料，染色体的着色有赖于在原位形成噻嗪--曙红（2∶1）的沉淀物。实验方法原理非显
染色体GTG标本制备实验
实验方法原理 非显带染色体除可根据形态分辨部分染色体，其他多数染色体难以确认，而显带技术则可使染色体纵向长度上出现不同带纹，以辨认全部染色体。GTG即G带，Trypsin（胰酶），Giemsa的简写。Giemsa染料是噻嗪——曙红染料，染色体的着色有赖于在原位形成噻嗪--曙红（2∶1）的沉淀物。着色
骨骼细胞染色体制备方法
1. 在含有细胞培养基的细胞培养管中无菌添加骨髓样本1ml(参考细胞密度
人癌细胞染色体制备
实验概要本实验介绍了人癌细胞染色体制备的基本原理及操作步骤。有助于学习人类染色体制备的常规方法，了解人癌细胞染色体及其变异。实验原理目前大多数癌症都建立了相应的细胞株或细胞系，体外培养的癌细胞多属于连续的周期细胞，可以用来制备染色体。国内外制备动物和人类染色体的常规方法是空气干燥法，该方法的关键包括
人外周血淋巴细胞培养实验材料和操作过程
在正常情况下，人外周血中是没有分裂相的，只有在异常情况下才能发现。植物血球凝集素（PHA）是人类淋巴细胞有丝分裂的刺激剂，在PHA作用下，原处于Go期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞，进而进行有丝分裂。利用PHA这一特性，淋巴细胞经过含有HPA培养液培养，在体外便可获得丰富的含有丝分裂的生长活跃的细胞群体
鸡胚胎成肌细胞的分离和培养实验——细胞培养物的制备
试剂、试剂盒HBSS胰酶溶液胶原溶液仪器、耗材解剖显微镜不锈钢深盘Dumom 5 号钳子柳叶刀精细弹簧剪纸巾大烧杯试管架移液管血细胞计数板实验步骤器材准备1. 在培养室实验台上放置下列物品：解剖显微镜表面和透射照明用的显微镜灯泡装有 70% 酒精的带盖不锈钢深盘Dumom 5 号钳子，至少两把柳叶刀
正常细胞常规核型的标本制备_肿瘤细胞染色体标本制备
实验方法原理利用肿瘤细胞无限繁殖的特点，掌握其体外生长动态，取处于对数生长期的细胞便可获得丰富的分裂相。肿瘤细胞染色体异常包括两个方面：1. 结构异常 即在肿瘤细胞常出现的染色体畸变，包括双着丝点染色体、环状染色体、断裂的染色体、染色体裂隙及微小体等。2. 数目异常 由于肿瘤细胞分裂失去应有
外周血单个核细胞分离实验的操作步骤
1、取外周静脉血，用肝素抗凝，加等量的Hank’s液并混匀。 2、将分层液加入试管中，用量约为血量的1/2。用吸管沿管壁缓缓将血加入分层液面上。 3、置于水平离心机离心，1500r/min，10min。可见绝大多数单个核细胞悬浮于血浆和分层液的界面，呈白膜状。 4、用尖吸管吸取界面的细胞层
骨髓细胞染色体标本的制备
一、原理骨髓染色体标本制备通常用于白血病患者，特别是慢性或急性粒细胞性白血病，因为骨髓反映粒系统细胞增生情况，这些病人不宜用外周血。即使是淋巴细胞性白血病，也不主张用外周血，因为加PHA刺激外周血培养，只能获得正常淋巴细胞分裂相，并不能反映那些病理淋巴细胞的染色体改变。骨髓细胞属不断增殖的细胞，培养
染色体制备
一、 人外周血染色体制备 1. 实验原理 人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下，人外周血小淋巴细胞都处在G1期（或G0期），但在体外给予一定的条件，进行培养，经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种取材简易、用血量少的培养方法已被广泛采用。
染色体核型分析为什么用外周血淋巴细胞
血液中，只有白细胞（其中包括淋巴细胞）才有细胞核，红细胞没有细胞核，只能用白细胞而不是红细胞。
染色体提前凝集标本制备实验
基本实验实验方法原理七十年代初，由于发现M期细胞内有某种促进染色体凝集因子，它无种属特异性，所以在细胞融合和染色体技术的基础上，建立了制备染色体提前凝集标本的方法。即让M期细胞与间期（I期）细胞融合，从而诱导I期细胞染色质提前浓缩成染色体。形成的这种染色体称提前凝集的染色体(PrematurelyC
染色体提前凝集标本制备实验
实验方法原理七十年代初，由于发现M期细胞内有某种促进染色体凝集因子，它无种属特异性，所以在细胞融合和染色体技术的基础上，建立了制备染色体提前凝集标本的方法。即让M期细胞与间期（I期）细胞融合，从而诱导I期细胞染色质提前浓缩成染色体。形成的这种染色体称提前凝集的染色体(PrematurelyConde
外周血单个核细胞（PBMC）制备方法及注意事项
外周血单个核细胞（PBMC）制备方法及注意事项外周血单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cell，PBMC），是指外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞（Lymphocyte）、单核细胞（Monocyte）、树突状细胞（DC）和其他少量细胞。PBMC可利用健康人或动
淋巴细胞染色体制备方法
1. 向含有细胞培养基的细胞培养管中无菌添加全血0.5ml，盖紧培养瓶，充分混均；2. 水平培养72 h(37℃)；3. 加入20ul 秋水溶液，培养2 h；4. 离心5 min（2000 rpm）；5. 去除上清液，保留0.5ml的细胞；6. 重新充分混悬细胞1；7. 加入5ml 低渗溶液(KCl
胸腹水细胞染色体制备方法
在恶性肿瘤的胸腹水中有大量的分裂期细胞，其中多以非整倍体细胞存在，并含有各种标记染色体。 1、 实验材料 2.5%碘精、75%酒精、无菌棉球、镊子20-22号无菌腰穿包、50ml离心管、秋水仙素、KCL、甲醇、冰乙酸、载玻片等。 2、 操作过程（1）采样：选择有胸或腹水患者，在无菌条件下，轻腹
细胞培养染色体显示
实验概要掌握细胞培养染色体显示实验方法。实验步骤1. 传代培养细胞染色体显示法 1) 培养细胞：取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80％～90％汇合单层培养细胞。 2) 加秋水仙素：使用最终浓度为0.02～0.8微克/毫升营养液，温箱继续培养6～10小时；或用低温封闭法：把培养细胞置于4℃
培养细胞染色体显色法
培养细胞染色体显示法1） 传代培养细胞染色体显示法1．培养细胞：取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80％～90％汇合单层培养细胞。2．加秋水仙素：使用最终浓度为0.02～0.8微克/毫升营养液，温箱继续培养6～10小时；或用低温封闭法：把培养细胞置于4℃条件下6～12小时后，再于37℃温箱继续培
细胞培养染色体显示
1） 传代培养细胞染色体显示法1．培养细胞：取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80％～90％汇合单层培养细胞。2．加秋水仙素：使用最终浓度为0.02～0.8微克/毫升营养液，温箱继续培养6～10小时；或用低温封闭法：把培养细胞置于4℃条件下6～12小时后，再于37℃温箱继续培养6～10小时处理（
细菌细胞的制备实验实验——细胞抽提物的制备
实验材料细胞试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材弗氏破碎器实验步骤1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为 2 μ
外周血培养基配制
一、配制用水培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。二、培养基培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HC
外周血T细胞的检测——外周血T细胞亚群的检测分析
实验步骤展开
培养细胞单细胞悬液的制备
实验材料 胰蛋白酶 细胞 试剂、试剂盒 EDTA·2Na PBS
培养细胞单细胞悬液的制备
实验材料 胰蛋白酶细胞试剂、试剂盒 EDTA·2NaPBS仪器、耗材 离心管实验步骤 一、培养细胞的特征一般细胞培养分为悬浮培养和贴壁培养，由于细胞的增殖有可能形成大小不等的细胞团块或连接成片。如果两个或多个细胞粘连在一块或细胞碎片过多都将影响 FCM 结果，进而导致实验失败。所以，制备合格的培养细
培养细胞单细胞悬液的制备
实验材料胰蛋白酶细胞试剂、试剂盒EDTA·2NaPBS仪器、耗材离心管实验步骤一、培养细胞的特征一般细胞培养分为悬浮培养和贴壁培养，由于细胞的增殖有可能形成大小不等的细胞团块或连接成片。如果两个或多个细胞粘连在一块或细胞碎片过多都将影响 FCM 结果，进而导致实验失败。所以，制备合格的培养细胞单细胞