金属硫蛋白的测定实验——镉血红素法
金属硫蛋白(metallothionein)是由由微生物和植物产生的金属结合蛋白,富含半胱氨酸的短肽,对多种重金属有高度亲和性。它是分子质量较低,半胱氨酸残基和金属含量极高的蛋白质。与其结合的金属主要是镉、铜和锌,广泛地存在于从微生物到人类各种生物中,其结构高度保守。实验方法原理MT是一种低分子量的蛋白质,含有大量的半胱氨酸,并对金属有较高的亲和性。实验材料牛血红蛋白试剂、试剂盒氯化镉Tris-HCl蔗糖仪器、耗材分光光度计离心机实验步骤一、实验步骤1. 组织按1:4(w/v)加入0.25 mol/l 蔗糖溶液,制备匀浆,18 000 g离心20 min(4℃)。2. 取上清液0.5 ml,加入1.9 ml 0.03 mol/l Tris-HCl缓冲液(pH8.0)。3. 再加入1 ml CdCl2(10ppm)混匀,室温孵育5 min。4. 加入2%牛血红蛋白0.2 ml,沸水浴......阅读全文
金属硫蛋白的测定实验——镉血红素法
金属硫蛋白(metallothionein)是由由微生物和植物产生的金属结合蛋白,富含半胱氨酸的短肽,对多种重金属有高度亲和性。它是分子质量较低,半胱氨酸残基和金属含量极高的蛋白质。与其结合的金属主要是镉、铜和锌,广泛地存在于从微生物到人类各种生物中,其结构高度保守。实验方法原理MT是一种低分子量的
镉血红素法测定组织水平金属硫蛋白
金属硫蛋日(metallothionein,MT)是富含金属及硫的可诱导性蛋白,它可被某些金属( Bi,Zn,Cu等)、激素(糖皮质激素)、细胞毒药物(顺铂及烷化剂)及其他与物理化学刺激相关的病理生理状况所诱导。MT广泛存在于哺乳娄动物除结缔组织外的几乎所有组织中,肝、肾、胰、肠中最为丰富,从已有的
镉血红素法测定组织水平金属硫蛋白
金属硫蛋日(metallothionein,MT)是富含金属及硫的可诱导性蛋白,它可被某些金属( Bi,Zn,Cu等)、激素(糖皮质激素)、细胞毒药物(顺铂及烷化剂)及其他与物理化学刺激相关的病理生理状况所诱导。MT广泛存在于哺乳娄动物除结缔组织外的几乎所有组织中,肝、肾、胰、肠中最为丰富,
镉血红素法测定组织水平金属硫蛋白
镉--血红素法 实验材料 组织 试剂、试剂盒 氯化镉 牛血红蛋白
金属硫蛋白的测定实验
实验方法原理 MT是一种低分子量的蛋白质,含有大量的半胱氨酸,并对金属有较高的亲和性。实验材料 牛血红蛋白试剂、试剂盒 氯化镉Tris-HCl蔗糖仪器、耗材 分光光度计离心机实验步骤 一、实验步骤1. 组织按1:4(w/v)加入0.25 mol/l 蔗糖溶液,制备匀浆,18 000 g离心20 m
金属硫蛋白的测定实验
镉-血红素法 实验方法原理 MT是一种低分子量的蛋白质,含有大量的半胱氨酸,并对金属有较高的亲和性。 实
血红素的提取测定方法
提取原理血红蛋白在pH低于3.0时,血红素与珠蛋白的结合最为疏松,此时加入有机溶剂丙酮,使珠蛋白变性凝固,血红素则溶于丙酮中,在丙酮中加入适量的鞣酸或乙酸钠,可得到较纯的血红素结晶,然后用乙醇一乙醚洗涤,可得到精制血红素。血红素在波长385处有最大吸收,可直接进行比色测定。 试剂器材1、试剂0.5%
光谱法检测金属硫蛋白的介绍
采用液相色谱(LC)和紫外(UV)相结合检测确定家兔肝脏中分离脱金属硫蛋白的最佳条件,同时,利用LC-ES-MS可以确定家兔肝脏中不同结构的脱金属硫蛋白,主要对MT-Ⅰ和MT-Ⅱ的结构及其同分异构体进行了研究。 由于目前金属硫蛋白的测定主要采用紫外-可见分光光度法以及原子吸收光谱法测定其中的金
光谱法检测金属硫蛋白的介绍
采用液相色谱(LC)和紫外(UV)相结合检测确定家兔肝脏中分离脱金属硫蛋白的最佳条件,同时,利用LC-ES-MS可以确定家兔肝脏中不同结构的脱金属硫蛋白,主要对MT-Ⅰ和MT-Ⅱ的结构及其同分异构体进行了研究。 由于目前金属硫蛋白的测定主要采用紫外-可见分光光度法以及原子吸收光谱法测定其中的金
比色法测定食品中的镉(法3)
9 原理样品经消化后, 在碱性溶液中镉离子与6-溴苯并噻唑偶氮萘酚形成红色络合物, 溶于三氯甲烷, 与标准系列比较定量。10 试剂10.1 40%酒石酸钾钠溶液。10.2 20%氢氧化钠溶液。10.3 25%柠檬酸钠溶液。10.4 混合酸:硝酸与高氯酸按3:1混合。10.5 三氯甲烷。10.6 镉标
血红素的提取测定操作步骤
1、血红素制备与纯化 (1)新鲜猪血抗凝新鲜猪血,加入0.5%~1%柠檬酸三钠溶液(V/V=10 : 1),搅拌均匀,得新鲜抗凝猪血。 (2)分离红细胞取抗凝猪血10mL于离心管中,以3000r/min离心15min,倾出上清液(血浆),收集红细胞,用0.9% NaCl洗涤2次。洗涤方法为:
火焰法测镉
一、实验目的 1. 掌握火焰原子吸收光谱仪的操作技术; 2. 优化火焰原子吸收光谱法测定水中镉的分析火焰条件; 3. 熟悉原子吸收光谱法的应用。 二、方法原理 原子吸收光谱法是一种广泛应用的测定元素的方法。它是一种基于待测元素基态原子在蒸气状态对其原子共振辐射吸收进行定量分析
蛋白质分析法/免疫法检测金属硫蛋白的介绍
此类方法主要是通过蛋白质含量测定来计算金属硫蛋白浓度,免疫法是最主要的方法。它尤其适合于微量检测,具有灵敏、特异的特点,灵敏度在pg/ml级,对存在体液中含量甚微的MT具有较好的检测效果。在近些年,先后建立了Western Blotting法、放射性免疫检测法(RIA)和酶联免疫吸附法(ELIS
大鼠金属硫蛋白(MT)ELISA检测法
大鼠金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 MT(Metallothionein) 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 MT与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠MT,形成免疫复合物连接在板上,辣根
X荧光光谱法快速测定糙米中的镉
采用重金属镉富集装置对被测糙米进行先碳化后灰化的处理,使得被测糙米中的镉元素富集;将得到的被测糙米灰分放入样品杯中压制成被测样品,由X射线荧光分析装置进行测量,得到镉元素的信号强度,然后根据信号强度与浓度的比例关系自动计算样品中镉的含量。整个分析过程在15 mim以内,数据结果与AAS结果一致。
石墨炉原子吸收法(测定镉、铜和铅)的测定精准度
精密度和准确度全国范围七个实验室用直接法分析实际水样的精密度和准确度数据,如表3 所示。表3 精密度和准确度元素浓度范围(μg/L)相对标准偏差范围(n-7,%)回收率范围(%)地下水地表水地下水地表水地下水地表水镉0.1~1.30.1~11.4~171.9~1575~10575~108铜1.5
镉柱还原法
方法提要水样通过镉还原柱,将硝酸盐定量地还原为亚硝酸盐,然后按重氮-偶氮光度法测定亚硝酸盐氮的总量,扣除原有亚硝酸盐氮,得硝酸盐氮的含量。水样可用有机玻璃或塑料采水器采集,用0.45μm滤膜过滤,贮存于聚乙烯瓶中。分析工作不能延迟3h以上,如果样品采集后不能立即分析,应快速冷冻至-20℃。样品熔化后
火焰法原子吸收测定电子电气中铅镉铬的测
方法提要 对电子电气中的金属组件,直接采用常规低温酸消解方法处理,使其成为可溶性盐类。对其余的电子电气组件,采用密闭高温压力消解法处理:将拆分破碎的样品置进聚四氟乙烯罐中,加进硝酸和双氧水,用不锈钢外套拧紧,在高温顺密闭容器内将样品溶解。消解液导进火焰原子吸收光谱仪中原子化,利用Pb、Cd和Cr原
火焰原子吸收法电子电气产品中铅、镉、铬的测定
方法:火焰原子吸收光谱法 1 范围 本方法适用于电子电气产品各种材质中铅、镉和铬含量的测定。 2 方法提要 对电子电气产品中的金属材质,直接采用常规酸消解方法处理;对其他材质,采用密闭高温压力罐酸消解法处理。材质中的铅、镉、铬成为可溶性盐类溶解在酸消解液中。消解液导入火焰原子吸收分光光度计中
火焰原子吸收法电子电气产品中铅、镉、铬的测定
范围 本方法适用于电子电气产品各种材质中铅、镉和铬含量的测定。 2 方法提要 对电子电气产品中的金属材质,直接采用常规酸消解方法处理;对其他材质,采用密闭高温压力罐酸消解法处理。材质中的铅、镉、铬成为可溶性盐类溶解在酸消解液中。消解液导入火焰原子吸收分光光度计中进行测定。 3 试剂
火焰法原子吸收测定电子电气中铅镉铬的测
范围 本标准规定了电子电气产品中铅、镉和铬的密闭压力罐消解-火焰原子吸收光谱测定方法。 本标准适用于WEEE和RoHS两项指令所涉及的10大类民用及产业用电子电气产品中限用有害物质铅、镉和铬的测定。它覆盖了电子电气产品所有材质如聚合物、金属及电子制品。 本方法适用于同时测定电子电器产品中总
火焰原子吸收法电子电气产品中铅、镉、铬的测定
方法:火焰原子吸收光谱法 1 范围 本方法适用于电子电气产品各种材质中铅、镉和铬含量的测定。 2 方法提要 对电子电气产品中的金属材质,直接采用常规酸消解方法处理;对其他材质,采用密闭高温压力罐酸消解法处理。材质中的铅、镉、铬成为可溶性盐类溶解在酸消解液中。消解液导入火焰原子吸收分光光度计中
直接吸入火焰原子吸收法(测定镉、铜、铅、锌)的计算
计算式中:m——从校准曲线上查出或仪器直接读出的被测金属量(μg);V——分析用的水样体积(ml)。精密度和准确度精密度和准确度,如表5 所示。表5 精密度和准确度元素参加实验室数目质控样品金属浓度 (ug/L)平均测定值 (μg/L)实验室内相对标准偏差(%)实验室间相对标准偏差(%)铜710
石墨炉原子吸收法(测定镉、铜和铅)的干扰因素
干扰及消除石墨炉原子吸收分光光度法的基体效应比较显著和复杂。在原子化过程中,样品基体蒸发,在短波长范围出现分子吸收或光散射,产生背景吸收。可以用连续光源背景校正法,或塞曼偏振光校正法、自吸收法进行校正,也可采用邻近的非特征吸收线校正法,或通过样品稀释降低样品中的基体浓度。另一类基体效应是样品中基体参
石墨炉原子吸收法(测定镉、铜和铅)的操作步骤
操作步骤(1)试样的预处理取100 ml水样放入200 ml绕杯,加入硝酸5 ml,在电热板上加热消解(不要沸腾)蒸至10 ml左右,加入5 ml硝酸和10 ml过氧化氢,继续消解,直至1 ml左右。如果消解不完全,再加入硝酸5 ml和过氧化氢10 ml,再次蒸至1 ml左右。取下冷却,加水溶解残渣
石墨炉原子吸收法(测定镉、铜和铅)的方法原理
将样品注入石墨管,用电加热方式使石墨炉升温,样品蒸发离解形成原子蒸气,对来自光源的特征电磁辐射产生吸收。将测得的样品吸光度和标准吸光度进行比较,确定样品中被测金属的含量。
蛋白质分析法/免疫法检测金属硫蛋白的介绍
此类方法主要是通过蛋白质含量测定来计算MT浓度,免疫法是最主要的方法。它尤其适合于微量检测,具有灵敏、特异的特点,灵敏度在pg/ml级,对存在体液中含量甚微的MT具有较好的检测效果。在近些年,先后建立了Western Blotting法、放射性免疫检测法(RIA)和酶联免疫吸附法(ELISA)。
荧光法检测氯化血红素的方法介绍
荧光法是利用血红素中卟啉的荧光特性,利用荧光光度计可检测出样本的荧光强度,从而计算其相应的血红素含量,如粪便中血红素的定量测定,血红蛋白在肠道中消解为血红素,血红素在肠道内细菌的作用下,大部分被消解为卟啉,利用卟啉的荧光特性,可计算其相应的血红素含量。血红素与草酸试剂共热能脱去亚铁离子,并被还原
土壤中的镉的测定:原子吸收分光光度法
土壤样品用HNO3-HF-HClO4或HCl-HNO3-HF-HClO4混酸体系消化后,将消化液直接喷入空气-乙炔火焰。在火焰中形成的Cd基态原子蒸气对光源发射的特征电磁辐射产生吸收。可测定试液吸收光度扣除全程序空白吸光度,从标准曲线查的Cd含量。 测定所需仪器:原子吸收分光光度计,空气-乙炔火焰
金属亲和分析法检测金属硫蛋白的介绍
这类方法主要是基于MT对金属的高亲合力且不同金属的亲和力具有差异性及其热稳定性而建立的。主要通过测定MT结合金属—竞争性替换金属含量来检测MT中金属含量的增高,从而计算出MT的含量。张保林等运用银饱和分析法结合原子吸收光谱(AAS)检测了兔肝Zn-MT,具体方法为:向含MT的溶液中加入过量的Ag