乙醇脱氢酶的测定实验——还原反应测定

根据酶的来源,有许多种的乙醇脱氢酶(ADH),通常使用的酶是由酵母或马的肝脏中提取出来的。它们的结构和专一性都截然不同。酵母的 ADH 展现出醇的高活性,它是一个相同四聚体的酶,相对分子质量约为 148 000。哺乳动物的乙醇脱氢酶是一个 Mr=79000 的二聚体,并且比较偏好较高浓度的乙醇。该酶在低浓度的溶液中不稳定,因此必须加入 BSA 来保持其稳定性。实验方法原理ADH 反应:乙醛 + NADPH + H+ ⇌ 乙醇 + NAD+此反应是可逆的,并且可以从两个位点检测出来,平衡常数是 8×1012 mol/L。乙醇的生成是人们希望看到的,由此可以更为简单地检测这个方向的反应进程。但是也有极为不利的因素,即乙醛的毒性以及此反应速度过快。实验材料乙醇脱氢酶试剂、试剂盒磷酸钾BSA 溶液NADH乙醛仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 的实验混合物0.02 ml ADH(......阅读全文

乙醇脱氢酶的测定实验——还原反应测定

根据酶的来源,有许多种的乙醇脱氢酶(ADH),通常使用的酶是由酵母或马的肝脏中提取出来的。它们的结构和专一性都截然不同。酵母的 ADH 展现出醇的高活性,它是一个相同四聚体的酶,相对分子质量约为 148 000。哺乳动物的乙醇脱氢酶是一个 Mr=79000 的二聚体,并且比较偏好较高浓度的乙醇。该酶

乙醇脱氢酶的测定实验——氧化反应测定

实验方法原理乙醇 + NAD+ ⇌ 乙醛 + NADPH + H+由于平衡易向正方向移动,逆反应的抑制必须加入碱性的 pH 试剂以及另一种试剂来捕捉乙醛,以便将产物从平衡中移走。实验材料乙醇脱氢酶稀释溶液试剂、试剂盒甘氨酸-二磷酸钠溶液磷酸钾乙醇NADBSA 溶液氨基脲仪器、耗材分光光度计实验步骤实

乙醇脱氢酶的测定实验

还原反应测定 氧化反应测定             实验方法原理 ADH 反应:乙醛 + NADPH + H+ ⇌ 乙醇 + NAD+此反应是可逆的,并且可以从两个位点检测

二氢硫辛酰胺脱氢酶的测定实验_还原反应

实验材料酶样品试剂、试剂盒磷酸钾NAD+NADHDTEEDTADL-硫辛酰胺仪器、耗材分光光度计实验步骤0.93 ml 实验混合物0.05 ml 0.2 mol/L DL-二氢硫辛酰胺 10 mol/L0.02 ml 酶样品30 ℃ 时,于 340 nm 处吸收值发生变化,ε340=6.3×103 

乙醇脱氢酶的测定

实验方法原理 ADH 反应:乙醛 + NADPH + H+ ⇌ 乙醇 + NAD+此反应是可逆的,并且可以从两个位点检测出来,平衡常数是 8×1012 mol/L。乙醇的生成是人们希望看到的,由此可以更为简单地检测这个方向的反应进程。但是也有极为不利的因素,即乙醛的毒性以及此反应速度过快。实验材料

L乳酸脱氢酶测定实验_荧光光度计法测定还原反应

实验材料LDH 稀释溶液试剂、试剂盒磷酸钾NADH丙酮酸仪器、耗材荧光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」1.98 ml 实验混合物0.02 ml LDH 稀释溶液25℃ 时,在 260 nm 激发,470 nm 处测定每分钟荧光差异。用适当浓度范围的 NADH 浓度对荧光强度的标准曲线来确

3磷酸甘油醛脱氢酶的测定实验——还原反应

实验方法原理实验材料3-磷酸甘油酸激酶试剂、试剂盒三乙醇胺-NaOH3-磷酸甘油酸ATPNADHEDTA硫酸镁 仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶溶液25℃ 时,于 340 nm 处吸收值降低。NADPH 的吸收系数 ε340=6.

L乳酸脱氢酶测定实验_分光光度计法测定还原反应

实验方法原理乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)广泛存在于生物细胞内,是糖代谢酵解途径的关键酶之一。LDH可溶于水或稀盐溶液。组织中LDH含量测定方法很多,其中紫外分光光度法更为简单、快速。鉴于NADH,NAD+在340nm及260nm处有各自的最大吸收峰,因此以NAD+

L乳酸脱氢酶测定实验_氧化反应测定

实验材料LDH 稀释溶液试剂、试剂盒磷酸钾NADH乳酸仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml LDH 稀释溶液25℃ 时,于 340 nm 处吸收值降低。NADPH 的吸收系数 ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。展开 注意事项

由-NAD+还原反应测定-OGDHC-总活性的实验

实验方法原理 实验材料 OGDHC试剂、试剂盒 磷酸钾NAD+焦磷酸硫胺素MgCl2α-酮戊二酸二硫赤藓糖醇辅酶 A仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品37 ℃ 时,于 340 nm 处吸收值发生变化,ε340=6.3×103

由-NAD+还原反应测定的-PDHC-总活性实验

实验方法原理 实验材料 PDHC试剂、试剂盒 磷酸钾NAD+二磷酸硫胺MgCl2丙酮酸二硫代苏糖醇辅酶 A仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品37℃ 时,在 340 nm 处吸收值发生变化。NADPH 的吸收系数 ε340=6

由-NAD+还原反应测定的-PDHC-总活性实验

实验材料PDHC试剂、试剂盒磷酸钾NAD+二磷酸硫胺MgCl2丙酮酸二硫代苏糖醇辅酶 A仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品37℃ 时,在 340 nm 处吸收值发生变化。NADPH 的吸收系数 ε340=6.3×103 l/(m

由-NAD+还原反应测定-OGDHC-总活性的实验

实验材料OGDHC试剂、试剂盒磷酸钾NAD+焦磷酸硫胺素MgCl2α-酮戊二酸二硫赤藓糖醇辅酶 A仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品37 ℃ 时,于 340 nm 处吸收值发生变化,ε340=6.3×103 l/(mol·cm)

由-NAD+还原反应测定的-PDHC-总活性实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 PDHC

由-NAD+还原反应测定-OGDHC-总活性的实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 OGDHC

乙醇的蒸馏及沸点测定实验

实验方法原理 沸点对有机化合物来说,是一种重要的物理常数。纯物质在一定压力下具有恒定的沸点。若有杂质的参入,沸点则会发生降低或升高的现象,并且在蒸馏过程中沸点会逐渐变化。因此,测定沸点可检验物质的纯度①。沸点的测定通常就在物质的蒸馏提纯过程中附带进行(常量法)。而测定纯粹液态有机物的沸点通常用微量法

乙醇的蒸馏及沸点测定实验

实验方法原理沸点对有机化合物来说,是一种重要的物理常数。纯物质在一定压力下具有恒定的沸点。若有杂质的参入,沸点则会发生降低或升高的现象,并且在蒸馏过程中沸点会逐渐变化。因此,测定沸点可检验物质的纯度①。沸点的测定通常就在物质的蒸馏提纯过程中附带进行(常量法)。而测定纯粹液态有机物的沸点通常用微量法。

二氢硫辛酰胺脱氢酶的测定实验_氧化反应

NADH:硫辛酰胺氧化还原酶,硫辛酰胺脱氢酶。此酶发现于细胞中,游离形式(二聚体)存在,与多酶复合体结合,与丙酮酸脱氢酶复合体、酮戊二酸脱氢酶复合体以及分支的含氧酸脱氢酶复合体相似。此酶首先被 Straub(1939)发现,由于其在加入人为的电子受体如氰化铁、二氯酚吲哚酚和醌后,可以催化 NAD(P

莽草酸脱氢酶测定实验

实验方法原理 莽草酸:NADPH+3-氧化还原酶。它是含苯环氨基酸生物合成途径中的酶。3-脱氢莽草酸+NADPH+H+→莽草酸+NADP+测定逆反应。实验材料 莽草酸脱氢酶稀释溶液试剂、试剂盒 莽草酸碳酸钠NADP仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合

莽草酸脱氢酶测定实验

基本方案             实验方法原理 莽草酸:NADPH+3-氧化还原酶。它是含苯环氨基酸生物合成途径中的酶。3-脱氢莽草酸+NADPH+H+→莽草酸+NADP+测定逆反应

莽草酸脱氢酶测定实验

实验方法原理莽草酸:NADPH+3-氧化还原酶。它是含苯环氨基酸生物合成途径中的酶。3-脱氢莽草酸+NADPH+H+→莽草酸+NADP+测定逆反应。实验材料莽草酸脱氢酶稀释溶液试剂、试剂盒莽草酸碳酸钠NADP仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02

硝酸还原酶活性的测定实验

实验方法原理硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中的关键酶,与作物吸收和利用硝态氮的能力相关。它催化NO3-还原为NO2-的反应:NO3-+NADH+H+→NO2-+NAD++H2O反应产生的NO2-可从组织内渗透到外界溶液中,定时测定一定的反应溶液中NO2-含量的变化情况则可了解此酶的活性大小。NO2-的

硝酸还原酶活性的测定实验

实验方法原理 硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中的关键酶,与作物吸收和利用硝态氮的能力相关。它催化NO3-还原为NO2-的反应:NO3-+NADH+H+→NO2-+NAD++H2O反应产生的NO2-可从组织内渗透到外界溶液中,定时测定一定的反应溶液中NO2-含量的变化情况则可了解此酶的活性大小。NO2-

还原糖和总糖的测定实验

实验方法原理 各种单糖和麦芽糖是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。利用溶解度不同,可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来,再用酸水解法使没有还原性的双糖和多糖彻底水解成有还原性的单糖。在碱性条件下,还原糖将3,5-二硝基水杨酸还原为3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色物质),还原糖则被氧化成糖酸及其它

硝酸还原酶活性的测定实验

实验方法原理:硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中的关键酶,与作物吸收和利用硝态氮的能力相关。它催化NO3-还原为NO2-的反应:NO3-+NADH+H+→NO2-+NAD++H2O反应产生的NO2-可从组织内渗透到外界溶液中,定时测定一定的反应溶液中NO2-含量的变化情况则可了解此酶的活性大小。NO2-

还原糖和总糖的测定实验

实验方法原理:各种单糖和麦芽糖是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。利用溶解度不同,可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来,再用酸水解法使没有还原性的双糖和多糖彻底水解成有还原性的单糖。在碱性条件下,还原糖将3,5-二硝基水杨酸还原为3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色物质),还原糖则被氧化成糖酸及其它

还原糖和总糖的测定实验

实验方法原理各种单糖和麦芽糖是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。利用溶解度不同,可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来,再用酸水解法使没有还原性的双糖和多糖彻底水解成有还原性的单糖。在碱性条件下,还原糖将3,5-二硝基水杨酸还原为3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色物质),还原糖则被氧化成糖酸及其它产

苹果酸脱氢酶测定实验

实验方法原理L-苹果酸:NAD 氧化还原酶,MDH。L-苹果酸 + NAD+⇌ 草酰乙酸 + NADH + H+实验首选逆反应。实验材料MDH 稀释溶液试剂、试剂盒磷酸钾NADH草酰乙酸仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml MDH 稀释溶

L乳酸脱氢酶测定实验

分光光度计法测定还原反应 荧光光度计法测定还原反应 氧化反应测定             实验方法原理 乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase

苹果酸脱氢酶测定实验

基本方案             实验方法原理 L-苹果酸:NAD 氧化还原酶,MDH。L-苹果酸 + NAD+⇌ 草酰乙酸 + NADH + H+实验首选逆反应。