乙醇脱氢酶的测定实验——氧化反应测定

实验方法原理乙醇 + NAD+ ⇌ 乙醛 + NADPH + H+由于平衡易向正方向移动,逆反应的抑制必须加入碱性的 pH 试剂以及另一种试剂来捕捉乙醛,以便将产物从平衡中移走。实验材料乙醇脱氢酶稀释溶液试剂、试剂盒甘氨酸-二磷酸钠溶液磷酸钾乙醇NADBSA 溶液氨基脲仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml ADH 稀释溶液25℃ 时,于 340nm 处吸收值降低。NADH 的吸收系数 ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。展开 注意事项其他试剂:75 mmol/L 甘氨酸-二磷酸钠溶液 pH 9.0(10 g Na4P2O7· 10 H2O+0.5 g 甘氨酸溶于 300 ml H2O,用 1 mol/L HCl 调节至 pH 9.0)0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.5乙醇,p.A.(Mr=46.1,d=0.81 g/ml)0.1 ......阅读全文

乙醇脱氢酶的测定实验——氧化反应测定

实验方法原理乙醇 + NAD+ ⇌ 乙醛 + NADPH + H+由于平衡易向正方向移动,逆反应的抑制必须加入碱性的 pH 试剂以及另一种试剂来捕捉乙醛,以便将产物从平衡中移走。实验材料乙醇脱氢酶稀释溶液试剂、试剂盒甘氨酸-二磷酸钠溶液磷酸钾乙醇NADBSA 溶液氨基脲仪器、耗材分光光度计实验步骤实

乙醇脱氢酶的测定实验——还原反应测定

根据酶的来源,有许多种的乙醇脱氢酶(ADH),通常使用的酶是由酵母或马的肝脏中提取出来的。它们的结构和专一性都截然不同。酵母的 ADH 展现出醇的高活性,它是一个相同四聚体的酶,相对分子质量约为 148 000。哺乳动物的乙醇脱氢酶是一个 Mr=79000 的二聚体,并且比较偏好较高浓度的乙醇。该酶

乙醇脱氢酶的测定实验

还原反应测定 氧化反应测定             实验方法原理 ADH 反应:乙醛 + NADPH + H+ ⇌ 乙醇 + NAD+此反应是可逆的,并且可以从两个位点检测

L乳酸脱氢酶测定实验_氧化反应测定

实验材料LDH 稀释溶液试剂、试剂盒磷酸钾NADH乳酸仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml LDH 稀释溶液25℃ 时,于 340 nm 处吸收值降低。NADPH 的吸收系数 ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。展开 注意事项

乙醇脱氢酶的测定

实验方法原理 ADH 反应:乙醛 + NADPH + H+ ⇌ 乙醇 + NAD+此反应是可逆的,并且可以从两个位点检测出来,平衡常数是 8×1012 mol/L。乙醇的生成是人们希望看到的,由此可以更为简单地检测这个方向的反应进程。但是也有极为不利的因素,即乙醛的毒性以及此反应速度过快。实验材料

二氢硫辛酰胺脱氢酶的测定实验_氧化反应

NADH:硫辛酰胺氧化还原酶,硫辛酰胺脱氢酶。此酶发现于细胞中,游离形式(二聚体)存在,与多酶复合体结合,与丙酮酸脱氢酶复合体、酮戊二酸脱氢酶复合体以及分支的含氧酸脱氢酶复合体相似。此酶首先被 Straub(1939)发现,由于其在加入人为的电子受体如氰化铁、二氯酚吲哚酚和醌后,可以催化 NAD(P

3磷酸甘油醛脱氢酶的测定实验——氧化反应

实验方法原理GAPDH,D-磷酸甘油醛;NADP+ 氧化还原酶(磷酸化)。D-3-磷酸甘油醛 + NAD+⇌ 1,3-磷酸甘油醛+ NADH + H+酶的实验既可以在正反应方向也可以在偶联后的逆反应方向进行。正反应中,必须加入不稳定且很昂贵的 DL-3-磷酸甘油酸。实验材料3-磷酸甘油醛脱氢酶溶液试

乙醇的蒸馏及沸点测定实验

实验方法原理 沸点对有机化合物来说,是一种重要的物理常数。纯物质在一定压力下具有恒定的沸点。若有杂质的参入,沸点则会发生降低或升高的现象,并且在蒸馏过程中沸点会逐渐变化。因此,测定沸点可检验物质的纯度①。沸点的测定通常就在物质的蒸馏提纯过程中附带进行(常量法)。而测定纯粹液态有机物的沸点通常用微量法

乙醇的蒸馏及沸点测定实验

实验方法原理沸点对有机化合物来说,是一种重要的物理常数。纯物质在一定压力下具有恒定的沸点。若有杂质的参入,沸点则会发生降低或升高的现象,并且在蒸馏过程中沸点会逐渐变化。因此,测定沸点可检验物质的纯度①。沸点的测定通常就在物质的蒸馏提纯过程中附带进行(常量法)。而测定纯粹液态有机物的沸点通常用微量法。

二氢硫辛酰胺脱氢酶的测定实验_还原反应

实验材料酶样品试剂、试剂盒磷酸钾NAD+NADHDTEEDTADL-硫辛酰胺仪器、耗材分光光度计实验步骤0.93 ml 实验混合物0.05 ml 0.2 mol/L DL-二氢硫辛酰胺 10 mol/L0.02 ml 酶样品30 ℃ 时,于 340 nm 处吸收值发生变化,ε340=6.3×103 

莽草酸脱氢酶测定实验

基本方案             实验方法原理 莽草酸:NADPH+3-氧化还原酶。它是含苯环氨基酸生物合成途径中的酶。3-脱氢莽草酸+NADPH+H+→莽草酸+NADP+测定逆反应

莽草酸脱氢酶测定实验

实验方法原理莽草酸:NADPH+3-氧化还原酶。它是含苯环氨基酸生物合成途径中的酶。3-脱氢莽草酸+NADPH+H+→莽草酸+NADP+测定逆反应。实验材料莽草酸脱氢酶稀释溶液试剂、试剂盒莽草酸碳酸钠NADP仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02

莽草酸脱氢酶测定实验

实验方法原理 莽草酸:NADPH+3-氧化还原酶。它是含苯环氨基酸生物合成途径中的酶。3-脱氢莽草酸+NADPH+H+→莽草酸+NADP+测定逆反应。实验材料 莽草酸脱氢酶稀释溶液试剂、试剂盒 莽草酸碳酸钠NADP仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合

L乳酸脱氢酶测定实验_荧光光度计法测定还原反应

实验材料LDH 稀释溶液试剂、试剂盒磷酸钾NADH丙酮酸仪器、耗材荧光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」1.98 ml 实验混合物0.02 ml LDH 稀释溶液25℃ 时,在 260 nm 激发,470 nm 处测定每分钟荧光差异。用适当浓度范围的 NADH 浓度对荧光强度的标准曲线来确

L乳酸脱氢酶测定实验_分光光度计法测定还原反应

实验方法原理乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)广泛存在于生物细胞内,是糖代谢酵解途径的关键酶之一。LDH可溶于水或稀盐溶液。组织中LDH含量测定方法很多,其中紫外分光光度法更为简单、快速。鉴于NADH,NAD+在340nm及260nm处有各自的最大吸收峰,因此以NAD+

苹果酸脱氢酶测定实验

基本方案             实验方法原理 L-苹果酸:NAD 氧化还原酶,MDH。L-苹果酸 + NAD+⇌ 草酰乙酸 + NADH + H+实验首选逆反应。

苹果酸脱氢酶测定实验

实验方法原理L-苹果酸:NAD 氧化还原酶,MDH。L-苹果酸 + NAD+⇌ 草酰乙酸 + NADH + H+实验首选逆反应。实验材料MDH 稀释溶液试剂、试剂盒磷酸钾NADH草酰乙酸仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml MDH 稀释溶

L乳酸脱氢酶测定实验

分光光度计法测定还原反应 荧光光度计法测定还原反应 氧化反应测定             实验方法原理 乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase

谷氨酸脱氢酶的测定实验

基本方案             实验方法原理 L-谷氨酸:NAD(P)氧化还原酶(脱氨)。L-谷氨酸+NAD(P)++H2O ⇌ 2-酮戊二酸+NAD(P)H+NH4+实验适用于逆

谷氨酸脱氢酶的测定实验

实验方法原理L-谷氨酸:NAD(P)氧化还原酶(脱氨)。L-谷氨酸+NAD(P)++H2O ⇌ 2-酮戊二酸+NAD(P)H+NH4+实验适用于逆反应,ADP 刺激反应进行。:实验材料酶样品试剂、试剂盒咪唑缓冲液酮戊二酸乙酸铵NADHEDTAADP仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「

乙醇酸氧化酶活性测定(比色法)

原理     乙醇酸氧化酶在光呼吸作用中起重要的作用,在它的作用下将乙醇酸氧化生成乙醛酸和过氧化氢,反应如下:     如果我们以二氯靛酚作为氢受体,接受乙醇酸氧化时脱下的H ,使二氯靛酚还原,此时原来为蓝色的染料则褪至无色,其反应如下:     利用染料颜

3磷酸甘油醛脱氢酶的测定实验——还原反应

实验方法原理实验材料3-磷酸甘油酸激酶试剂、试剂盒三乙醇胺-NaOH3-磷酸甘油酸ATPNADHEDTA硫酸镁 仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶溶液25℃ 时,于 340 nm 处吸收值降低。NADPH 的吸收系数 ε340=6.

乙醇脱氢酶活性测定对各类肝细胞损伤的诊断价值研究...

乙醇脱氢酶活性测定对各类肝细胞损伤的诊断价值研究进展       肝脏是人体内最重要的消化器官之一,同时人体摄入的绝大多数物质都要通过肝脏代谢.保证肝脏的正常工作和对肝 脏疾病的早期诊断及治疗需要对肝脏的功能进行实时监测.血清中常用来反映肝细胞损伤以及判断损伤程度的酶有丙氨酸转氨酶(ALT)

乙醇脱氢酶活性测定对各类肝细胞损伤的诊断价值研究

    肝脏是人体内最重要的消化器官之一,同时人体摄入的绝大多数物质都要通过肝脏代谢.保证肝脏的正常工作和对肝 脏疾病的早期诊断及治疗需要对肝脏的功能进行实时监测.血清中常用来反映肝细胞损伤以及判断损伤程度的酶有丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶 (AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷氨酸脱氢酶(

乙醇检验的测定方法

  (一)化学显色法。  用蒸馏、扩散等技术将生物材料中的乙醇分离出来,然后采用磺酸盐、碘仿、重铬酸钾反应进行检验。其中重铬酸钾法使用比较普遍,主要原理是根据乙醇的挥发性和还原作用,在微量孔威(Conwag)扩散池中,外室试样中的乙醇从试样中扩散出来,与内室的重铬酸钾反应,根据还原的程度进行定性、半

α酮戊二酸脱氢酶的测定实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 α-酮戊二酸脱氢酶

α酮戊二酸脱氢酶的测定实验

实验材料α-酮戊二酸脱氢酶试剂、试剂盒磷酸钾MgCl2α-酮戊二酸焦磷酸硫胺素K3[Fe(CN)6]牛血清蛋白仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品 30℃ 时,于 436 nm 处吸收值发生变化,ε436=755 l/(mol·c

异柠檬酸脱氢酶测定实验

实验方法原理异柠檬酸脱氢酶(NADP+),异柠檬酸:NADP+ 氧化还原酶(脱羧)。D-异柠檬酸 + NADP+ → CO2 + 2-酮戊二酸 + NADPH + H+这里所描述的实验步骤用 NADP,可以用 NAD 来代替,也可以用异柠檬酸脱氢酶(NAD +),异柠檬酸:NAD + 氧化还原酶(脱

异柠檬酸脱氢酶测定实验

基本方案             实验方法原理 异柠檬酸脱氢酶(NADP+),异柠檬酸:NADP+ 氧化还原酶(脱羧)。D-异柠檬酸 + NADP+ → CO2 + 2-酮戊二酸 +

乙醇消毒剂中乙醇含量的测定

1 前言消毒剂用于杀灭传播媒介上病原微生物,使其达到无害化要求,将病原微生物消灭于人体之外,切断传染病的传播途径,达到控制传染病的目的。乙醇消毒剂是指主要以乙醇为原料制成的消毒剂,其中乙醇的含量通常采用气相色谱检测,本方法参考国标乙醇消毒剂卫生标准(GB 26373-2010),测定乙醇消毒剂中