乙酸激酶的测定实验

实验方法原理ATP:乙酸磷酸转移酯(AK)乙酸+ATP→乙酰磷酸+ADP这个反应可以与丙酮酸激酶(PK)偶联,乳酸脱氢酶(LDH)反应如下:实验材料酶样品试剂、试剂盒三乙醇胺-HCl KOH乙酸钠ATPMgCl2磷酸烯醇式丙酮酸LDHPK仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品 25 ℃ 时,于 340 nm 处吸收值降低,ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。展开 注意事项其他试剂:0.1 mol/L 三乙醇胺-HCl/KOH,pH 7.6(三乙醇胺-HCl,用 1 mol/L KOH 调节 pH 7.6)2 mol/L 乙酸钠(Mr=82.0;16.4 g 溶于 100 ml 水中)0.1 mol/L ATP(二钠盐,三水合物,Mr=605.2;605 mg 溶于 10 ml 水中)0.1 mol/L MgCl2(六水合物,Mr=......阅读全文

乙酸激酶的测定实验

基本方案             实验方法原理 ATP:乙酸磷酸转移酯(AK)乙酸+ATP→乙酰磷酸+ADP这个反应可以与丙酮酸激酶(PK)偶联,乳酸脱氢酶(LDH)反应如下:

乙酸激酶的测定实验

实验方法原理ATP:乙酸磷酸转移酯(AK)乙酸+ATP→乙酰磷酸+ADP这个反应可以与丙酮酸激酶(PK)偶联,乳酸脱氢酶(LDH)反应如下:实验材料酶样品试剂、试剂盒三乙醇胺-HCl KOH乙酸钠ATPMgCl2磷酸烯醇式丙酮酸LDHPK仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.

乙酸激酶的测定

实验方法原理 ATP:乙酸磷酸转移酯(AK)乙酸+ATP→乙酰磷酸+ADP这个反应可以与丙酮酸激酶(PK)偶联,乳酸脱氢酶(LDH)反应如下:实验材料 酶样品试剂、试剂盒 三乙醇胺-HCl KOH乙酸钠ATPMgCl2磷酸烯醇式丙酮酸LDHPK仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「

己糖激酶的测定实验

基本方案             实验方法原理 直接测量己糖激酶的反应:D-葡萄糖+ATP → 6-磷酸葡萄糖+ADP简单的光度测量是达不到的,葡萄糖的磷酸化最好用测量磷酸或者 AT

己糖激酶的测定实验

实验方法原理 直接测量己糖激酶的反应:D-葡萄糖+ATP → 6-磷酸葡萄糖+ADP简单的光度测量是达不到的,葡萄糖的磷酸化最好用测量磷酸或者 ATP32 标记的办法。由于通过层析,G6P 的实验必须完全与 ATP 和 ADP 分开,因此,建议应用 HPLC 方法。酶的实验通常是酶与 G6P 脱氢酶

己糖激酶的测定实验

实验方法原理直接测量己糖激酶的反应:D-葡萄糖+ATP → 6-磷酸葡萄糖+ADP简单的光度测量是达不到的,葡萄糖的磷酸化最好用测量磷酸或者 ATP32 标记的办法。由于通过层析,G6P 的实验必须完全与 ATP 和 ADP 分开,因此,建议应用 HPLC 方法。酶的实验通常是酶与 G6P 脱氢酶反

丙酮酸激酶的测定实验

实验方法原理PK,ATP:丙酮酸磷酸转移酶。有其他激酶的伴随,这个反应的直接实验:例如,可以应用 P32 标记。由分光光度测定出,这个反应与 LDH 反应偶联,继续 NADH 的氧化反应:实验材料酶样品试剂、试剂盒三乙醇胺-HCl KOHKClMgCl2磷酸烯醇式丙酮酸ADPNADHLDH仪器、耗材

丙酮酸激酶的测定实验

实验方法原理 PK,ATP:丙酮酸磷酸转移酶。有其他激酶的伴随,这个反应的直接实验:例如,可以应用 P32 标记。由分光光度测定出,这个反应与 LDH 反应偶联,继续 NADH 的氧化反应:实验材料 酶样品试剂、试剂盒 三乙醇胺-HCl KOHKClMgCl2磷酸烯醇式丙酮酸ADPNADHLDH仪器

丙酮酸激酶的测定实验

基本方案             实验方法原理 PK,ATP:丙酮酸磷酸转移酶。有其他激酶的伴随,这个反应的直接实验:例如,可以应用 P32 标记。由分光光度测定出,这个反应与 LD

乙酸丙酮法血清甘油三酯测定实验

实验方法原理本法用异丙醇抽提血清TG,氧化铝吸附磷脂及游离甘油氢氧化钾皂化,过碘酸钠氧化生成甲醛,甲醛与乙酸丙酮在氨离子存在下加热生成黄色的 3,5二乙酰-1,4二甲基吡啶〔Hantgsch止反应)显色程度与标本中TG浓度成正比。实验步骤一、实验试剂:1. 异丙醇(分析试剂)2. 氧化铝(中性、层分

乙酸丙酮法血清甘油三酯测定实验

实验方法原理 本法用异丙醇抽提血清TG,氧化铝吸附磷脂及游离甘油氢氧化钾皂化,过碘酸钠氧化生成甲醛,甲醛与乙酸丙酮在氨离子存在下加热生成黄色的 3,5二乙酰-1,4二甲基吡啶〔Hantgsch止反应)显色程度与标本中TG浓度成正比。实验步骤 一、实验试剂:1. 异丙醇(分析试剂)2. 氧化铝(中性、

肌酸激酶的测定

肌酸激酶(CK)是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体,正常人体中有三种同工酶:CK~BB(CK1):主要存于脑组织、前列腺、肠、肺、膀胱、子宫、胎盘及甲状腺中;CK~MB(CK2):主要存于心肌医学|教育网搜集整理;CK~MM(CK3):主要存于肌肉组织。CK作用后生成的磷酸肌酸含高能磷酸键,是肌肉

肌酸激酶的测定

  肌酸激酶(CK)是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体,正常人体中有三种同工酶:  CK~BB(CK1):主要存于脑组织、前列腺、肠、肺、膀胱、子宫、胎盘及甲状腺中;  CK~MB(CK2):主要存于心肌;  CK~MM(CK3):主要存于肌肉组织。  CK作用后生成的磷酸肌酸含高能磷酸键,是肌肉

肌酸激酶的测定

肌酸激酶(CK)是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体,正常人体中有三种同工酶: CK~BB(CK1):主要存于脑组织、前列腺、肠、肺、膀胱、子宫、胎盘及甲状腺中; CK~MB(CK2):主要存于心肌医学|教育网搜集整理; CK~MM(CK3):主要存于肌肉组织。 CK作用后生成的磷酸肌酸含高能磷酸

3磷酸甘油酸激酶的测定实验

基本方案             实验材料 酶样品 试剂、试剂盒

3磷酸甘油酸激酶的测定实验

实验材料酶样品试剂、试剂盒三乙醇胺-NaOH3-磷酸甘油酸ATPNADHEDTA硫酸镁3-磷酸甘油酸激酶GAPDH仪器、耗材分光光度计实验步骤0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品 25 ℃ 时于 340 nm 处吸收值降低,ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。展开 注意事项其

三氯乙酸沉淀实验

试剂、试剂盒 丙酮分子量标准TCA+DOC加与不加2-巯基乙醇的样品缓冲液仪器、耗材 聚丙烯微量离心管实验步骤 材料与设备丙酮(Aldrich Chemical Co.Inc.)注:保存于室温。不能放入冰箱。聚丙烯微量离心管 (1.5-ml)注:1. 用前将离心管洗干净。2. 分析极少量蛋白质(

三氯乙酸沉淀实验

            实验方法原理 1. 三氯乙酸为酸性化合物,是阴离子型沉淀剂,在低于蛋白质等电点的PH值时,酸根与带正点荷的蛋白质形成不溶性盐而沉淀;2. 作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团, 使之聚集沉淀。3. 随着蛋白质分子量的增

三氯乙酸沉淀实验

三氯乙酸沉淀实验主要用于(1)蛋白质的沉淀纯化;(2)试样化合物的提取。实验方法原理1. 三氯乙酸为酸性化合物,是阴离子型沉淀剂,在低于蛋白质等电点的PH值时,酸根与带正点荷的蛋白质形成不溶性盐而沉淀;2. 作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变,暴露出较多的疏水性基团, 使之聚集沉淀。3. 随着蛋白

肌酸激酶的测定生理变异

  年龄、性别和种族对CK含量都有一定影响。新生儿CK常为正常成年人的2~3倍。CK含量和肌肉运动密切相关,其量和人体肌肉总量有关,男性参考值高于女性可能与这点有联系。白种男性CK均值为黑种人的66%,可能与种族有关,但也不排除两个人种之间体力劳动的差别。

尿激酶的效价测定

1 酶活力(1)试剂 牛纤维蛋白原溶液取牛纤维蛋白原,加巴比妥一氯化钠缓冲液(pH 7.8)制成每1ml中含6.67mg可凝结蛋白的溶液。牛凝血酶溶液 取牛凝血酶,加巴比妥一氯化钠缓冲液(pH 7.8)制成每1ml中含6.0单位的溶液。牛纤维蛋白溶酶原溶液 取牛纤维蛋白溶酶原,加三羟甲基氨基甲烷缓冲

尿激酶的含量测定方法

酶活力牛纤维蛋白原溶液取牛纤维蛋白原,加巴比妥-氯化钠缓冲液(pH7.8)溶解并稀释制成每1ml中含6.67mg可凝结蛋白的溶液牛凝血酶溶液取牛凝血酶,加巴比妥-氯化钠缓冲液(pH7.8)溶解并稀释制成每1ml中含6.0单位的溶液。牛纤维蛋白溶酶原溶液取牛纤维蛋白溶酶原,加三羟甲基氨基甲烷缓冲液(p

尿激酶的含量测定方法

酶活力牛纤维蛋白原溶液取牛纤维蛋白原,加巴比妥-氯化钠缓冲液(pH7.8)溶解并稀释制成每1ml中含6.67mg可凝结蛋白的溶液牛凝血酶溶液取牛凝血酶,加巴比妥-氯化钠缓冲液(pH7.8)溶解并稀释制成每1ml中含6.0单位的溶液。牛纤维蛋白溶酶原溶液取牛纤维蛋白溶酶原,加三羟甲基氨基甲烷缓冲液(p

尿激酶的效价测定

1 酶活力(1)试剂 牛纤维蛋白原溶液取牛纤维蛋白原,加巴比妥一氯化钠缓冲液(pH 7.8)制成每1ml中含6.67mg可凝结蛋白的溶液。牛凝血酶溶液 取牛凝血酶,加巴比妥一氯化钠缓冲液(pH 7.8)制成每1ml中含6.0单位的溶液。牛纤维蛋白溶酶原溶液 取牛纤维蛋白溶酶原,加三羟甲基氨基甲烷缓冲

乙酸乙酯的制取实验

乙醇乙酸意缱绻, 催化吸水求硫酸。 常加碎瓷防暴沸, 除酸除醇靠纯碱。 解释: 1、乙醇乙酸意缱绻,催化吸水求硫酸:这句的意思是说乙酸乙醇在浓硫酸的催化作用下发生酯化反应生成乙酸乙酯,在该反应中浓硫酸既是催化剂又是吸水剂(因为该反应是可逆反应,生成的水被浓硫酸吸收掉,降低了生成物水的浓

乙酸乙酯的制备实验

实验方法原理实验步骤仪器:加热套;250 mL三口瓶;75°弯头;直形冷凝管;真空接尾管;150 mL锥形瓶;真空塞;125 mL滴液漏斗(以上均为19#);温度计(200℃、100℃); 500 mL烧杯2个;量筒(10mL、100mL);125mL分液漏斗;蒸馏头19#。药品:95%乙醇;浓硫酸

乙酸乙酯的制备实验

实验方法原理实验步骤仪器:加热套;250 mL三口瓶;75°弯头;直形冷凝管;真空接尾管;150 mL锥形瓶;真空塞;125 mL滴液漏斗(以上均为19#);温度计(200℃、100℃); 500 mL烧杯2个;量筒(10mL、100mL);125mL分液漏斗;蒸馏头19#。药品:95%乙醇;浓硫酸

激酶的动力学实验

Km和Vmax的确定             实验材料 蛋白底物 试剂、试剂盒

酵母转化实验_乙酸锂转化

实验材料酵母试剂、试剂盒YPDYPAD腺嘌呤半硫酸TE乙酸锂仪器、耗材摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤1.  在开始实验前2天,接种待转化的酵母菌株的单菌落于5 ml YPD培养基中,于30℃恒温摇床,培养过夜。 2.  转化的前一天晚上,往1 L 无菌烧瓶中加入300 ml YPAD培养基,然后

吲哚乙酸氧化酶活性的测定

原理   吲哚乙酸在吲哚乙酸氧化酶的作用下,被氧化破坏失去活性。植物体内吲哚乙酸氧化酶活力的大小,对调节体内吲哚乙酸的水平,起着重要的作用,而影响植物的生长。酶活力的大小可以其破坏吲哚乙酸的速度表示之。吲哚乙酸的含量可用比色法测定。   仪器药品     721型分光光度