Antpedia LOGO WIKI资讯

乙酸激酶的测定

实验方法原理 ATP:乙酸磷酸转移酯(AK)乙酸+ATP→乙酰磷酸+ADP这个反应可以与丙酮酸激酶(PK)偶联,乳酸脱氢酶(LDH)反应如下:实验材料 酶样品试剂、试剂盒 三乙醇胺-HCl KOH乙酸钠ATPMgCl2磷酸烯醇式丙酮酸LDHPK仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品 25 ℃ 时,于 340 nm 处吸收值降低,ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。注意事项 其他 试剂:0.1 mol/L 三乙醇胺-HCl/KOH,pH 7.6(三乙醇胺-HCl,用 1 mol/L KOH 调节 pH 7.6)2 mol/L 乙酸钠(Mr=82.0;16.4 g 溶于 100 ml 水中)0.1 mol/L ATP(二钠盐,三水合物,Mr=605.2;605 mg 溶于 10 ml 水中)0.1 mol/L MgCl2(六水合物,Mr=203.3;......阅读全文

“深部生物圈”古菌揭示生命起源

   生活在阳光下,我们看惯了飞禽走兽、树木花草,不会对“万物生长靠太阳”产生怀疑。最近几十年,随着海洋科技不断发展,科学家们发现在海洋底部一些黑暗的极端环境下,也有微生物活动的迹象。  最近,上海交通大学微生物海洋学实验室教授王风平领导的研究团队在《自然—微生物学》(Nature Microbio

向平末端DNA连接合成接头实验

实验方法原理 接头是指合成的能够自身互补的 DNA 片段,一般长 8~16 个核苷酸,互补的片段复性后可形成平末端的含有一个酶切位点的双链分子。实验材料 T4 噬菌体连接酶T4 噬菌体多聚核苷酸激酶限制性内切核酸酶外源或目的 DNA 片段试剂、试剂盒 乙酸胺ATP乙醇1

酪氨酸激酶分析实验

实验方法原理 实验材料 兔肌肉烯醇化酶试剂、试剂盒 1 mmol L DTT 50 mmol L HEPES(pH 7.0 )甘油100 mmol L 乙酸5 × 酪氨酸激酶反应缓冲液[γ-32P] ATP 溶液冰 2 × SDS-PAGE 样品缓冲液仪器、耗材 30℃

酪氨酸激酶分析实验

基本方案             实验方法原理 实验材料

细胞水平的代谢调节(一)

  一、细胞内酶的分隔分布  从物质代谢过程中可知,酶在细胞内是分隔着分布的。代谢上有关的酶,常常组成一个酶体系,分布在细胞的某一组分中,例如,糖酵解酶系和糖元合成、分解酶系存在于胞液中;三羧酸循环酶系和脂肪酸β-氧化酶系定位于线粒体;核酸合成的酶系则绝大部分集中在细胞核内。这样的酶的隔离

两篇Cell文章:肿瘤代谢与癌症免疫抑制

  在有氧气存在的情况下,大多数分化细胞都是利用线粒体氧化磷酸化来生成三磷酸腺苷(ATP)形式的能量,利用ATP来维持细胞过程。在缺氧的情况下,这些细胞则会转而利用没那么有效的糖酵解来生成ATP。 癌细胞往往在有氧气存在的情况下仍然利用糖酵解(称作为有氧糖酵解或“Warburg”效应)。尽管产能的效

两篇Cell文章:肿瘤代谢与癌症免疫抑制

  在有氧气存在的情况下,大多数分化细胞都是利用线粒体氧化磷酸化来生成三磷酸腺苷(ATP)形式的能量,利用ATP来维持细胞过程。在缺氧的情况下,这些细胞则会转而利用没那么有效的糖酵解来生成ATP。  癌细胞往往在有氧气存在的情况下仍然利用糖酵解(称作为有氧糖酵解或“Warburg”效应)。尽管产能的

制备和纯化 mRNA 显示蛋白实验

实验方法原理 实验材料 DNA 库不含甲硫氨酸的翻译混合物试剂、试剂盒 MgCl2核苷三磷酸溶液转录缓冲液去离子超滤水T7 RNA 聚合酶固体 EDTA尿素缓冲液NaCl乙醇EDTAATPT4 多核苷酸激酶缓冲液T4 多核苷酸激酶T4 DNA 连接酶缓冲液T4 DNA 连接酶乙酸钾溶液兔网织

代谢组学 | 肿瘤治疗之靶向葡萄糖代谢

  能量代谢重编程是肿瘤的十大特征之一,其中葡萄糖代谢异常是肿瘤代谢最突出的特征。在氧气充足的情况下,肿瘤细胞依然倾向于进行糖酵解,将葡萄糖代谢为乳酸。肿瘤细胞有氧糖酵解能力是正常细胞的20 ~ 30倍,为肿瘤代谢提供 大量能量和中间产物。因此,靶向糖酵解等异常环节的代谢酶是抗肿瘤治疗的重点。一些研

向平末端DNA连接合成接头实验

            实验方法原理 接头是指合成的能够自身互补的 DNA 片段,一般长 8~16 个核苷酸,互补的片段复性后可形成平末端的含有一个酶切位点的双链分子。

制备和纯化 mRNA 显示蛋白实验

基本方案             实验方法原理 实验材料

酶标仪使用说明及方法

通常酶标仪可广泛应用于医院临床诊断、免疫病理检测、微生物抗原及抗体检测、寄生虫病诊断、血液病诊断、内分泌障碍测定、植物病虫害研究学等领域。酶标仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器。应用场景:●酶动力学检测(乙酸胆碱酯酶、乳酸脱氢酶等)●酶活性相关分析(激酶、蛋白酶等)●细胞性分析(MTT、XTT、IC50

通过高等真核生物无细胞提取物分析mRNA的降解实验

            实验方法原理 细胞的环境、复制周期的状态和分化状态的改变会引起一些 mRNA 半衰期的改变。 实验材料

通过高等真核生物无细胞提取物分析mRNA的降解实验

细胞的环境、复制周期的状态和分化状态的改变会引起一些 mRNA 半衰期的改变。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理细胞的环境、复制周期的状态和分化状态的改变会引起一些 mRNA 半衰期的改变。实验材料DEPC细胞多聚核糖体RNA底物试剂、试剂盒乙酸钾乙酸镁DTTTris-乙酸

通过高等真核生物无细胞提取物分析mRNA的降解实验

实验方法原理 细胞的环境、复制周期的状态和分化状态的改变会引起一些 mRNA 半衰期的改变。实验材料 DEPC细胞多聚核糖体RNA底物试剂、试剂盒 乙酸钾乙酸镁DTTTris-乙酸组织培养液无菌去离子水磷酸肌酸ATPGTP乙酸钾精胺RNase 抑制剂仪器、耗材 高温烤箱匀浆器研杵低速离心机超速离心机

乙酸激酶的测定实验

基本方案             实验方法原理 ATP:乙酸磷酸转移酯(AK)乙酸+ATP→乙酰磷酸+ADP这个反应可以与

mRNA 在麦胚提取物中的翻译

实验材料 精胺或4.0〜8.Ommol L亚精胺肌氨酸激酶新鲜麦胚 沙粒试剂、试剂盒 提取缓冲液 平衡缓冲液 DEFC 10X能量缓冲液 乙酸钾 DTT LHEPES mRNA [3 H] 或 [35S] 标记的 L-氨基酸 三氯乙酸(TCA)。仪器、耗材 SephatkxG-25(粗级)高温烘箱

mRNA 在麦胚提取物中的翻译

            实验材料 精胺或4.0〜8.Ommol L亚精胺 肌氨酸激酶 新鲜麦胚 沙粒

基于 AFLP 的转录表达谱分析(一)

实验方法原理 实验材料 Total RNA试剂、试剂盒 链霉亲和素包被的磁珠洗涤缓冲液EDTA第一链缓冲液第二链缓冲液DTT4 dNTP 的混合物SuperScript II RNase HSTEXTris· ClRL缓冲液ATP PCR 缓冲液T4 多核苷酸激酶缓冲液加样染料硅烷黏合硅烷溶

4.2 mRNA 在麦胚提取物中的翻译

麦胚提取物体外翻译系统可用于病毒和真核细胞中 mRNA 在异种无细胞体系中的有效的翻译实验材料精胺或4.0〜8.Ommol L亚精胺肌氨酸激酶新鲜麦胚沙粒试剂、试剂盒提取缓冲液平衡缓冲液DEFC10X能量缓冲液乙酸钾DTTLHEPESmRNA[3 H] 或 [35S] 标记的 L-氨基酸三氯乙酸(T

乙酸激酶的测定实验

实验方法原理ATP:乙酸磷酸转移酯(AK)乙酸+ATP→乙酰磷酸+ADP这个反应可以与丙酮酸激酶(PK)偶联,乳酸脱氢酶(LDH)反应如下:实验材料酶样品试剂、试剂盒三乙醇胺-HCl KOH乙酸钠ATPMgCl2磷酸烯醇式丙酮酸LDHPK仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.

淀粉葡糖苷酶的测定

实验方法原理 4-α-D-葡聚糖葡萄糖水解酶,葡聚糖 1,4-α-葡糖苷酶通过水解末端 1,4- 和 1,6 连接的 α-1,6-葡糖苷键释放 β-D-葡萄糖。这个实验与 α-葡糖苷酶类似,只是用糖原代替麦芽糖作为底物。一段时间以后(5 min)反应停止,葡萄糖被测出与己糖激酶/6-磷酸葡糖脱氢酶偶

科学家研究利用精子为纳米机器人供能

北京时间12月5日消息,据《科学日报》杂志4日报道,根据一项最新研究显示,纳米仪器将采用一种为精子长距离游动提供能量的生物途径,用来释放药物,或者在人体内执行机械功能。 科内尔贝克动物健康研究所的研究人员进行的这种研究,可能是首次证明了如何能将多级生物学途经在人造设备中组装起来,并发挥功能。特拉维

用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验——酪氨酸激酶

试剂、试剂盒烯醇化酶酪氨酸激酶分析缓冲液实验步骤1. 制备酸变性的烯醇化酶从兔肌肉中纯化的烯醇化酶通常以硫酸铵沉淀或者悬液的形式存在。(1) 含 100 μg 的烯醇化酶,于 4℃ 全速离心 5 分钟。(2) 去上清,加入含有 1 mmol/L DTT 的 10 μl 50 mmol/L HEPES

淋巴细胞活化过程中信号转导的分子基础

  淋巴细胞是免疫系统中重要的免疫活性细胞,其活化过程的信号转导(signal transduction)及其分子基础极为复杂,是目前分子免疫学及免疫生物学中研究的热点。目前对T淋巴细胞活化过程中信号转导及其分子基础的研究较深入,而对B细胞的研究资料还较缺乏。本章着重介绍T淋巴细胞

向平末端DNA连接合成接头实验

接头是指合成的能够自身互补的 DNA 片段,一般长 8~16 个核苷酸,互补的片段复性后可形成平末端的含有一个酶切位点的双链分子。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理接头是指合成的能够自身互补的 DNA 片段,一般长 8~16 个核苷酸,互补的片段复性后可形成平末端的含有一个

重症肌无力相关检测试剂盒介绍

乙酰胆碱受体抗体检测试剂盒(AChR-Ab  ELISA):用于定量测定人血清中乙酰胆碱受体抗体(AChR Ab)浓度。还可以帮助早期鉴别诊断NMO和多发性硬化症(MS),有益于NMO的早期干预治疗。这些抗体的测量在疾病诊断和管理中具有相当大的价值。骨骼肌受体酪氨酸激酶自身抗体检测试剂盒(

制备和纯化 mRNA 显示蛋白实验

实验材料DNA 库不含甲硫氨酸的翻译混合物试剂、试剂盒MgCl2核苷三磷酸溶液转录缓冲液去离子超滤水T7 RNA 聚合酶固体 EDTA尿素缓冲液NaCl乙醇EDTAATPT4 多核苷酸激酶缓冲液T4 多核苷酸激酶T4 DNA 连接酶缓冲液T4 DNA 连接酶乙酸钾溶液兔网织红细胞裂解物翻译试剂盒氯化

mRNA 在网织红细胞裂解液中的翻译

实验材料 家兔胰核糖核酸酶 小球菌核酸酶 I 型磷酸肌酸激酶试剂、试剂盒 乙酰苯肼溶液 A 溶液 B 灭菌重蒸水 CaCl2 EGTA 氯高铁血红素储存液 亚精胺 磷酸肌酸 氨基酸 DTT HEPES 水 KCl 乙酸镁 [35S] 甲硫氨酸.仪器、耗材 电泳装置干酪包布离心机实验步骤 一、材料与设

中国科学家完成梅花基因组研究

  2012年12月28日,由北京林业大学、深圳华大基因研究院及北京林福科源花卉有限公司等多家单位合作完成的梅花基因组研究成果在《自然• 通讯》(Nature Communication)杂志上在线发表。该研究解析了梅花相关种属的进化起源及其相关性状的分子机制,为进一步探究蔷薇科植物的进化关