过氧化氢酶的测定实验

实验方法原理H2O2:H2O2 氧化还原酶。H2O2 →O2 + H2O这个绿色的酶有四个相同的亚基组成(Mr=60 000), 每一个亚基携带一个正铁血红素 IX 基团,这个基团处于高速旋转状态,核心是一个三价的铁。铁离子的四个配位位点被卟啉结构占据,第五个位点被蛋白质的组氨酸得到。第六个位点保持自由状态,但也有可能被氰化物或者氟化物这样的阴离子占据,并阻碍酶反应。氰化物结合后会减少铁移入卟啉环平面,高速旋转状态变为低速旋转状态,同时伴随着一种很大的光谱移动(回顾请查阅 Nicholls 和 Schonbaum,1963)。过氧化氢酶是被 Sumner(1937) 最早结晶的酶之一,并且由于它髙度的结晶倾向性,晶体悬浮液是首选的储存形式。酶底物的过氧化氢会在高浓度的时候破坏酶。因此,酶实验不能发生在底物饱和的环境下,而且 Km 也不能直接被动力学分析确定。在 405 nm 处酶的吸收系数为 38×......阅读全文

过氧化氢酶的反应机制

  虽然过氧化氢酶完整的催化机制还没有完全被了解,但其催化过程被认为分为两步:  H2O2 + Fe(III)-E → H2O + O=Fe(IV)-E(.+)  H2O2 + O=Fe(IV)-E(.+) → H2O + Fe(III)-E + O2[12]  其中,“Fe()-E”表示结合在酶上

异构酶的测定实验_葡萄糖异构酶的测定实验

实验方法原理D-葡萄糖 ⇌ D-木果糖实验材料酶溶液试剂、试剂盒TES NaOHD-葡萄糖CoCl2半胱氨酸·HCl咔唑溶液硫酸仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」实验步骤与木糖异构酶基本相同,唯一不同的是在酶反应以及加完半胱氨酸后,咔唑和硫酸混合物可以放置 30 min 进行

生长分数的测定实验

实验方法原理 连续48h 标记细胞,间隔地取样用于放射自显术。 实验步骤 操作步骤 除第3步外,其余各步骤如方案 21.10,温育时间应分别为 15min、30min 和1、2、4、8、24、48h。

生长分数的测定实验

实验方法原理连续48h 标记细胞,间隔地取样用于放射自显术。实验步骤操作步骤 除第3步外,其余各步骤如方案 21.10,温育时间应分别为 15min、30min 和1、2、4、8、24、48h。

贴壁效率的测定实验

实验方法原理以低密度接种细胞,温育直至集落形成,染色与计数集落实验步骤 材料 无菌 生长液 400 ml 0.25% 粗制胰蛋白酶 10 ml Petri 培养皿,6 cm 20 个 试管或通用玻璃容器,稀释用 20 个 非无菌 血球计数板或电子计数仪 固定液:无水甲醇 100 m

α葡糖苷的测定实验

测定 α-葡糖苷酶 测量葡萄糖             实验方法原理 实验材料 α-葡糖苷酶

生长分数的测定实验

验方法原理 连续48h 标记细胞,间隔地取样用于放射自显术。实验步骤 操作步骤除第3步外,其余各步骤如方案 21.10,温育时间应分别为 15min、30min 和1、2、4、8、24、48h

COD实验样品的测定

 COD实验样品的测定1.无氯水样的测定 1)向消解管内加入1mL相应浓度氧化剂及4mL催化剂,具塞摇匀.再取2mL水样置于清洗干净的消解管中具塞充分摇匀。2)将消解管插入消解炉孔内,盖上防护罩,待温度稳定在设定值后按“开始”键,仪器自动定时消解,消解完毕后蜂鸣器报警。3)取出消解管至试管架,冷至室

贴壁效率的测定实验

实验方法原理以低密度接种细胞,温育直至集落形成,染色与计数集落实验步骤材料无菌生长液 400 ml0.25% 粗制胰蛋白酶 10 mlPetri 培养皿,6 cm 20 个试管或通用玻璃容器,稀释用 20 个非无菌血球计数板或电子计数仪固定液:无水甲醇 100 mlD-PBSA 200 ml染料:结

乙酸激酶的测定实验

基本方案             实验方法原理 ATP:乙酸磷酸转移酯(AK)乙酸+ATP→乙酰磷酸+ADP这个反应可以与丙酮酸激酶(PK)偶联,乳酸脱氢酶(LDH)反应如下:

异构酶的测定实验

暂未评分点评实验,有机会获丁当奖励 +收藏异构酶的测定实验标签:D-木糖异构酶 葡萄糖异构酶 酶学实验手册 第三章葡萄糖异构酶是应用最多的酶之一,本质上它是木糖异构酶而非葡萄糖异构酶。它从各种各样的微生物中分离得来,它在微生物体内作为木糖代谢物。半纤维素,像木聚糖或阿拉伯糖,是最丰富的自然营养物质之

尿钠的测定实验

实验方法原理 用无水乙醇沉淀尿中蛋白,获得无蛋白尿滤液,再将其与焦性锑酸钾作用生成焦性锑酸钠沉淀。最后与标准管比较求得尿钠的含量,其反应式如下:Nacl+K[Sb(OH)6]→Na[Sb(OH)6]+KCl实验材料 尿液试剂、试剂盒 无水乙醇焦性锑酸钾钠标准液氯化钠乙醇仪器、耗材 吸管架试管架离心管

异构酶的测定实验

实验方法原理 D-木糖 ⇌ D-木酮糖实验材料 酶溶液试剂、试剂盒 TES NaOHD-木糖MnSO4半胱氨酸·HCl咔唑溶液硫酸仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」20 ul 的实验混合物和 20 ul 酶溶液(各自用 20 ul TES 缓冲液作对照)混合,并在测定

核酸的定量测定实验

紫外分光光度法 地衣酚显色法 二苯胺法             实验方法原理 核酸、核苷酸及衍生物都具有共轭双键系统, 能吸收紫外光, RNA、DNA 的紫外

解链温度的实验测定

            试剂、试剂盒 变性液 中和缓冲液 寡核苷酸预杂交液 酚: 氯仿 乙酸钠 SSC 酶切双链靶 DNA 的适当的限制酶

核酸的定量测定实验

实验方法原理 核酸、核苷酸及衍生物都具有共轭双键系统, 能吸收紫外光, RNA、DNA 的紫外吸收高峰在260 nm 波长处。一般在260 nm 波长下, 每1 ml 含1 μg RNA 的溶液光吸收值为0.022 , 每1 ml 含1 μg DNA 的溶液光吸收值约为0.020 , 故测定

乙酸激酶的测定实验

实验方法原理ATP:乙酸磷酸转移酯(AK)乙酸+ATP→乙酰磷酸+ADP这个反应可以与丙酮酸激酶(PK)偶联,乳酸脱氢酶(LDH)反应如下:实验材料酶样品试剂、试剂盒三乙醇胺-HCl KOH乙酸钠ATPMgCl2磷酸烯醇式丙酮酸LDHPK仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.

叶绿素的定量测定实验

实验方法原理根据叶绿素对可见光的吸收光谱,利用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度,而后用公式计算出叶绿素含量,此法精确度高,且能在未经分离的情况下分别测出叶绿素a、b的含量。根据朗伯-比尔定律,某有色溶液的光密度D与其浓度C及液层厚度L成正比,即:D=kCL式中k为比例常数,当溶液浓度以重量百分

叶绿素的定量测定实验

实验方法原理根据叶绿素对可见光的吸收光谱,利用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度,而后用公式计算出叶绿素含量,此法精确度高,且能在未经分离的情况下分别测出叶绿素a、b的含量。根据朗伯-比尔定律,某有色溶液的光密度D与其浓度C及液层厚度L成正比,即: D=kCL 式中k为比例常数,当溶液浓度以重量

液体密度的测定实验

实验内容:1.分别用天平称其比重瓶前后的质量,计算密度,查不同室温时的液体密度。实验原理:比重瓶是用玻璃制成的容积固定的密度,为了保证瓶中的容积固定,比重瓶的瓶塞用一个中间有毛细管的磨口塞子制成。使用比重瓶时用移液管注入液体到满为止,然后用塞子塞紧,多余的液体就会通过毛细管流出来,这样就可以保证比重

叶绿素的定量测定实验

实验方法原理 根据叶绿素对可见光的吸收光谱,利用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度,而后用公式计算出叶绿素含量,此法精确度高,且能在未经分离的情况下分别测出叶绿素a、b的含量。根据朗伯-比尔定律,某有色溶液的光密度D与其浓度C及液层厚度L成正比,即:D=kCL式中k为比例常数,当溶液浓度以重量百

解链温度的测定实验

试剂、试剂盒 变性液中和缓冲液寡核苷酸预杂交液酚: 氯仿乙酸钠SSC酶切双链靶 DNA 的适当的限制酶对照 DNA靶 DNA寡核苷酸探针仪器、耗材 煮沸水浴装置交联仪器、微波炉或真空炉平头镊子玻璃试管硝酸纤维素或尼龙膜穿纸打孔器闪烁杯溫度计厚吸水纸精确控温循环水浴装置实验步骤 材料溶液和缓冲液稀释贮

解链温度的实验测定

寡核苷酸与靶序列杂交的解链温度可以用本章概述介绍的方法计算(见本章概述有关解链温度与杂交温度),也可通过实验测定双链 DNA 不可逆解离的温度(Ti) 来确定解链温度 Tm。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)上册,作者:黄培堂。试剂、试剂盒变性液中和缓冲液寡核苷酸预杂交液酚: 氯仿乙酸钠SSC酶

液体密度的测定实验

实验仪器:液体密度实验仪 型号:FMD1074实验内容:1.分别用天平称其比重瓶前后的质量,计算密度,查不同室温时的液体密度。实验原理:比重瓶是用玻璃制成的容积固定的密度,为了保证瓶中的容积固定,比重瓶的瓶塞用一个中间有毛细管的磨口塞子制成。使用比重瓶时用移液管注入液体到满为止,然后用塞子塞紧,多余

旋光度的测定实验

实验方法原理比旋光度是物质特性常数之一,测定旋光度,可以检验旋光性物质的纯度和含量。仪器、耗材葡萄糖容量瓶旋光仪实验步骤1.接通电源,5min后钠光灯发光正常,即可开始测定。2.旋光仪零点的校正:在测定样品前,需要先校正旋光仪的零点。(1)将样品管洗好,左手拿住管子把它竖立,装上蒸馏水,使液面凸出管

呼吸强度的测定实验

实验方法原理计算一定的植物材料在单位时间内放出CO2的数量,即能测知该植物材料的呼吸强度。呼吸放出的CO2可用氢氧化钡溶液吸收,再用滴定法测得之。如比较不同条件下的呼吸强度,则可得知不同条件对呼吸强度的影响。实验步骤一、材料与设备1. 植物材料:(1)干小麦种子;(2)发芽的小麦种子;(3)浸湿但未

酶活性的测定实验

酶活性的测定可应用于:(1)酶动力学的研究;(2)酶抑制的研究。实验方法原理1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量的量度,取决于指定的条件。SI单位是katal,1 katal = 1 mol /s,更实际

酶活性的测定实验

连续性检测             实验方法原理 1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量

尿钠的测定实验

比浊法             实验方法原理 用无水乙醇沉淀尿中蛋白,获得无蛋白尿滤液,再将其与焦性锑酸钾作用生成焦性锑酸钠沉淀。最后与标准管比较求得尿钠的含量,其反应式如下:NaC

呼吸强度的测定实验

  实验方法原理计算一定的植物材料在单位时间内放出CO2的数量,即能测知该植物材料的呼吸强度。呼吸放出的CO2可用氢氧化钡溶液吸收,再用滴定法测得之。如比较不同条件下的呼吸强度,则可得知不同条件对呼吸强度的影响。实验步骤一、材料与设备1. 植物材料:(1)干小麦种子;(2)发