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异构酶的测定实验

实验方法原理 D-木糖 ⇌ D-木酮糖实验材料 酶溶液试剂、试剂盒 TES NaOHD-木糖MnSO4半胱氨酸·HCl咔唑溶液硫酸仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」20 ul 的实验混合物和 20 ul 酶溶液(各自用 20 ul TES 缓冲液作对照)混合,并在测定温度(例 50℃)下紧靠反应容器放置 15 min,在用冰冷却并加入 40 ul 半胱氨酸和 40 ul 咔唑溶液的情况下酶反应会停止,加入 1.2 ml 70% 硫酸颜色开始变化,在室温下放置 10 min 后对比参照,在 546 nm 处测吸光值。注意事项 过任何时间颜色也不会达到一个恒定量,因此,每隔 10 min 必须非常仔细地观察颜色的变化,在同样的时间间隔后所有的样品都被准确读数。空白对照的吸光值应该大约是 0.2,如果吸光值接近 0.3 则测定反应物需重新配制。为了定量,需要准备木酮糖的校对曲线,木酮糖浓......阅读全文

上海药物所肝素合成过程中关键酶结构的解析研究获进展

  硫酸乙酰肝素是在细胞表面和细胞质基质中广泛存在的一种多糖,它能与一系列的生长因子、趋化因子和白介素等功能性蛋白质相互作用,进而在胚胎发育、细胞生长、炎症反应、凝血、肿瘤转移和病毒侵染等生理过程中发挥作用。葡萄糖醛酸C5异构酶则是硫酸乙酰肝素和肝素合成中的一个关键酶,它能将糖链中的葡萄糖醛酸异构为

使用重组的果蝇因子进行染色质装配实验1

实验材料重组的 NAP-1纯化的果蝇核心组蛋白重组的 ACF质粒 DNA试剂、试剂盒HEG 缓冲液KClPvOH PEG 溶液BSA 溶液MgCl2CaCl2重组的拓扑异构酶 Ⅰ 工作溶液缓冲液 R微球菌核酸酶储液EDTARNase A糖原终止缓冲液酚 氯仿 异戊醇乙醇仪器、耗材27℃ 和 30℃

异构酶的测定实验

暂未评分点评实验,有机会获丁当奖励 +收藏异构酶的测定实验标签:D-木糖异构酶 葡萄糖异构酶 酶学实验手册 第三章葡萄糖异构酶是应用最多的酶之一,本质上它是木糖异构酶而非葡萄糖异构酶。它从各种各样的微生物中分离得来,它在微生物体内作为木糖代谢物。半纤维素,像木聚糖或阿拉伯糖,是最丰富的自然

使用重组的果蝇因子进行染色质装配实验

实验方法原理 实验材料 重组的 NAP-1纯化的果蝇核心组蛋白重组的 ACF质粒 DNA试剂、试剂盒 HEG 缓冲液KClPvOH PEG 溶液BSA 溶液MgCl2CaCl2重组的拓扑异构酶 Ⅰ 工作溶液缓冲液 R微球菌核酸酶储液 EDTARNase A糖原终止缓冲液 酚 氯仿 异戊醇乙醇仪器、耗

Nature:重大发现!肠道菌群或能控制机体的运动方式!

  近日,一项刊登在国际杂志Nature上的研究报告中,来自加州理工学院的科学家们通过研究对“跟着直觉走”的含义进行了新的诠释,文章中,研究者发现,肠道菌群能够控制果蝇的运动,同时他们还鉴别出了参与整个过程的特殊神经元,相关研究结果或能阐明机体肠道和大脑之间的关联,尤其是能够阐明肠道菌群影响机体行为

细菌耐药与临床对策

近年来由于抗生素的广泛应用,细菌的耐药问题越来越严重。历史和现实的教训告诉我们:任何一种抗生素一旦问世,很快就会产生耐药株,产生耐药株的时间周期短则几年,长则十几年(表1)。目前,细菌的耐药问题已成为全球的严重问题,为此WHO专门发表了针对细菌耐药问题的专家建议(WHO/CDS/CSR/DRS/20

印度科学家合成新型化合物可杀死癌细胞

  据《印度教徒报》5月11日消息,印度化学生物研究所(IICB)和印度科学培育协会(IACS)的研究人员设计并合成大约25种喹啉衍生物,并使用乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌和结肠癌等细胞系,在体外对这些化合物抑制人的拓扑异构酶1活性和杀死癌细胞的效果进行测试,显示出强大的抗癌活性。相关研究成果3月21日发

Nature揭示自闭症潜在病因

  来自北卡罗来纳大学医学院的科学家们发现,当一组称之为拓扑异构酶(topoisomerase)的重要酶类出现问题时,会对大脑发育背后的遗传机器产生深远的影响,其有可能导致自闭症谱系障碍(ASD)。这一研究发现是人们在探求自闭症背后的环境因素研究中取得的一项重大进展,并提供了关于这一疾病遗传病因的一

小剂量抗癌药物显神效 抵御败血症及其它感染性疾病

  近日,刊登在国际著名杂志Science上的一项研究报告中,来自美国西奈山伊坎医学院(Icahn School of Medicine)的研究人员通过研究发现,小剂量的抗癌药物或可阻断机体对感染的失控免疫反应,这些感染会引发败血症,同时在美国每年会引发50万人死亡,而这种新型的药物疗法或对数百万遭

9月5日《自然》杂志精选

“普里昂”感染症的病理生理特性及与年龄相关的神经退化  人们越来越多地猜测,包括阿尔茨海默氏症和帕金森氏症在内的与年龄相关的神经退化疾病以及如“克雅氏病”等“普里昂”感染症的共同病理生理特征可能是我们了解这些病症的关键。在这篇文章中,Mathias Jucker和 Lary Walk

解析DNA拓扑异构酶核心结构揭示DNA穿链新机制

生物物理所解析DNA拓扑异构酶核心结构揭示DNA穿链新机制成果入选Faculty of 1000 BiologyGyrase B’三维结构(左)及结构域运动(右)  近日,中科院生物物理研究所王大成课题组与毕利军课题组合作在Nucleic Acids Research杂志上发表的题为

南海海洋所揭示L-别异亮氨酸的生物合成机制

  近日,中国科学院南海海洋研究所研究员鞠建华团队在J. Am. Chem. Soc.(2016, 138 (1), 408-415)发表文章首次阐述天然产物中L-allo-Ile结构单元的生物合成机制,论文被同期JACS Spotlights (2016, 138, 461) 作为研究亮点评述。该

抗肿瘤药物研究及新药筛选(一)

提  纲一、化疗药物的发展二、肿瘤的药物治疗三、抗肿瘤药物筛选及评价四、体外抗肿瘤活性试验五、体内抗肿瘤活性试验一、化疗药物的发展• 近代肿瘤化疗学始于20世纪40年代。•  50年代通过动物筛选化疗药物发现了5FU、MTX、CTX等,化疗学有了发展。•  6

昆虫病原线虫发育相关基因的鉴定

实验概要本实验构建了昆虫病原线虫全长的cDNA文库,构建的cDNA文库分别与诱导和未诱导的处理下提取的 mRNA 制备的探针进行杂交,获得差异表达的基因。主要试剂1. 酶类及分子量标准   1)  高保真酶Easy-A high fidelity c

化疗药物所致心脏毒性的研究进展

  随着肿瘤治疗方法的不断发展,肿瘤患者预后得到极大改善,与肿瘤治疗药物相关的并发症日渐凸显,成为影响患者生存的重要问题。化疗目前仍是多种肿瘤的主要治疗方法,其直接或间接地对心脏产生不同程度的损伤,即心脏毒性,所致心脏毒性的发生甚至在治疗结束后数年,限制了肿瘤患者治疗方案的选择,对患者生存及预后也有

武汉病毒所在微生物龙胆酸代谢的多样性研究方面取得进展

  近期,中科院武汉病毒研究所周宁一研究员课题组在微生物龙胆酸代谢的多样性研究上取得进展:在低G+C含量的革兰氏阳性菌类芽胞杆菌中发现了一种新型的依赖于半胱氨酸的顺丁烯二酸单酰丙酮酸异构酶;在假单胞菌中发现了编码催化顺丁烯二酸单酰丙酮酸直接水解的酶基因。相关结果分别发表在微生物学刊物

抗肿瘤药物研究及新药筛选

  提 纲   一、化疗药物的发展   二、肿瘤的药物治疗   三、抗肿瘤药物筛选及评价   四、体外抗肿瘤活性试验   五、体内抗肿瘤活性试验   一、化疗药物的发展   • 近代肿瘤化疗学始于20世纪40年代。   • 50年代通过动物筛选化疗药物发现了5FU、MTX、CTX等,

苏州大学教授Blood重点论文揭示血栓形成新机制

  整合素αIIbβ3是介导血小板聚集的最关键受体,该受体如何被负性调控而保持非活化状态,一直是血栓与止血研究领域长期悬而未决的科学难题和研究热点。  来自苏州大学唐仲英血液学研究中心武艺课题组在血液学权威杂志Blood上发表了题为“The Transmembrane Protein Disulfi

新晋院士JBC文章解析DNA复制

  7月初,台湾最高学术研究机构“中央研究院”选出第29届新院士,其中生命科学组共入选7人,包括刘扶东,郑淑珍,谢道时,吴春放,余淑美,蔡明道,魏福全。任细胞与个体生物学研究所所长的谢道时教授主要从事DNA复制,以及基因突变等方面的研究,近期其研究组发表了题为“Probing conformat

抗肿瘤药物研究及新药筛选

  提 纲   一、化疗药物的发展   二、肿瘤的药物治疗   三、抗肿瘤药物筛选及评价   四、体外抗肿瘤活性试验   五、体内抗肿瘤活性试验   一、化疗药物的发展   • 近代肿瘤化疗学始于20世纪40年代。   • 50年代通过动物筛选化疗药物发现了5FU、MTX、CTX等,

Cell Rep:科学家开发出新型联合疗法来治疗癌症

  近日,一项刊登在国际著名杂志Cell Reports上的研究论文中,来自西班牙国立癌症研究中心的研究人员通过研究揭示了药物依托泊甙如何增加其作用功效,以及同其它两种化合物联合作用干扰细胞分裂的分子机制,药物依托泊甙是常见的用于治疗肺癌、睾丸癌等癌症的药物。   依托泊甙是基于植物盾叶鬼臼提

流式细胞仪在睡眠性阵发性血红蛋白尿的诊断中的应用

一.睡眠性阵发性血红蛋白尿PNH睡眠性阵发性血红蛋白尿(PNH)是一种获得性造血干细胞异常,临床主要表现为骨髓丧失造血功能、血栓、慢性溶血性贫血急性发作。PNH的发病率很低,发病原因不详,可能与再生障碍性贫血有关系。PNH的临床表现不一,疾病进程多变,给临床的诊断治疗和疾病研究带来很多困难。最近15

酶的分类和酶的命名

   一、酶的分类  国际酶学委员会(I.E.C)规定,按酶促反应的性质,可把酶分成六大类:  1.氧化还原酶类(oxidoreductases)指催化底物进行氧化还原反应的酶类。例如,乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶等。  2.转移酶类(transferas

常见的T载体及连接方法

T载体 是TA克隆载体的简称,就是利用载体的T末端和PCR产物的A末段连接而将目的基因克隆到载体中的方法。目前市场上常见的T载体 ,根据连接方法可以分成两种:方法1、以T4连接酶进行连接的方法,这种方法的载体 有P公司、T公司,可以说这两家公司将这两种方法发挥到了很高的

武汉植物园筛选出天然拓扑异构酶抑制剂

  全球癌症发病率和死亡率上升,对公共卫生构成挑战。手术、放疗和化疗是当前治疗癌症的三种主要方法。然而,这些方法会带来副作用,且在临床病例中疗效不佳,成为亟待解决的问题。DNA拓扑异构酶(Topos)是DNA复制的关键酶,在细胞转录、重组和修复中发挥重要作用,是一些抗癌药物的靶酶,目前已有针对DNA

抗癌药物对ⅡDNA拓扑异构酶作用的实验

实验方法原理 DNA拓扑异构酶在DNA形成环状和超螺旋结构中起重要作用。另一方面在DNA超螺旋结构的松懈、DNA单、双链的断裂以至再连接的过程均有赖于该酶的参与,从而使DNA的复制或重组成为可能,关于抗癌药如烃化剂和非烃化剂,其中许多是以DNA拓扑异构酶为靶点使之形成可断裂的DNA蛋白复合物从而引起

抗癌药物对ⅡDNA拓扑异构酶作用的实验

实验方法原理DNA拓扑异构酶在DNA形成环状和超螺旋结构中起重要作用。另一方面在DNA超螺旋结构的松懈、DNA单、双链的断裂以至再连接的过程均有赖于该酶的参与,从而使DNA的复制或重组成为可能,关于抗癌药如烃化剂和非烃化剂,其中许多是以DNA拓扑异构酶为靶点使之形成可断裂的DNA蛋白复合物从而引起D

快速TA克隆的突破

快速TA克隆的突破T载体是TA克隆载体的简称,就是利用载体的T末端和PCR产物的A末段连接而将目的基因克隆到载体中的方法。目前市场上常见的T载体,根据连接方法可以分成两种:方法1、以T4连接酶进行连接的方法,这种方法的载体有promega、takara;可以说这两家公司将这两种方法发挥到了很高的水平

GSK三氮乙酰萘细菌拓扑异构酶抑制剂进入III期临床开发

  葛兰素史克(GSK)近日宣布,抗生素gepotidacin III期临床项目已启动对非复杂性尿路感染(uUTI)患者的给药治疗。  gepotidacin是一种新型抗生素,是新一类抗生素——三氮乙酰萘细菌拓扑异构酶抑制剂中的首个药物,由GSK在2007年开发,该药具有一种新颖的“双靶向”作用机制

天津工生所利用生物转化技术开发功能性稀少糖获得进展

  稀少糖(Rare Sugar)是自然界中存在但含量极少的一类单糖及其衍生物(2002年国际稀少糖学会ISRS定义),其味类似于蔗糖,但具有热量低、稳定性高、甜昧协调、无吸湿性、无致龋齿性、耐受性高等优点,可以弥补传统甜味剂的不足,对改善特殊人群的饮食起到重要作用。   稀少糖类甜