由NAD+还原反应测定的PDHC总活性实验

实验材料PDHC试剂、试剂盒磷酸钾NAD+二磷酸硫胺MgCl2丙酮酸二硫代苏糖醇辅酶 A仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品37℃ 时,在 340 nm 处吸收值发生变化。NADPH 的吸收系数 ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。展开 注意事项其他试剂:0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.60.1 mol/L NAD+(Mr=663.4,游离酸;663 mg 溶于 10 ml 水中)0.01 mol/L 二磷酸硫胺(ThDP,脱竣辅酶,Mr=460.8;46.1 mg 溶于 10 ml 水中)0.1 mol/L MgCl2(MgCl2·6H2O,Mr=203.3;203 mg 溶于 10 ml 水)0.1 mol/L 丙酮酸(丙酮酸钠,Mr=110.0;110 mg 溶于 10 ml 水中)0.1 mol/L 二硫代苏糖醇(......阅读全文

总RNA提取实验步骤

一、细胞或组织破碎 1.  微生物材料 (1)发酵3~4天(或对数生长期)的菌体,离心收集菌丝体(动植物材料无需此步处理)。 (2)用经DEPC处理的水洗菌丝体2~3次,并尽量除去残存的水。 (3)加液氮充分研磨,使其成为粉末,以释放RNA。 (4)研磨后的样品转移至12 ml 变性液的容器中匀浆。

酶活性的测定实验

连续性检测             实验方法原理 1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量

NK细胞活性测定实验

实验方法原理 用放射性核素标记靶细胞,当靶细胞受到破坏时,放射性核素被释放出来,通过测定释放或残留在未被破坏细胞内的放射性核素放射活性,即可计算和推测杀伤细胞的细胞毒活性。常用的放射性核素有51Cr、3H-Dr、125I-UdR等。本实验采用51Cr释放法检测人NK细胞活性。实验材料 靶细胞试剂、试

酶活性的测定实验

酶活性的测定可应用于:(1)酶动力学的研究;(2)酶抑制的研究。实验方法原理1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量的量度,取决于指定的条件。SI单位是katal,1 katal = 1 mol /s,更实际

丙酮酸脱氢酶复合物的临床表现

PDHC 缺陷是导致线粒体能量代谢障碍最常见的原因之一,同时也是儿童乳酸酸中毒和早发性退行性神经变性病的最常见病因。脑内乙酰辅酶A几乎都来源于丙酮酸,所以PDHC的缺乏常导致多种神经系统损害。按照Robinson等提出的标准,患者的临床表现可分为三级,Ⅰ级:病人出生后早期即患有严重的乳酸血症,PDH

简述丙酮酸脱氢酶复合物缺乏的临床表现

  PDHC 缺陷是导致线粒体能量代谢障碍最常见的原因之一,同时也是儿童乳酸酸中毒和早发性退行性神经变性病的最常见病因。脑内乙酰辅酶A几乎都来源于丙酮酸,所以PDHC的缺乏常导致多种神经系统损害。按照Robinson等提出的标准,患者的临床表现可分为三级,Ⅰ级:病人出生后早期即患有严重的乳酸血症,P

丙酮酸脱氢酶复合物的定义

PDHC由6种酶组成,其中丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase,E1,EC 1.2.4.1)、二氢硫辛酸转乙酰化酶(dihydrolipoamide transacetylase,E2,EC 2.3.1.12)和二氢硫辛酸脱氢酶(dihydrolipoamide dehydro

关于丙酮酸脱氢酶复合物的定义介绍

  PDHC由6种酶组成,其中丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase,E1,EC 1.2.4.1)、二氢硫辛酸转乙酰化酶(dihydrolipoamide transacetylase,E2,EC 2.3.1.12)和二氢硫辛酸脱氢酶(dihydrolipoamide dehyd

利用-Marligen-总-RNA-快速纯化系统纯化总-RNA-实验

            试剂、试剂盒 乙醇 β-巯基乙醇 仪器、耗材 转子-定子均化器或类似设备

利用-Marligen-总-RNA-快速纯化系统纯化总-RNA-实验

由 Marligen Biosciences 提供的 Rapid Total RNA System 可从各种样品中提取 RNA,且产量和质量非常稳定。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。 试剂、试剂盒 乙醇β-巯基乙醇 仪器、耗材 转子-定子均

利用-Marligen-总-RNA-快速纯化系统纯化总-RNA-实验

试剂、试剂盒 乙醇β-巯基乙醇 仪器、耗材 转子-定子均化器或类似设备 Marligen Rapid Total RNA System 实验步骤 一、材料 1.缓冲液、溶液和试剂 乙醇,70%和100% β-巯基乙醇 2.特殊设备 转子-定子均化器或

食品总细菌含量水平由3M菌落总数测试片来评估

  3M菌落总数测试片是在一定条件下(例如培养基,培养温度和培养时间等)对食品试样进行处理和培养后,每克(毫升)试样中形成的微生物菌落总数。它适用于所有食品,主要用于评估大多数食品的总细菌含量水平。  3M菌落总数测试片的检测方法具有操作简单,检测周期短的优点。一旦投入使用,它将大大缩短检测周期,简

植物总RNA的提取实验

研磨法             实验方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分细胞破碎, 进一步使植物细胞在裂解液中裂解, 用醋酸钠和氯仿沉淀蛋白质, 异丙醇沉淀核酸, 溶解后经氯化锂

总RNA提取实验——CsCl法

实验材料RNA试剂、试剂盒PBS异硫氰酸胍CsClDEPC无水乙醇仪器、耗材注射器电泳仪离心机培养箱实验步骤一、 用于单层培养细胞 1.  室温下用PBS冼涤细胞,每平皿用5 ml,洗2次。2.  在不超过108细胞中加入异硫氰酸胍溶液,并使之遍布整个平皿。3.  用橡皮细胞刮子擦刮平皿,回收粘稠的

植物总RNA的提取实验

实验方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分细胞破碎, 进一步使植物细胞在裂解液中裂解, 用醋酸钠和氯仿沉淀蛋白质, 异丙醇沉淀核酸, 溶解后经氯化锂沉淀总RNA, 洗涤后得到高质量的RNA。本实验旨在了解和掌握植物总RNA 的分离和纯化方法。实验材料 植物RNA试剂、试剂盒 尿素Tris-HClN

总糖含量的测定实验

苯酚-硫酸法             实验方法原理 苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸(或甲苯衍生物)起显色反应,己糖在490 nm处(戊糖及糖醛酸在480 nm)

总糖含量的测定实验

实验方法原理 苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸(或甲苯衍生物)起显色反应,己糖在490 nm处(戊糖及糖醛酸在480 nm)有最大吸收,吸收值与糖含量呈线性关系。实验材料 葡萄糖试剂、试剂盒 浓硫酸 苯酚仪器、耗材 试管 试管架 移液管 量筒 烧杯 离心管 玻璃碾磨器 离心机 分

血清总胆固醇测定实验

实验方法原理 采用异丙醇,抽提时用氧化铝吸附胆红素等于干扰物(也吸附磷脂与甘油,放此抽提液可用于化学法测TG)。离心后在上清液中加入高铁.硫酸试剂显紫红色,显色程度与TG浓度呈正比.实验步骤 一、实验试剂:1、异丙醇2、氧化铝(层析用中型氧化铝,用蒸馏水洗数次,倾去不易下沉的细颗粒,吸滤干后在110

果品总酸度的测定实验

实验方法原理水果中富含有机酸,如乙酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸等,这些有机酸可以用碱标准溶液滴定,以酚酞为指示剂。根据所消耗的碱浓度和体积,即可求出果品中的总酸度:有机酸%= CNaOH·VNaOH K/Mx×100%式中:  Mx为实际滴定的试样量(g);VNaOH为滴定果品本身所消耗的NaOH标液

血清总胆固醇测定实验

实验方法原理采用异丙醇,抽提时用氧化铝吸附胆红素等于干扰物(也吸附磷脂与甘油,放此抽提液可用于化学法测TG)。离心后在上清液中加入高铁.硫酸试剂显紫红色,显色程度与TG浓度呈正比.实验步骤一、实验试剂:1、异丙醇2、氧化铝(层析用中型氧化铝,用蒸馏水洗数次,倾去不易下沉的细颗粒,吸滤干后在110℃烘

果品总酸度的测定实验

实验方法原理 水果中富含有机酸,如乙酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸等,这些有机酸可以用碱标准溶液滴定,以酚酞为指示剂。根据所消耗的碱浓度和体积,即可求出果品中的总酸度:有机酸%= CNaOH·VNaOH K/Mx×100%式中:  Mx为实际滴定的试样量(g);VNaOH为滴定果品本身所消耗的NaOH标

NK细胞活性检测实验步骤

  细胞毒检测技术包括补体依赖细胞毒试验、NK细胞介导的细胞毒试验和特异性CTL活性检测,常用的实验技术有后两种。NK细胞(natural killer cell)是在天然免疫系统发挥主要作用的效应细胞,可直接杀伤病毒感染的靶细胞和某些肿瘤细胞。而细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymp

临床化学检查方法介绍血清总补体活性(CH50)介绍

血清总补体活性(CH50)介绍:  补体具有溶解靶细胞、促进吞噬、参与炎症反应等功能,同时补体还在免疫调节、清除免疫复合物、稳定机体内环境、参与变态反应及自身免疫性疾病起关键性作用。总补体活性和单个补体成分含量的变化,对某些疾病的诊断和疗效观察具有重要意义。总补体的测定主要反映补体经传统途径活化的活

关于血清总补体活性(CH50)的注意事项介绍

  一、抽血前的注意事项  1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。  2、体检前一天的晚八时以后,应禁食,以免影响第二天空腹血糖等指标的检测。  3、抽血时 应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。  有晕血史者请提前说明,另作特别安

确认,这项费用由由政府承担

记者26日从国家医保局获悉,针对新冠病毒核酸检测费用问题,国家医保局有关负责人表示,按照《关于做好新冠肺炎疫情常态化防控工作的指导意见》《关于加快推进新冠病毒核酸检测的实施意见》,常态化核酸检测费用由各地政府承担。目前各地均由财政部门对常态化核酸检测提供资金支持。为抗击新冠肺炎疫情,国家医保局部署各

怎样由细胞实验IC50推算动物实验用药剂量

IC50是半抑制率,意思是抑制率50%的时候药物的浓度。把药品稀释成不同的浓度,然后计算各自的抑制率,以药品的浓度为横坐标,抑制率为纵坐标作图,然后得到50%抑制率时候的药品浓度,就是IC50。要点:药品2倍稀释,多做梯度,做点线图即可!

Northern印迹和总RNA杂交实验

Northern印迹分析 杂交和放射自显影             试剂、试剂盒 甲醛凝胶溶液 RNA 电泳缓冲液

Northern印迹和总RNA杂交实验

Northern印迹分析杂交和放射自显影试剂、试剂盒甲醛凝胶溶液                                                                  RNA 电泳缓冲液                                          

Northern印迹和总RNA杂交实验

试剂、试剂盒 甲醛凝胶溶液RNA 电泳缓冲液仪器、耗材 凝胶模梳齿凝胶用具实验步骤 1. 用肥皂和水彻底清洗凝胶模,梳齿和凝胶用具。2. 准备甲醛凝胶溶液。甲醛凝胶溶液(300 ml 1% 琼脂糖凝胶):琼脂糖,3.0 g10x RNA 电泳缓冲液,30 ml     Milli-Q 或用玻璃器皿蒸

植物总RNA的提取实验技术

一、实验目的 通过本实验学习从植物组织中提取RNA的方法 二、实验原理 RNA是一类极易降解的分子,要得到完整的  RNA,必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶对RNA的降解。高浓度强变性剂异硫氰酸胍,可溶解蛋白质,破坏细胞结构,使核蛋白与核酸分离,失活RNA酶,所以RNA从细胞中释