蛋白质含量测定法凯氏定氮法
本法系依据蛋白质为含氮的有机化合物,当与硫酸和硫酸铜、硫酸钾一同加热消化时使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸液吸收后以硫酸滴定液滴定,根据酸的消耗量算出含氮量,再将含氮量乘以换算系数,即为蛋白质的含量。 本法灵敏度较低,适用于0.2~2.0mg氮的测定。氮转化成蛋白质的换算系数因蛋白质中所含氨基酸的结构差异会稍有区别。 供试品溶液的制备 照各品种项下规定的方法制备,生物制品按如下方法操作。 精密量取供试品(如供试品为冻干制剂或固体粉末时,应复溶后量取)适量,用0.9%氯化钠溶液定量稀释,制成每1ml中含氮量约1mg的溶液,精密量取1ml,作为总氮供试品溶液进行测定。非蛋白氮供试品溶液的制备,除另有规定外,照附注项下钨酸沉淀法操作,即得。 测定法 除另有规定外,按测定法(1)操作,生物制品按测定法(2)操作。 (1)本测定法适用于不含无机含氮物质及有机非蛋白质含氮物质的供试品......阅读全文
蛋白质含量测定法凯氏定氮法
本法系依据蛋白质为含氮的有机化合物,当与硫酸和硫酸铜、硫酸钾一同加热消化时使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸液吸收后以硫酸滴定液滴定,根据酸的消耗量算出含氮量,再将含氮量乘以换算系数,即为蛋白质的含量。 本法灵敏度较低,适用于0.2~2.0mg氮的测定。氮
蛋白质含量测定法福林酚法(Lowry法)
本法系依据蛋白质分子中含有的肽键在碱性溶液中与Cu2+螯合形成蛋白质-铜复合物,此复合物使酚试剂的磷钼酸还原,产生蓝色化合物,同时在碱性条件下酚试剂易被蛋白质中酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸还原呈蓝色反应。在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比,以蛋白质对照品溶液作标准曲线,采用比色法测定供试品中蛋
蛋白质含量测定法双缩脲法
本法系依据蛋白质分子中含有的两个以上肽键在碱性溶液中与Cu2+形成紫红色络合物,在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比,以蛋白质对照品溶液作标准曲线,采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。 本法快速、灵敏度低,测定范围通常可达1~10mg。本法干扰测定的物质主要有硫酸铵、三羟甲基氨基甲烷缓冲液
蛋白质含量测定法考马斯亮蓝法(Bradford法)
本法系依据在酸性溶液中考马斯亮蓝G250与蛋白质分子中的碱性氨基酸(精氨酸)和芳香族氨基酸结合形成蓝色复合物,在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比,以蛋白质对照品溶液作标准曲线,采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。 本法灵敏度高,通常可测定1~200μg的蛋白质量。本法主要的干扰物质有去污
凯氏定氮法如何测定蛋白质的含量
(一)消化 1、准备6个凯氏烧瓶,标号。1、2、3号烧瓶中分别加入适当浓度的蛋白溶液1.0mL,样品要加到烧瓶底部,切勿沾在瓶口及瓶颈上。再依次加入硫酸钾-硫酸铜接触剂0.3g,浓硫酸2.0mL,30%过氧化氢1.0mL。4、5、6号烧瓶作为空白对照,用以测定试剂中可能含有的微量含氮物质,对样品测
测定蛋白质含量只有凯氏定氮法吗
当然不是一、微量凯氏(kjeldahl)定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例,其反应式如下:nh2ch2cooh+3h2so4——2co2+3so
凯氏定氮法测蛋白质含量的误差来源
1.蛋白质附在壁上,被检样消化不完全,使氮有损失。2. 硫酸缺少,这样会形成硫酸氢钾,而不与氨作用3.氨是否完全蒸馏出来4.有时铜离子与氨作用,生成深兰色的结合物[Cu(NH3)4]2+
食品中蛋白质含量测定(凯氏定氮法,Kjeldahl-Method)
一、目的与要求1、学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理。2、掌握凯氏定氮法的操作技术,包括样品的消化处理、蒸馏、滴定及蛋白质含量计算等。二、实验原理蛋白质是含氮的化合物。食品与浓硫酸和催化剂共同加热消化,使蛋白质分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵,留在消化液中,然后加碱蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后,再用盐酸
凯氏定氮法对食品中蛋白质含量的测定
实验概要本实验用凯氏定氮法(Kjeldahl Method)测定了食品中蛋白质含量,目的学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理,掌握凯氏定氮法的操作技术,包括样品的消化处理、蒸馏、滴定及蛋白质含量计算等。实验原理蛋白质是含氮的化合物。食品与浓硫酸和催化剂共同加热消化,使蛋白质分解,产生的氨与硫酸结合生成硫酸
蛋白质含量测定法紫外可见分光光度法
本法系依据蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸,其在280nm波长处具最大吸光度,在一定范围内其吸光度大小与蛋白质浓度呈正比。 本法操作简便快速,适用于纯化蛋白质的检测,一般供试品浓度为0.2~2mg/ml。本法准确度较差,干扰物质多。测定法(2)适用于供试品溶液中存在核酸时
凯氏定氮仪可以测蛋白质含量
可以。凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收,再以标准碱滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定量
蛋白质的测定凯氏定氮法
1)原理样品与硫酸和催化剂一同加热后消化,使蛋白质分解,其中的碳和氢分别被氧化成二氧化碳和水蒸气逸出,而有机氮转化成氨后与硫酸结合生成硫酸铵,然后在碱性条件下蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再用硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即得蛋白质含量。以甘氨酸为例,该过程的反应方程式如下:消化
蛋白质含量测定法2,2联喹啉4,4二羧酸法(BCA法)
本法系依据蛋白质分子在碱性溶液中将Cu2+还原为Cu+,2,2'-联喹啉-4,4'-二羧酸(BCA)与Cu+结合形成紫色复合物,在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比,以蛋白质对照品溶液作标准曲线,采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。 本法灵敏度较高,测定范围可达80~400
凯氏定氮仪可以测蛋白质含量吗
可以。凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收,再以标准碱滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定量
凯氏定氮法测定食品中蛋白质含量
食品种类很多,食品中pro 的性质和含量各不相同,而且其他成分,如碳水化合物,脂肪和维生素的干扰成分很多,因此pro 的测定通常利用经典的凯氏定氮法将样品消化成铵盐蒸馏,用标准酸液吸收,用标准酸或碱液滴定,由样品中含氮量计算出pro 的含量。由于食品中pro含量不同又分为凯氏定氮常量法、半微量法和微
蛋白质定量检测方法——凯氏定氮法
凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定
凯氏定氮法测牛奶中蛋白质含量测定结果偏高是为什么
测定蛋白质的方法可分为两大类:一类是利用蛋白质的物理化学性质来推算,如密度、折射率、紫外吸收、荧光性等;另一类是利用化学方法来计算,如定氮、双缩脲反应、染料结合反应、酚试剂反应等主要测定方法有:双缩脲法、染料结合法、酚试剂法、紫外分光光度法、水扬酸比色法、折光法、旋光法、近红外光谱法.目前蛋白质测定
双缩脲法和凯氏定氮法测定饲料中蛋白质含量的比较...
饲料蛋白质含量的测定通常采用国标规定的凯氏定氮法, 但用双缩脲比色法测定饲料中蛋白质含量也有报道( 陈革, 2003) 。本实验对多种饲料样品采用双缩脲比色法进行蛋白质含量测定,并将结果与凯氏定氮法进行对比和分析, 为实际工作中选择合理的方法进行饲料中蛋白质含量的测定提供科学依据。1 双缩脲法原理当
凯氏定氮仪对刺槐蛋白质含量的测定
刺槐属植物,以花入药,药材名为刺槐花。刺槐花中含有丰富的蛋白质、糖、氨基酸、酶及多种微量元素。刺槐不仅广泛分布,而且是广泛使用,不仅药用,叶子花 也可以吃,现在已经成为城市的一个绿色蔬菜。通过KDN-04C凯氏定氮仪对10个不同来源刺槐进行蛋白质的含量测定,为质量评价和资源的开发和利用提供依据。蛋白
凯氏定氮仪对红枣蛋白质含量的检测
红枣一直被人们称为补血养颜的圣品,其营养价值是不可否认的。对于红枣的营养价值也是多有了解的,大枣中含有糖类、脂类、蛋白质、有机酸、Vc,VB,,VB2,从、VA、芦丁和36种微量元素等50多种化学成分。大枣中除含有大量的糖、蛋白质等营养成分外.还含有人体所需要的18种氨基酸,其中包括成人体内不能
全自动凯氏定氮仪检测大米蛋白质含量
食品中蛋白质含量高低是评价食物营养成份的主要指标之一。稻米是人类重要的粮食作物,稻米蛋白质因其较为合理的蛋白及氨基酸组成而表现出优良的营养品质,蛋白质含量不仅影响其营养品质,而且也对蒸煮品质有重要影响。蛋白质是生物体中含量最高,功能最重要的生物大分子,细胞和生物体在完成由基因编码的生命活动过程中
凯氏定氮仪测定若羌红枣中蛋白质含量
红枣具有极高的营养价值和医疗保健作用,而新疆若羌红枣享誉盛名。使用凯氏定氮仪测定若羌红枣中蛋白质含量,可以为红枣进一步深加工提供有利的依据。 若羌红枣中蛋白质含量的测定使用凯氏定氮仪进行,根据中华人民共和国国家标准GB/T 5009.5-2003方法测定。凯氏定氮仪测得若羌红枣中粗蛋白
凯氏定氮仪测定牛奶中蛋白质的含量
凯氏定氮仪测定牛奶中蛋白质的含量 凯氏定氮仪通过程序化设计和新获得蒸汽发生器实现改变蒸馏时间和蒸汽流量。根据分析样品的不同,可选择快或慢的蒸馏速度。凯氏定氮仪具有良好的自我保护装置,不关闭防护门,仪器不启动,安全可靠,不会对人员造成任何伤害。凯氏定氮仪含四个RS232接口,可同时接电脑、打印机、键
全自动凯氏定氮仪测定鱼蛋白质含量
蛋白质中含有一定比例的氮元素,氮元素含量与蛋白质的含量存在一定的转换关系,即氮换算蛋白质的系数。凯氏定氮法首先测定样品中氮的质量,再乘以F值即为样品中的蛋白质质量。全自动凯氏定氮仪是对氮进行测定的重要仪器,也是目前最为推荐的产品。研究人员普遍引用肉及肉制品的F值(6.25)来计算其蛋白质含量。但作者
蛋白质的测定方法之凯氏定氮法
一 凯氏定氮法这种方法是1883年Kjeldahl发明,当时凯氏只使用H2SO4来分解试样,来定量谷物中的pro,他只知用H2SO4分解试样,而不能阐明H2SO4分解有机氮化合物生成氨的反应历程,所以只使用H2SO4分解试样,需要较长时间,后来由Gunning加入改进,他改进的办法是在消化时加入K
蛋白质测定仪法与凯氏定氮法的对比
采用凯氏定氮法检测蛋白质,此法由人工操作,比较费时,检测结果的准确性容易受人为因素影响,现国际上普遍采用蛋白质测定仪检测蛋白质。同凯氏法相比蛋白质测定仪具有自动、省时、准确的优点。凯氏定氮法与蛋白质测定仪法的原理一样,不同在处在于前者使用经典凯氏定氮烧瓶及定氮蒸馏装置进行样品消化和蒸馏,手工滴定计算
Bradford法蛋白质含量的测定
原理:这一方法基于考马斯亮蓝G-250 有红蓝两种不同的形式。在一定浓度的乙醇及酸性条件下,可配成淡红色的溶液,当与蛋白质结合后,产生蓝色化合物,反应迅速而稳定。反应化合物在 465-595nm处有最大的光吸收值,化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系,因此可检测595nm的光吸收值的大
蛋白质含量测定实验——Bradford法
蛋白质含量测定实验可以用于:(1)测定蛋白质浓度;(2)检测所提取的蛋白质含量。实验材料蛋白质试剂、试剂盒牛血清NaCl考马斯亮蓝仪器、耗材分光光度计离心机实验步骤1. 分别在两组微量离心管中各加入0.5 mg/ml 牛血清白蛋白,以 0.15 mmol/l NaCl补足至100 ul,同时以两管
紫外吸收法测蛋白质含量
蛋白质分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm 处,其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外,蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下,蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系,可以进行蛋白质含量的
喷气燃料防冰剂含量测定法--折光计法
本标准适用于测定喷气燃料防冰剂含量。包括三种方法,均可用于测定乙二醇甲醚全馏分(T1301)、乙二醇乙.醚全馏分(T1302)、乙二醇单甲醚(T1303)、乙二醇单乙.醚(T1304)四种防冰剂的含量。测定范围为0.05~0.25%(体积)。 测定时,均先用水抽提燃料中的防冰剂,然后,方法