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实验方法原理 实验材料 含 32P 标记的蛋白质的样品试剂、试剂盒 荧光墨水／染料碳酸氢铵2-巯基乙醇SDS载体蛋白（溶于去离子水中）三氯乙酸（TCA）乙醇过氧化氢甲酸TPCK-处理的胰蛋白酶（溶于去离子水／ HCl ）电泳缓冲液绿色标记染料层析缓冲液仪器、耗材 单边剃刀刀片／手术刀片闪烁计数器1.7 ml 微量离心管一次性的组织研磨件摇床台式离心机纤维素薄层色谱板小体积可调移液器由韧性塑料制成的一次性长吸头带滤器的空气管HTLE 7000 电泳装置聚乙烯膜 电泳芯子层析缸风扇65℃ 烘箱实验步骤 实验试剂仪器的具体要求和准备见「其他」。1. 用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分离含有 32P 标记的蛋白质样品。2. 电泳后，干胶，四周边缘用荧光墨水标记，对 X 射线胶片曝光（放射自显影）。3. 通过与胶片上的凝胶四周荧光标记的位置的比对确定蛋白质的位置。将胶片与干胶钉在一起，胶片朝下放入一个光盒里。......阅读全文
基本方案 备择方案 固相蛋白消化 辅助方案 从纤维平板上 实验方法原理实验材料 含 32P 标
实验方法原理 实验材料 含 32P 标记的蛋白质的样品试剂、试剂盒 荧光墨水／染料碳酸氢铵2-巯基乙醇SDS载体蛋白（溶于去离子水中）三氯乙酸（TCA）乙醇过氧化氢甲酸TPCK-处理的胰蛋白酶（溶于去离子水／ HCl ）电泳缓冲液绿色标记染料层析缓冲液仪器、耗材 单边剃刀刀片／手术刀片闪
实验材料含 32P 标记的蛋白质的样品试剂、试剂盒荧光墨水／染料碳酸氢铵2-巯基乙醇SDS载体蛋白（溶于去离子水中）三氯乙酸（TCA）乙醇过氧化氢甲酸TPCK-处理的胰蛋白酶（溶于去离子水／ HCl ）电泳缓冲液绿色标记染料层析缓冲液仪器、耗材单边剃刀刀片／手术刀片闪烁计数器1.7 ml 微量离心管
试剂、试剂盒甲醇PVP-360（溶于乙酸）50 mmol L 碳酸氢铵pH 8.0仪器、耗材PVDF 膜／硝酸纤维素膜保鲜膜／聚酯薄膜实验步骤1. 用 SDS-PAGE 凝胶电泳分离 32P 标记的样品，用标准的湿式或半干式蛋白质转移方法将蛋白质转移到 PVDF 或硝酸纤维素膜上。2. 将
验材料烧结的聚乙烯片TLC 平板（已分离过磷酸肽并经过放射自显影的）试剂、试剂盒电泳缓冲液仪器、耗材玻璃棒1000 μl（蓝色）移液器吸头单边剃刀刀片实验步骤实验材料、试剂、仪器耗材详见「其他」。1. 用锋利的刀片小心地切去蓝色吸头领圈的部分，细的吸口端也裁去约 3 mm。2. 用玻璃棒将一烧结的聚
胰蛋白酶切蛋白质样品的制备 双向薄层电泳与层析分离多肽片段 反向高效液相层析绘制多肽图谱 实
胰蛋白酶切蛋白质样品的制备双向薄层电泳与层析分离多肽片段反向高效液相层析绘制多肽图谱实验材料蛋白质 &n
实验材料胰蛋白酶试剂、试剂盒磷酸钾N'-苯甲酰-L-精氨酰对硝基苯胺仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」25℃，在 405 nm 测定吸光值，ε405＝9620 l/（mol·cm）。注意事项其他试剂：0.3 mol/L 磷酸钾，pH 8.020 mool/L N
基本方案 实验方法原理 实验材料
实验方法原理 实验材料 胰蛋白酶试剂、试剂盒 磷酸钾N'-苯甲酰-L-精氨酰对硝基苯胺仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」25℃，在 405 nm 测定吸光值，ε405＝9620 l/（mol·cm）。注意事项 其他 试剂：0.3 mol/L 磷酸钾，pH 8.02