延胡索酸酶的测定实验
实验方法原理L-苹果酸 ⇌ 延胡索酸+H2O实验材料酶样品试剂、试剂盒磷酸钾L-苹果酸溶液磷酸钾血清白蛋白仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 0.05 mol/L L-苹果酸溶液0.02 ml 延胡索酸溶液(用 0.1% 血清白蛋白稀释)25℃ 时 240 nm 处的吸收值升高,ε240=2440 l/(mol·cm)。注意事项其他试剂:0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.50.05 mol/L L-苹果酸溶液(L-苹果酸,Mr=134.1;悬浮 134 mg 在 10 ml 水中)0.1 mol/L 磷酸钾 pH 7.5 中,用 3.5 ml 1 mol/L NaOH 中和并用 0.1 mol/L 1 磷酸钾 pH 7.5 加至 20 ml0.1% 血清白蛋白(质量浓度)溶于 0.1 mol/L 磷酸钾 pH 7.5 中展开......阅读全文
醛缩酶的测定实验
实验方法原理 D-果糖-1,6-二磷酸 ⇌ 二羟基丙磷酸盐+3-磷酸-D-甘油醛D-甘油醛-3-磷酸以酰肼的形式,腙在 240 nm 处有吸收光。实验材料 醛缩酶试剂、试剂盒 肼硫酸盐FDP-Na3H仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.9 ml 测定混合物0.1 ml
蛋白酶的测定实验
实验方法原理 血红蛋白不是很贵,被用来做这个实验。由于处于天然结构的蛋白质通常可以抵制蛋白酶的攻击,因此首先用尿素使血红蛋白失活。分离非水解蛋白质后,利用 Folin-Ciocaheau 试剂的上清液测量消化产物。这种试剂优先识别色氨酸和酪氨酸,但是也可以识别半胱氨酸和组氨酸。'实验温度
磷酸酶-a-的测定实验
实验方法原理4-α-D-葡聚糖:正磷酸-α-D-葡萄糖基转移酶。酶断裂多糖的α-1,4-糖苷键:(葡萄糖)n+Pi →(葡萄糖)n-1+葡萄糖-1-P实验中反应与葡萄糖磷酸变位酶偶联:葡萄糖-1-P → 葡萄糖-6-P并且 6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化:葡萄糖-6-P+NADP+ → 葡萄糖酸-6-P+
异构酶的测定实验_D木糖异构酶测定
实验方法原理D-木糖 ⇌ D-木酮糖实验材料酶溶液试剂、试剂盒TES NaOHD-木糖MnSO4半胱氨酸·HCl咔唑溶液硫酸仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」20 ul 的实验混合物和 20 ul 酶溶液(各自用 20 ul TES 缓冲液作对照)混合,并在测定温度(例 50
酶测定法实验
在本单元中,用一种较简单的方法测定它对核心 RNA 聚合酶自非特异性模板 poly(dAT) 起始转录的刺激作用。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液
酶测定法实验
试剂、试剂盒 核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液DEAE-纤维素(DE81) 纸片P04 清洗缓冲液乙醇反应液仪器、耗材 水浴锅实验步骤 材料与设备核心 RNA 聚合酶 (2.3 mg/ml)纯σ32 标准品 (
酶测定法实验
酶测定法实验 试剂、试剂盒 核心 RNA 聚合酶 纯σ32 标准品 纯化的 σ32 样品
血糖测定实验——酶法
实验方法原理血糖中β-D葡萄糖在葡萄糖氧化酶催化下,氧化成葡萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶催化下,氧化氧的受体——邻联甲苯胺产生有色化合物。在有足够的葡萄糖氧化酶和过氧化物酶存在下,形成有色化合物的量和葡萄糖的量成正比,并在625 nm处有最大吸收。实验材料葡萄糖试剂、试剂盒邻联甲苯胺
丙酮酸激酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 PK,ATP:丙酮酸磷酸转移酶。有其他激酶的伴随,这个反应的直接实验:例如,可以应用 P32 标记。由分光光度测定出,这个反应与 LD
丙酮酸激酶的测定实验
实验方法原理PK,ATP:丙酮酸磷酸转移酶。有其他激酶的伴随,这个反应的直接实验:例如,可以应用 P32 标记。由分光光度测定出,这个反应与 LDH 反应偶联,继续 NADH 的氧化反应:实验材料酶样品试剂、试剂盒三乙醇胺-HCl KOHKClMgCl2磷酸烯醇式丙酮酸ADPNADHLDH仪器、耗材
丙酮酸激酶的测定实验
实验方法原理 PK,ATP:丙酮酸磷酸转移酶。有其他激酶的伴随,这个反应的直接实验:例如,可以应用 P32 标记。由分光光度测定出,这个反应与 LDH 反应偶联,继续 NADH 的氧化反应:实验材料 酶样品试剂、试剂盒 三乙醇胺-HCl KOHKClMgCl2磷酸烯醇式丙酮酸ADPNADHLDH仪器
延胡索的介绍
延胡索(CorydalisyanhusuoW.T.WangexZ.Y.SuetC.Y.Wu),又名:延胡、玄胡索、元胡索、元胡等。是罂粟科、紫堇属多年生草本植物,块茎球形,花瓣紫红色;蒴果圆柱形,两端渐狭。夏季开花。块茎为著名的常用中药,含20多种生物碱,用于行气止痛、活血散瘀、跌打损伤等。
延胡索—齿瓣延胡索的化学成分
含 延胡索甲素、乙素、丙素、丁素, 四氢小檗碱、 棕榈酸、 豆甾醇、 油酸、 亚油酸、亚油烯酸、皂甙等。 齿瓣延胡索块茎含 小檗碱(berberine),左旋 紫堇碱(corydaline), 原阿片碱(protopine),α -别隐品碱(α-al-locryptopine),四氢 黄连碱(
α酮戊二酸脱氢酶的测定
实验方法原理 实验材料 α-酮戊二酸脱氢酶试剂、试剂盒 磷酸钾MgCl2α-酮戊二酸焦磷酸硫胺素K3[Fe(CN)6]牛血清蛋白仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品 30℃ 时,于 436 nm 处吸收值发生变化,ε436=7
植酸酶植酸酶的酶学性质
和其他酶类一样,植酸酶活力受温度、环境pH、激活剂、抑制剂、作用时间、底物及产物浓度等多种因素的影响。根据最适pH值的不同,Oh等(2004)将植酸酶(磷酸酯酶)分为两个亚类:酸性植酸酶和碱性植酸酶。饲料工业中常用的是酸性植酸酶(也称作组氨酸酸性植酸酶)。这种植酸酶催化活性较强,有最适的酸性pH值(
氨基酸序列测定实验
基本方案 测定通过 SDS-PAGE 转移到 PVDF 膜上样品的氨基酸序列 辅助方案 准备SDS-PAGE蛋白质样品 实验方法原理
氨基酸序列测定实验
实验方法原理 实验材料 分离胶和积层胶溶液还原型谷胱甘肽干粉试剂、试剂盒 4 × 凝胶缓冲液10 × 下槽缓冲液10 × 上槽缓冲液甲醇转移缓冲液0.1%(V/V)考马斯亮蓝的 50%甲醇溶液10%(V/V)乙酸的 50%甲醇溶液仪器、耗材 微量注射器或凝胶加样吸头PVDF 膜小型电转装置自动蛋白质
异构酶的测定实验_葡萄糖异构酶微板测定
实验材料酶溶液试剂、试剂盒TES NaOHD-葡萄糖间苯二酚FeNH4(SO4)2·12H2O仪器、耗材微孔板读数仪实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」测定步骤与木糖苷基本相同,唯一不同的是在 490 nm 处测定吸光值。注意事项其他试剂:0.2 mol/L TES/NaOH,pH 8.0[N-t
异柠檬酸脱氢酶测定
实验方法原理 异柠檬酸脱氢酶(NADP+),异柠檬酸:NADP+ 氧化还原酶(脱羧)。D-异柠檬酸 + NADP+ → CO2 + 2-酮戊二酸 + NADPH + H+这里所描述的实验步骤用 NADP,可以用 NAD 来代替,也可以用异柠檬酸脱氢酶(NAD +),异柠檬酸:NAD + 氧化还原酶(
胃蛋白酶的测定实验
实验材料胃蛋白酶试剂、试剂盒血红蛋白三氯乙酸HCl仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」1.样品和对照组的处理:5 min,37℃2. 离心 5 min3. 记录 280 nm 吸收值4. 计算展开 注意事项其他试剂:2% 血红蛋白(在 100 ml 水中溶解 2.5 g 牛血红
胆碱酯酶的测定实验
pH 稳定计法 显色法 实验方法原理 实验材料 胆碱酯酶
胰蛋白酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 胰蛋白酶
胰蛋白酶的测定实验
实验材料胰蛋白酶试剂、试剂盒磷酸钾N'-苯甲酰-L-精氨酰对硝基苯胺仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」25℃,在 405 nm 测定吸光值,ε405=9620 l/(mol·cm)。注意事项其他试剂:0.3 mol/L 磷酸钾,pH 8.020 mool/L N
尿酸氧化酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 尿酸:氧 氧化还原酶,尿酸氧化酶,铜蛋白。尿酸+2 H2O+O2 → 尿囊素+H2O2+CO2
尿酸氧化酶的测定实验
实验方法原理尿酸:氧 氧化还原酶,尿酸氧化酶,铜蛋白。尿酸+2 H2O+O2 → 尿囊素+H2O2+CO2实验材料酶样品试剂、试剂盒硼酸钠尿酸仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品随后在 25℃ 时,295 nm 处吸收值变化。ε2
淀粉酶活性的测定实验
实验方法原理:α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐热,在高温下易钝化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化,通常提取液同时有两种淀粉酶存在,测定时,可根据它们的特性分别加以处理,钝化其中之一,即可测出另一酶的活性。将提取液加热到70℃维持15分钟以钝化β-淀粉酶,便可测
胃蛋白酶的测定实验
实验方法原理 实验材料 胃蛋白酶试剂、试剂盒 血红蛋白三氯乙酸HCl仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」1.样品和对照组的处理:5 min,37℃2. 离心 5 min3. 记录 280 nm 吸收值4. 计算注意事项 其他 试剂:2% 血红蛋白(在 100 ml 水中溶解
胃蛋白酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 胃蛋白酶
淀粉酶活性的测定实验
实验方法原理α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐热,在高温下易钝化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化,通常提取液同时有两种淀粉酶存在,测定时,可根据它们的特性分别加以处理,钝化其中之一,即可测出另一酶的活性。将提取液加热到70℃维持15分钟以钝化β-淀粉酶,便可测定
乙醇脱氢酶的测定实验
还原反应测定 氧化反应测定 实验方法原理 ADH 反应:乙醛 + NADPH + H+ ⇌ 乙醇 + NAD+此反应是可逆的,并且可以从两个位点检测