兔膀胱平滑肌细胞培养实验——酶分离法

兔膀胱平滑肌细胞培养可以:(1)分离得到高纯度兔膀胱平滑肌细胞;(2)进行细胞学鉴定研究;(3)用于细胞学其他研究。实验方法原理运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下观察细胞形态及生长状况,同时进行细胞爬片H-E染色和透射电镜等形态学观察分析,并应用免疫荧光染色平滑肌特有的α-肌动蛋白进行细胞学鉴定分析。最后根据细胞计数绘制细胞生长曲线和增殖曲线。实验材料雄性新西兰白兔试剂、试剂盒DMEMⅡ型胶原酶α-平滑肌肌动蛋白抗体胎牛血清胰蛋白酶D-Hanks’液仪器、耗材饭盒眼科直剪眼科弯剪眼科直镊眼科弯镊玻璃培养皿广口瓶烧杯锥形瓶离心管磁力搅拌器搅拌子目尼龙筛网针式滤器实验步骤一、实验方法1. 膀胱平滑肌细胞酶法分离(1)肌注盐酸氯胺酮200 mg 及氟哌利多5 mg 麻醉,待兔进入麻醉状态后消毒,下腹正中切口,迅速切取......阅读全文

简述膀胱平滑肌恶性肿瘤的临床表现

  1.肉眼血尿和排尿困难 血尿多为肉眼血尿,排尿困难呈进行性加重。随膀胱容量的减少出现尿频。   2.体检 腹部触及表面不光滑、质硬、无压痛、界限不清、活动度差的实质性肿物。

关于膀胱平滑肌恶性肿瘤的发病机制介绍

  肿瘤可发生在膀胱内任何部位,但以膀胱顶部和侧壁及输尿管开口周围常见,也有发生在膀胱憩室内的报道。肿瘤位于膀胱壁可突向腔内或壁外,肉眼所见肉瘤为黏膜下结节性或溃疡性肿块。瘤体大小可达10余厘米,肿瘤切面呈鱼肉状,色灰白或灰红,质韧,常见局灶性的出血或坏死。

简述膀胱平滑肌恶性肿瘤的临床表现

  平滑肌肉瘤(LMS)是一种由平滑肌细胞或平滑肌分化间细胞所构成的恶性肿瘤。起源于泌尿生殖系统的肉瘤少见。  其中成年人的平滑肌肉瘤为多,而小儿以横纹肌肉瘤最为常见,至今发生于输尿管、膀胱、尿道的平滑肌肉瘤文献上都有报道,其中以膀胱平滑肌恶性肿瘤报道最多,其次是发生于尿道,其来源可能是泌尿道平滑肌

关于膀胱平滑肌恶性肿瘤的鉴别诊断介绍

  膀胱结石  血尿、排尿不畅,下腹部不适与膀胱肿瘤类似。膀胱区平片是诊断膀胱结石的主要方法,90%病例可显示结石阴影。阴性结石可通过膀胱造影、B型超声、CT检查作出诊断。膀胱镜检查可直接观察到结石的大小和形态。同时可显示结石是否合并肿瘤,怀疑时可取活组织检查明确诊断。  输尿管囊肿  输尿管囊肿感

神经胶质细胞培养实验_酶消化法

神经胶质细胞培养可以:(1)获得神经胶质细胞;(2)用于神经胶质细胞电生理特性,如膜电位、去极化等;(3)用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子,并能分泌多种神

神经胶质细胞培养实验_酶消化法

神经胶质细胞培养可以:(1)获得神经胶质细胞;(2)用于神经胶质细胞电生理特性,如膜电位、去极化等;(3)用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子,并能分泌多种神

组织的分离实验_胰蛋白酶消化消化分离法

实验方法原理胰蛋白酶适于消化细胞间质较小的软组织,如胚胎组织、羊膜、上皮组织、肝、肾等软组织,对传代细胞也非常好。用于消化纤维性组织或较硬的癌组织则较差。Ca2+和Mg2+对胰蛋白酶的活性有一定抑制作用,故需用不含这些离子的BSS 配制。血清有抑制胰蛋白酶活性的作用,因此在做细胞传代时,用胰蛋白酶消

实验中常用分离法介绍

蒸馏、升华、结晶、沉淀、溶剂萃取、离子交换、色谱分离、离心分离、电渗析、电化学分离方法、盐析。

正常大鼠原代主动脉平滑肌细胞培养

一、实验试剂 1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液

兔和狗的灌胃实验

实验材料家兔狗仪器、耗材扩口器导尿管实验步骤猴、狗、猫、兔 灌胃时,先将动物固定,用特制的扩口器放入动物口中,并用绳将它固定于嘴部。将带有弹性的橡皮导管(如导尿管),经扩口器上的小圆孔插入,沿咽后壁而进入食管。此时应检查导管是否插入食管,可将导管外口置于一盛水的烧杯中,如不发生气泡,即认为此导管是在

兔和狗的灌胃实验

实验材料 家兔狗仪器、耗材 扩口器导尿管猴、狗、猫、兔 灌胃时,先将动物固定,用特制的扩口器放入动物口中,并用绳将它固定于嘴部。将带有弹性的橡皮导管(如导尿管),经扩口器上的小圆孔插入,沿咽后壁而进入食管。此时应检查导管是否插入食管,可将导管外口置于一盛水的烧杯中,如不发生气泡,即认为此导管

兔的外形及解剖实验

实验方法原理1.  通过对家兔外形及解剖结构观察,掌握哺乳动物主要特征; 2.   认识总结哺乳类骨骼系统适应于陆生的进步性特征。实验材料标本仪器、耗材解剖器放大镜实验步骤本实验应首先观察兔的整架骨骼标本,区分其中轴骨骼、带骨及四肢骨骼,了解其基本组成和大致的部位。然后再仔细辨认各部分的主要骨骼,并

兔瘦素(leptin)酶联免疫分析

兔瘦素(leptin)酶联免疫分析检测范围:使用目的:本试剂盒用于测定兔血清、血浆及相关液体样本中瘦素(leptin)含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔瘦素(leptin)。用纯化的兔瘦素(leptin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入瘦素( leptin)

大鼠星型胶质细胞培养实验——酶消化法

大鼠星型胶质细胞培养可以:(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;(3)脑损伤和脑疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。实验方法原理大鼠星形胶质细胞原代培养后,作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定,应用缺氧D-Hanks'液及缺

关于膀胱平滑肌恶性肿瘤的流行病学介绍

  膀胱平滑肌恶性肿瘤罕见,约占膀胱恶性肿瘤的0.5%,膀胱平滑肌恶性肿瘤是成人平滑肌肉瘤最常见的病理类型。1875年Gusenbauer报道了首例膀胱平滑肌恶性肿瘤,以后陆续有零星的个案或数例报道。1989年Mills等报道15例是最大的一组病例报道,截止到2000年底国外有150多例报道。199

兔的外形及解剖实验(一)

实验方法原理 1.  通过对家兔外形及解剖结构观察,掌握哺乳动物主要特征; 2.   认识总结哺乳类骨骼系统适应于陆生的进步性特征。实验材料 标本仪器、耗材 解剖器放大镜实验步骤 本实验应首先观察兔的整架骨骼标本,区分其中轴骨骼、带骨及四肢骨骼,了解其基本组成和大致的部位。然后再仔细辨认各部分的主要

兔的外形及解剖实验(二)

三、消化系统 处死实验动物:将兔置于解剖盘内或实验室的地面上,在耳缘静脉处插入针头,注射进10mL空气,几分钟内兔即可死亡。注意从耳缘静脉的远端开始注射。也可以用乙醚熏或断颈法处死活兔。 解剖:取断颈处死的兔,仰置于解剖盘中。用线绳固定四肢,用棉花蘸清水润湿腹部正中线的毛,然后自生殖器开口稍前方处,

胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法

胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法有贴块法(explant)和酶解离法(enzyme disperse)。下面一起来看下这两种方法。1、贴块法方法:动物经颈动脉放血后,在无菌操作下迅速取出胸腹主动脉段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3次,将凝块洗干净后剥除外膜的纤维脂肪层,然后纵行切开血

SH30370.03胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法

Hyclone标准胎牛血清FBS SH30370.03胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法有贴块法(explant)和酶解离法(enzyme disperse)。下面一起来看下这两种方法。1、贴块法方法:动物经颈动脉放血后,在无菌操作下迅速取出胸腹主动脉段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3

兔出血症病毒(RHDV)酶联免疫分析

兔出血症病毒(RHDV)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。                                                                     96T使用目的:本试剂盒用于测定兔血清、血浆及相关液体样本中出血症病毒(RHDV)表达。

大鼠星型胶质细胞培养实验——胰酶消化法

实验材料SD大鼠试剂、试剂盒苯巴比妥解剖液胰蛋白酶DnaseDM培养液仪器、耗材离心管培养箱手术器材实验步骤一、 取14.5d SD大鼠一只。二、 苯巴比妥0.5 ml 腹腔注射,待麻醉后置于手术台上,酒精棉球消毒皮肤,开腹取出子宫(约12-14个),放入解剖液中,剖开子宫,取出胚胎,放入解剖液中,

神经胶质细胞培养实验_胰蛋白酶消化法

实验材料大鼠试剂、试剂盒CMF-Hanks液胰蛋白酶DMEM F12仪器、耗材水浴锅培养箱实验步骤一、原代培养1.  选用生后1周的新生大白鼠,用碘酒,酒精棉球消毒,断头取其大脑皮层组织。 2.  解剖显微镜下,剥离脑膜,切除大脑髓质部分。 3.  将大脑皮质在无Ca2+、Mg2+Hanks液(CM

大鼠乳鼠成骨细胞培养实验_酶消化法

大鼠乳鼠成骨细胞培养培养用于:(1)获得大鼠乳鼠成骨细胞;(2)骨修复的细胞学机制研究。实验方法原理取材于出生2~3 d 小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养,采用胶原酶消化法分离成骨细胞,并进行细胞接种与传代。采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞是一种可靠、简便、快速的细胞原代分离培养

特殊细胞培养实验_球体细胞培养实验

实验方法原理大多数培养细胞都具有贴附在底物上生长成单层细胞的性质,如细胞长成片之后,让细胞片与底物脱离,更换到使细胞不易贴附的底物上继续生长时,则细胞片能卷聚成球体形,成为球体培养。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1.  琼脂铺底的培养瓶30 ml无菌培养瓶,每

青皮的药理作用

  祛痰平喘作用  本品所含挥发油有祛痰作用,其有效成分为柠檬烯。麻醉猫静脉注射自青皮甲醇浸膏中分得的对羟福林草酸盐lmg/kg,可完全对抗组胺引起的支气管收缩,作用持续约l小时。对豚鼠离体气管也有较强的松弛作用和对抗组胺收缩气管的作用,但持续时间均较短。  对平滑肌的作用  青皮注射液能降低离体豚

平滑肌形态学观察实验

实验步骤1. 染色:HE2. 肉眼观察:标本呈圆形,中间不规则的腔隙是肠腔,周围的组织为肠壁外层染成红色的是平滑肌。3. 低倍镜观察:平滑肌组织染色较其附近的结缔组织红。平滑肌组织较厚,可分为两层且排列方向不同,内层的为纵切面,平滑肌纤维呈长梭形,外层为横切面,较薄,平滑肌纤维呈大小不一圆点形。4.

平滑肌形态学观察实验

实验步骤                                                         1. 染色:HE2. 肉眼观察:标本呈圆形,中间不规则的腔隙是肠腔,周围的组织为肠壁外层染成红色的是平滑肌。3. 低倍镜观察:平滑肌组织染色较其附近的结缔组织红。平滑肌

细胞培养实验——悬浮细胞培养

实验材料冻存 HeLa S3 细胞试剂、试剂盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶/EDTA仪器、耗材旋转瓶完全培养基-525 cm2 组织培养瓶C02 培养箱Sorvall H-6000A 转子100 ml 或 200 ml 通气旋转瓶和带滤膜的瓶盖实验步骤1. 将含有冻存 HeLa S3 细胞的安

如何巧妙利用血清培养细胞

在细胞培养实验室中,血清是常见的科研试剂之一,常见的血清种属有人的和动物两种,而动物的又分为牛、猪、鸡、羊等,根据客户对产品种属与来源的选择,价格也是不同的。对于实验新手来说,稍有不慎就会影响到实验结果,甚至让花费几千元买来的血清失去效果。那么我们要如何正确的使用与操作呢?今天上海文韧与您探讨“如何

细胞培养实验

贴壁细胞培养 悬浮细胞培养             实验方法原理 实验材料 冻存细胞