放射自显影原位杂交玻片的复染和压片固定实验
实验方法原理 实验材料 水化并显影的原位杂交玻片试剂、试剂盒 吉姆萨染色液(Fisher)710 mmol L磷酸钠缓冲液pH 6.8 (500 mmol L原液按1:50稀释)50%、70%、95% 和100% 乙醇、二甲苯封片介质为Permount (Fisher)或 Gelvatol (现称 Airvol来自Air Productsand Chemicals)仪器、耗材 玻璃染色盘13个平头镊Whatman 3 MM 滤纸条42℃温箱实验步骤 1) 将显影的玻片置于玻片架上,浸入盛有水的染色盘中。2) 在染色盘中,准备以下各组液体:1个盘:用pH 6.8 10 mmol/L磷酸钠缓冲液配制的25倍稀释的吉姆萨染液;3个盘:水。脱水系列溶液(可重复使用):3个盘:分别盛50%、70%和95%乙醇;2个盘:盛有100%乙醇;3个盘:盛有二甲苯。3) 在25倍稀释的吉姆萨染液中染玻片20 s (依染色时间决定染色的强......阅读全文
放射自显影原位杂交玻片的复染和压片固定实验
姆萨 (Giemsa) 染色 苏木精/伊红染色 甲苯胺蓝染色 实验方法原理 实验材料
放射自显影原位杂交玻片的复染和压片固定实验
实验方法原理 实验材料 水化并显影的原位杂交玻片试剂、试剂盒 吉姆萨染色液(Fisher)710 mmol L磷酸钠缓冲液pH 6.8 (500 mmol L原液按1:50稀释)50%、70%、95% 和100% 乙醇、二甲苯封片介质为Permount (Fisher)或 Gelvatol
放射自显影原位杂交玻片的压片固定实验_姆萨-染色
实验材料水化并显影的原位杂交玻片试剂、试剂盒吉姆萨染色液(Fisher)710 mmol L磷酸钠缓冲液pH 6.8 (500 mmol L原液按1:50稀释)50%、70%、95% 和100% 乙醇、二甲苯封片介质为Permount (Fisher)或 Gelvatol (现称 Airvol来自A
放射自显影原位杂交玻片的压片固定实验_甲苯胺蓝染色
实验材料水化并显影的原位杂交玻片试剂、试剂盒甲苯胺蓝染液仪器、耗材染色盘实验步骤1) 用水稀释甲苯胺蓝染液。按所期望染色程度,凭经验决定稀释度,由1:100稀释 起始。2) 玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡,然后在水中浸泡数次。按需求进行压片固定。
放射自显影原位杂交玻片的压片固定_苏木精/伊红染色
实验材料水化并显影的原位杂交玻片试剂、试剂盒苏木精染料(用乙酸处理的Harris改进苏木精 无汞)0. 1%氢氧化铵伊红染料仪器、耗材玻璃染色盘实验步骤1) 将显影过的载玻片(在玻片架中)放入盛有水的染色盘中。2) 在染色盘中准备以下各组液体:1个盘: 苏木精染液2个盘: 水1个盘: 0.1%氢氧化
使用载玻片的压片法和装片法的介绍
1、压片法是将生物材料置于载玻片和盖片之间,施加一定压力,将组织细胞压散的一种制片方法。 2、装片法是将生物材料采取整体封固制成玻片标本的方法,用此法可制成临时或永久性装片。 装片材料有:微小生物如衣藻、水绵、变形虫、线虫;水螅,植物的叶表皮;昆虫的翅、足、口器,人的口腔上皮细胞等。 装片
原位杂交中的放射自显影技术
实验方法原理 将同位素标记探针与固定于显微镜载玻片上的细胞进行杂交,然后通过放射自显影将杂交位点显影。 实验材料 糖原 琼脂糖
原位杂交组织化学实验技术3
(四)杂交后处理(post hybridisation treatment) 杂交后处理包括系列不同浓度,不同温度的盐溶液的漂洗。在原位杂交组织化学的实验程序中,这也是一个重要的环节 。特别因为大多数的原位杂交实验是在低严格度条件下进行的,非特异性的探针片段粘附在组织切片上,从而增强了背景染色。R
方案27.8-原位杂交中的放射自显影技术
实验方法原理 将同位素标记探针与固定于显微镜载玻片上的细胞进行杂交,然后通过放射自显影将杂交位点显影。 实验材料 糖原 琼脂糖
方案27.8-原位杂交中的放射自显影技术
实验方法原理将同位素标记探针与固定于显微镜载玻片上的细胞进行杂交,然后通过放射自显影将杂交位点显影。实验材料糖原琼脂糖二硫苏糖醇二硫苏糖醇试剂、试剂盒焦碳酸二乙酯DEPC-水酚-氯仿-异戊醇乙酸钠无水乙醇层析柱流动相缓冲液苯酚氯仿-界戊醇闪烁液组织洗涤液NaCl-DEPCEDTA蛋白酶K缓冲液蛋白酶
载玻片和盖玻片的使用和保存
载玻片是一直泡75%酒精,用的时候才拿出来晾干或者烧干酒精就用,不会有什么灰尘。盖玻片是一次性的,用完就扔了。
载玻片和盖玻片的使用和保存
载玻片是一直泡75%酒精,用的时候才拿出来晾干或者烧干酒精就用,不会有什么灰尘。盖玻片是一次性的,用完就扔了。
吉姆萨染色实验
实验材料 原位杂交玻片试剂、试剂盒 吉姆萨染色液磷酸钠缓冲液乙醇二甲苯仪器、耗材 染色盘培养箱滤纸实验步骤 1. 将显影的玻片置于玻片架上,浸入盛有水的染色盘中。(1)1个盘:pH6.8 10 mmol/l 磷酸钠缓冲液,所配的25倍稀释的吉姆萨染液。(2)3个盘:水。(3)脱水系列溶液:①3个盘
荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基...(一)
荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基因片段实验实验材料 核苷酸试剂、试剂盒 冰水8-羟基喹啉秋水仙素固定剂酶解缓冲液仪器、耗材 载玻片玻璃盖玻片解剖针及镊子实验步骤 原位杂交的基本操作方法(图 14 .2 ) 演化自 Southern 杂交:标底是玻片上的染色体和细胞核,探针是带标记的待测
盖玻片和载玻片的功能差异
载玻片在下边,是要观察的物质的盛放载体,我们要把东西放你它上面。盖玻片是要放在被观察物质的上面,与下面的载玻片形成保护,防止上面的空气中的物质污染被观察物质,是盖在上面的。两者的物质组成物根本差别,只是根据谁先被固定在载物架上谁就是载玻片,剩下盖着的是盖玻片。盖玻片比载玻片要小,载玻片主要用来盛放观
杂交信号的放大实验——地高辛标记探针的信号
实验材料杂交信号试剂、试剂盒地高辛SSCBSA荧光素仪器、耗材加湿盒水浴锅培养箱实验步骤1. 用地高辛标记的探针与切片杂交并洗片(见“荧光原位杂交实验”基本方案步骤1~6)。 2. 加50 μl 10 μg/ml 的羊抗地高辛抗体Fab片段于玻片上,盖以22 mm2 大小的Parafilm 膜,
cRNA探针在原位杂交组织化学
Angerer及其同事们首先应用RNA探针于原位杂交(见Cox et al 1984),核酸探针为单链的RNA分子,产生自具有质粒逆转录系统的cDNA克隆(图20-2)。由于它是单链的,不像双链的DNA探针,在溶液中不会再退火(reanneal),因此,较大百分比的探针可参与杂交反应,较cDNA探针
Northern印迹和总RNA杂交实验——杂交和放射自显影
实验材料mRNA试剂、试剂盒甲酰胺SSPEDenhardt 试剂SDS仪器、耗材滤膜实验步骤1. 滤膜进行 1~2 小时预杂交。在 42℃:50% 甲酰胺5x SSPE2 x Denhardt 试剂0.1% SDS或者在 68℃:6x SSC2x Denhardt 试剂0.1% SDS2. 把已变性
荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基因片段...
实验材料核苷酸 试剂、试剂盒冰水 8-羟基喹啉
荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合转基因片段实验
实验材料核苷酸试剂、试剂盒冰水8-羟基喹啉秋水仙素固定剂酶解缓冲液仪器、耗材载玻片玻璃盖玻片解剖针及镊子实验步骤原位杂交的基本操作方法(图 14 .2 ) 演化自 Southern 杂交:标底是玻片上的染色体和细胞核,探针是带标记的待测 DNA 序列 [ 本书中即是转基因和对照,图 14.3(a)
植物根尖压片实验
实验方法原理 有丝分裂是植物细胞分裂,体细胞增殖的主要方式,在有丝分裂过程中,细胞核内染色体准确地复制,并有规律地,均匀地分配到两个子细胞中,使子细胞和母细胞具有同样数目和形态结构的染色体,保证了植物细胞的遗传性状的一致。各种生长旺盛的植物组织中,如根尖组织,茎尖组织,居间分生组织,愈伤组织等,细胞
植物根尖压片实验
实验方法原理有丝分裂是植物细胞分裂,体细胞增殖的主要方式,在有丝分裂过程中,细胞核内染色体准确地复制,并有规律地,均匀地分配到两个子细胞中,使子细胞和母细胞具有同样数目和形态结构的染色体,保证了植物细胞的遗传性状的一致。各种生长旺盛的植物组织中,如根尖组织,茎尖组织,居间分生组织,愈伤组织等,细胞常
玻片凝集实验的方法
人类ABO 血型鉴定试验(玻片法)1.原理人类ABO血型抗原有A和B两种。A型红细胞膜上有A抗原,B型红细胞上有B抗原,AB型有A和B两种抗原,而O型则不含有A和B抗原。据此,如分别将抗A和抗B血清与待测红细胞混合,抗A和/或抗B血清与红细胞表面上的相应抗原结合而引起红细胞凝集,根据其凝集状况便可判
杂交和放射自显影
固定于滤膜上的RNA的预杂交、杂胶及淋洗等条件,与DNA杂交的相应条件基本相同。现简述如下1)用下列两种溶液之一进行预杂交,时间1-2小时。若于42℃进行,应采用。50%甲酰胺5xSSPE2xDenhardt试剂0.1%SDS若于68℃进行,应采用:6xSSC2xDenhardt试剂0.1%SDS
一种适于大鼠牙周膜I型胶原mRNA原位杂交的方法
实验概要本实验方法是选用大鼠为对象建立动物模型,采用地高辛标记的寡核苷酸探针的原位杂交。实验步骤1. 标本制备 选用80只体重为250±20g的雄性Wistar成年大鼠,给大鼠注射过量麻药后,左心室用4%多聚甲醛灌注。解剖出下颌骨,仅保留磨牙区骨段,浸泡于4%多聚甲醛中再固定6小时。将标本移入脱钙液
细胞固定切片和包埋实验
经验交流(0)实验材料猫 部分显露肌梭 试剂、试剂盒二甲砷酸钠缓冲液
细胞固定切片和包埋实验
哺乳动物肌梭的初级终末—使 用 1 um 连续切片的光学显微镜研究实验 实验材料 猫 部分显露肌梭
细胞固定切片和包埋实验
哺乳动物肌梭的初级终末—使 用 1 um 连续切片的光学显微镜研究实验实验材料猫 部分显露肌梭试剂、试剂盒二甲砷酸钠缓冲液戊二醛四氧化锇乙醇环氧乙烷甲苯胺蓝派罗宁仪器、耗材玻片实验步骤一、固定将取出的肌肉置于含 5% 戊二醛的 0.1mol/l 二甲砷酸钠缓冲液内,PH 值为 7.2, 原位固定 5
荧光原位杂交实验步骤
荧光原位杂交实验步骤1)探针变性将探针在75oC恒温水浴中温育5min,立即置0oC,5~10min,使双链DNA探针变性。2)标本变性①将制备好的染色体玻片标本于50oC培养箱中烤片2~3h。(经Giemsa染色的标本需预先在固定液中退色后再烤片)。 ②取出玻片标本,将其浸在70~75
原位杂交实验仪的用途和特点
产品用途: 原位杂交仪采用微处理技术结合PID控制方式,实现12张玻片的变性和杂交过程。密封式上盖和加湿部件确保杂交环境更加理想,集成了变性/杂交,杂交,多步运行三种操作模式,适用于多种原位杂交实验。 产品特点: 1.支持断电恢复功能,运行过程中出现意外断电,在电力恢复后可按原定程序自动恢