酿酒酵母培养基制备实验—检测酵母中β半乳糖苷酶活性

试剂、试剂盒酵母氮碱基葡萄糖SC-Ura 或 SC-Trp 或 SC-Len 或 SC-His 的混合物蒸馏水琼脂仪器、耗材磁力搅拌器锥形瓶实验步骤1. 在 1 L 的螺旋盖瓶或锥形瓶中将下面的成分溶于水中,置于搅拌器上混匀。酵母氮碱基 4.0 g,葡萄糖 12.0 g,SC-Ura 或 SC-Trp 或 SC-Len 或 SC-His 的混合物 0.4 g,蒸馏水 565.0 ml,琼脂 10.0 g。2. 将培养基高压灭菌并冷却到 55℃。3. 小心加入 35 ml 灭菌的 1.0 mol/L pH 为 7.0 的磷酸钾缓冲液,在磁力搅拌器上充分混匀,避免产生气泡。4. 加 1.0 ml 60 mg/ml 用 DMF 溶解的 X-gal,充分混匀,倒入培养皿中铺板。展开......阅读全文

酵母菌RNA制备实验

实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 TES酸性酚氯仿乙酸钠乙醇仪器、耗材 离心管离心机摇床实验步骤 1.  酵母细胞在10 ml 培养基中生长至指数中期(OD600=1.0)。 2.  将培养液转移到50 ml,离心管,于4℃,1 500 g 离心3 min。 3.  弃上清,菌体沉淀用1 ml 冰冷的水

酵母蔗糖酶的制备实验

研磨法             实验方法原理 蔗糖酶( inver tase ) (β-D-呋喃果糖苷果糖水解酶) ( fructofuranosidefructohydrol

酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验

转化材料的制备 高效转化法 转化含有质粒的菌株 快速简便的转化法             实验材料 DNA

酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验

转化材料的制备 高效转化法 转化含有质粒的菌株 快速简便的转化法             实验材料 DNA

酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验

实验材料 DNA试剂、试剂盒 TE 缓冲液双蒸水仪器、耗材 磁力搅拌器玻璃烧杯实验步骤 一、单链载体 DNA 的制备1. 在 100 ml 灭菌 TE 缓冲液中溶解 200 mg 高分子量 DNA,置于磁力搅拌器上剧烈搅拌 2~3 个小时以混匀。2. 将载体 DNA 溶液分装成 9 个 10 ml

酿酒酵母的功能物质的介绍

  酿酒酵母菌含丰富的蛋白质、维生素、矿物质、多糖和许多生物活性物质,有许多完整的酶系,并含有2.5%-10%的核糖核酸(ribose nucleic acid,RNA)。  酿酒酵母细胞壁含有丰富的β-1,3-葡聚糖和甘露寡糖(mannan oligosaccharide,MOS),其含量可达到细

关于酿酒酵母的筛选的介绍

  酿酒酵母的无性繁殖方式筛选。对液体培养基培养48h的酵母菌株,在16×40倍显微镜镜检,筛选出以多端出芽繁殖的菌株。  WL琼脂培养基筛选酿酒酵母。将分离出来的酵母菌株,接种液体培养基活化24h后接种到WL琼脂培养基,27℃培养Sd后观察,筛选出菌落颜色为奶油色(浅黄色)至绿色,表面为球形突起,

关于酿酒酵母的分类的介绍

  酵母属狭义酿酒酵母组( Saccharomyces sensu stricto),包括7个紧密相关的种:酿酒酵母(Sac. cerevisiae)、奇异酵母(Sae. paradoxus)、贝酵母(Sac. bayanus)、巴斯德酵母(Sae. pastorianus)、里约酵母(Sac. c

酿酒酵母的生长条件介绍

  酿酒酵母在自然界中分布较广,属兼性厌氧微生物。繁殖时需要大量的氧气,而酒精发酵时就不需要氧气。 [14]  酿酒酵母的生长速率明显受到环境变化的影响,其中温度和pH值是主要的两个方面。温度是一种几乎可以影响细胞内所有生物化学进程的因素。高温可使一些蛋白、DNA、RNA变性,并且会影响细胞生物膜的

酿酒酵母的序列特征的简介

  遗传信息分布在16个染色体中。其中有大约1/3的编码基因被认为是“孤儿”基因,也就是说,这些基因没有已知功能,这是因为这些基因的转录产物与酿酒酵母成其他生物所赋子功能的基因缺乏重要的同源性。这一数据仍在不断的体改中。  此染色体是由高、低G-C含量DNA结构域交替组成的,这和基因密度在染色体中的

酵母菌DNA制备实验1

实验材料酵母试剂、试剂盒YPD破菌缓冲液酚氯仿异戊醇LB仪器、耗材玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤1.  注盛于一个13 mm×100 mm 无菌玻璃试管中的2 ml 培养基接种含有带目的基因的质粒的酵母单菌落,在转动或摇动培养箱中30℃过夜培养到静止期。 2.  将1.5 ml 的过夜培养物转移

酵母提取物的制备实验

实验方法原理酵母细胞的裂解方法有很多种,包括自溶、压力破碎(如French加压罐)、研磨(玻璃珠振荡)和酶裂解(如Zymolase)等。本方案讨论的振荡玻璃珠研磨,是最简便的方法之一。这对于小体积(如<1mL的)和数升体积都很有效。经相差显微镜检测,细胞破碎率一般>95%。实验材料新鲜培养的酵母细胞

酵母菌DNA制备实验2

实验材料酵母试剂、试剂盒TERNA酶乙酸铵无水乙醇仪器、耗材离心机培养箱玻璃培养管实验步骤1.  在18 mm×150 mm 无菌玻璃培养管或17 mm×100 mm 无菌聚丙烯酰胺管中用10 ml YPD培养基过夜培养酵母菌至静止期。2.  培养物室温下在台式离心机上1 200 g 离心5 min

酵母原生质体制备实验

原生质体由原生质分化形成,具体包括细胞膜和膜内细胞质及其他具有生命活性的细胞器。植物和动物的如细胞核、线粒体和高尔基体等,而细菌如核糖体、拟核等。实验材料酵母试剂、试剂盒YPD酵母消解缓冲液山梨醇抽提缓冲液贮存缓冲液液氮仪器、耗材摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤1.  将酵母菌接种于YPD培养基(

酵母提取物的制备实验

实验方法原理 酵母细胞的裂解方法有很多种,包括自溶、压力破碎(如French加压罐)、研磨(玻璃珠振荡)和酶裂解(如Zymolase)等。本方案讨论的振荡玻璃珠研磨,是最简便的方法之一。这对于小体积(如<1mL的)和数升体积都很有效。经相差显微镜检测,细胞破碎率一般>95%。实验材料 新鲜培养的酵母

酵母提取物的制备实验

基本方案             实验方法原理 酵母细胞的裂解方法有很多种,包括自溶、压力破碎(如French加压罐)、研磨(玻璃珠振荡)和酶裂解(如Zymolase)等。本方案讨论

酿酒酵母的电穿孔转化法实验_材料的准备

实验材料高分子量 DNA试剂、试剂盒TE 缓冲液仪器、耗材微量离心管实验步骤一、单链载体 DNA 的制备1. 在 100 ml TE 缓冲液中溶解 1 g 高分子量 DNA,用磁力搅拌器于 4℃ 搅拌过夜。2. 用大直径探头以最大功率超声处理 30 秒;应将探头在溶液中持续移动,以保证超声处理的均一

酿酒酵母的电穿孔转化法实验_材料的准备

实验材料高分子量 DNA试剂、试剂盒TE 缓冲液仪器、耗材微量离心管实验步骤一、单链载体 DNA 的制备1. 在 100 ml TE 缓冲液中溶解 1 g 高分子量 DNA,用磁力搅拌器于 4℃ 搅拌过夜。2. 用大直径探头以最大功率超声处理 30 秒;应将探头在溶液中持续移动,以保证超声处理的均一

酵母DNA微量制备

实验概要本实验介绍了分别从40ml和5ml酵母培养液中制备酵母DNA的操作流程。实验步骤1. 酵母DNA微量制备(40ml)   1) 在125ml三角瓶中用40ml YPD培养液在30℃条件下培养细胞达最大生长量(过夜)。   2) 将上述培养物移入螺盖离心管,用医用离心机或Sorvall SS-

酿酒(芽殖)酵母和非洲粟酒裂殖酵母细胞的培养

实验概要本实验主要进行了了酿酒(芽殖)酵母和非洲粟酒裂殖酵母的培养,目的是掌握酵母细胞的培养方法及学会使用相差和微分干涉显微镜。实验原理酿酒(芽殖)酵母的培养在许多方面可以与大肠杆菌相比较。这种酵母可以用标准的微生物学技术在液体和固体培养基中进行培养。大多数酵母菌株在复合液体培养基中的倍增时间为90

抗酿酒酵母抗体(ASCA)测定的介绍

  抗酿酒酵母抗体(ASCA)测定是消化系统自身免疫性疾病中炎症性肠病、克罗恩病的辅助诊断指标。

PNAS:利用酿酒酵母研究帕金森氏病

  面包的一种普通成分——酿酒酵母,可让科学家们更加深入地了解可能参与诸如帕金森病和癌症之类疾病的基本过程。   在2014年3月31日著名期刊《PNAS》发表的一项最新研究中,来自德国、英国和葡萄牙的学者组成的研究小组,详述了一个最新进展——首次描述了细胞发育过程中与这些破坏性疾病发病相关的一个

关于酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)表达系统的介绍

  酿酒酵母(Saecharomycescerevisiae)在酿酒业和面包业的使用已有数千年的历史,被认为是GRAS(generally recognized as safe)生物,不产生毒素,已被美国FDA确认为安全性生物,但酿酒酵母难于高密度培养,分泌效率低,几乎不分泌分子量大于30 kD的外

酿酒酵母在饲料工业上的应用

  酿酒酵母非活性形式和细胞组分,可以作为酵母有机微量元素、功能性蛋白原料、免疫增强剂、霉菌毒素吸附剂、抑菌促生长剂使用。酿酒酵母通过对金属元素的细胞外富集、细胞表面吸附或络合、细胞内富集和转化,可以将金属无机形式转化为有机形式,已实现酵母铬、酵母硒、酵母铁、酵母锰、酵母铜的开发。作为有机微量元素,

概述酿酒酵母的基因组序列

  1996年6月,在国际互联网的公共数据库中公布了酿酒酵母的完整基因组顺序,它被称为遗传学上的里程碑。因为首先,这是人们第一次获得真核生物基因组的完整核苷酸序列;其次,这是人们第一次获得一种易于操作的实验生物系统的完整基因组。 [10]  在酿酒酵母测序计划开始之前,人们通过传统的遗传学方法已确定

酿酒酵母在生物科研上的应用

  因酿酒酵母与同为真核生物的动物和植物细胞具有很多相同的结构,又容易培养,酵母被用作研究真核生物的模式生物。自1996年以来,酿酒酵母作为真核模式生物已经完成了全基因组测序、转录组分析、蛋白质相互作用网络图以及代谢功能图谱等工作。在众多的模式生物中,对酿酒酵母的研究最为深入,且最为广泛地被运用到各

非洲粟酒裂殖酵母的培养基实验——PM基本培养基的制备

试剂、试剂盒维生素矿物质盐类储存液实验步骤1. 将下述试剂用水溶解,制备高浓度的维生素、矿物质和盐类储存液,调整终体积到 1 L,过滤除菌。2. 将下述组分溶解于 800 ml 水中以制备 PM,按要求加入维生素、矿物质、盐溶液,用 NaOH 调节 pH 到 5.6,定容到 1 L,高压灭菌。展开

酵母感受态细胞制备实验

化学法 试剂盒制备法             实验方法原理 感受态是受体最容易接受外源DNA片段并实现转化的一种生理状态,用对应化学物质处理细胞后,细胞逐渐形成感受态细胞并

酵母菌RNA制备实验—poly(A)+法

实验材料酵母菌试剂、试剂盒酚氯仿异戊醇仪器、耗材玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤一、热酸酚方案(基本方案1)1.  TES及酸酚溶液的体积增加到4 ml。2.  操作时使用50 ml 聚丙烯离心管。3.  将得到大约10 mg RNA。 二、玻璃珠方案(备择方案1)1.  将体积增加到15 ml

酵母蔗糖酶的制备实验——研磨法

蔗糖酶( inver tase ) (β-D-呋喃果糖苷果糖水解酶) ( fructofuranoside fructohydrolase ) ( EC. 3 . 2 . 1 . 26 ) 特异地催化非还原糖中的α-呋喃果糖苷键水解, 具有相对专一性。不仅能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖, 也能催化棉