酵母蔗糖酶的制备实验——研磨法
蔗糖酶( inver tase ) (β-D-呋喃果糖苷果糖水解酶) ( fructofuranoside fructohydrolase ) ( EC. 3 . 2 . 1 . 26 ) 特异地催化非还原糖中的α-呋喃果糖苷键水解, 具有相对专一性。不仅能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖, 也能催化棉子糖水解, 生成密二糖和果糖。本实验旨在提取啤酒酵母中的蔗糖酶。实验方法原理蔗糖酶( inver tase ) (β-D-呋喃果糖苷果糖水解酶) ( fructofuranosidefructohydrolase ) ( EC. 3 . 2 . 1 . 26 ) 特异地催化非还原糖中的α-呋喃果糖苷键水解, 具有相对专一性。不仅能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖, 也能催化棉子糖水解, 生成密二糖和果糖。 啤酒酵母中含有大量的蔗糖酶, 通过研磨破细胞壁, 使酶游离出来, 用水萃取酶, 然后用有机溶剂沉淀酶蛋白得到粗制品,还可用柱......阅读全文
酵母蔗糖酶的制备实验——研磨法
蔗糖酶( inver tase ) (β-D-呋喃果糖苷果糖水解酶) ( fructofuranoside fructohydrolase ) ( EC. 3 . 2 . 1 . 26 ) 特异地催化非还原糖中的α-呋喃果糖苷键水解, 具有相对专一性。不仅能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖, 也能催化棉
酵母蔗糖酶的制备实验
研磨法 实验方法原理 蔗糖酶( inver tase ) (β-D-呋喃果糖苷果糖水解酶) ( fructofuranosidefructohydrol
高通量组织研磨仪的酵母制备过程
酵母是单细胞真菌，它可以将糖发酵成酒精和二氧化碳，常被人们作为发酵剂，可用于酿造生产。为了研究酵母的品质和安全性，实验人员也会开展各种检测实验，但在此之前，实验人员会对酵母进行研磨，以便提取其中的DNA/RNA，以条形酵母为例，它是将酵母通过小孔注入到装有液体氮的气罐中压缩制成的，其研磨过
酵母菌RNA制备实验—poly（A）+法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒酚氯仿异戊醇仪器、耗材玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤一、热酸酚方案（基本方案1）1. TES及酸酚溶液的体积增加到4 ml。2. 操作时使用50 ml 聚丙烯离心管。3. 将得到大约10 mg RNA。 二、玻璃珠方案（备择方案1）1. 将体积增加到15 ml
快速制备酵母DNA法
实验概要本实验制备了酵母转化质粒，快速从转化酵母菌中分离了用于Southern分析的基因组DNA。主要试剂2％ Triton X－100，1％SDS，100mmol/L NaCl，10mmol/L Tris-HCl(pH8)，1mmol/L Na2EDTA，苯酚：氯仿：已戊醇（25：24：1），YP
酵母菌RNA制备实验—玻璃珠法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒酚氯仿异戊醇仪器、耗材玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤1. 培养并收集酵母菌细胞，冷冻细胞沉淀。2. 用300 μl RNA缓冲液中重悬细胞沉淀。 3. 加1体积冷的酸洗玻璃珠（体积与约200 μl 水相等）、300 μl 的用RNA缓冲液平衡的25：24 ：1酚/
酵母感受态细胞制备实验——试剂盒制备法
实验方法原理酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理，高效快速制备酿酒酵母化学感受态细胞，用于长期冻存以备后续转化的产品。实验材料酵母菌试剂、试剂盒YPD培养基酵母化学感受态细胞制备试剂盒仪器、耗材离心管冰箱冷冻管保温冰盒实验步骤一、挑取酵母受体菌的新鲜的单菌落（4℃放置不超过3周的也可以），接
新鲜实体组织样本的制备（机械法）——研磨法
实验方法原理机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆，再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液；采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块，所以常与其他方法配合使用。实验材料组织试剂、试剂盒生理盐水仪器、耗材研磨器尼龙网实
酵母提取物的制备实验
实验方法原理酵母细胞的裂解方法有很多种，包括自溶、压力破碎（如French加压罐）、研磨（玻璃珠振荡）和酶裂解（如Zymolase)等。本方案讨论的振荡玻璃珠研磨，是最简便的方法之一。这对于小体积（如＜1mL的）和数升体积都很有效。经相差显微镜检测，细胞破碎率一般＞95%。实验材料新鲜培养的酵母细胞
酵母提取物的制备实验
实验方法原理 酵母细胞的裂解方法有很多种，包括自溶、压力破碎（如French加压罐）、研磨（玻璃珠振荡）和酶裂解（如Zymolase)等。本方案讨论的振荡玻璃珠研磨，是最简便的方法之一。这对于小体积（如＜1mL的）和数升体积都很有效。经相差显微镜检测，细胞破碎率一般＞95%。实验材料 新鲜培养的酵母
酵母提取物的制备实验
基本方案 实验方法原理 酵母细胞的裂解方法有很多种，包括自溶、压力破碎（如French加压罐）、研磨（玻璃珠振荡）和酶裂解（如Zymolase)等。本方案讨论
酵母菌RNA制备实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 TES酸性酚氯仿乙酸钠乙醇仪器、耗材 离心管离心机摇床实验步骤 1. 酵母细胞在10 ml 培养基中生长至指数中期（OD600=1.0）。 2. 将培养液转移到50 ml，离心管，于4℃，1 500 g 离心3 min。 3. 弃上清，菌体沉淀用1 ml 冰冷的水
酿酒酵母的LiAc/ssDNA/PEG高效转化法实验_转化材料的制备
实验材料DNA试剂、试剂盒TE 缓冲液双蒸水仪器、耗材磁力搅拌器玻璃烧杯实验步骤一、单链载体 DNA 的制备1. 在 100 ml 灭菌 TE 缓冲液中溶解 200 mg 高分子量 DNA，置于磁力搅拌器上剧烈搅拌 2~3 个小时以混匀。2. 将载体 DNA 溶液分装成 9 个 10 ml 和 10
酿酒酵母培养基的制备实验
YPAD培养基的制备 SC培养基 SC选择培养基混合物的制备 用于检测酵母中β-半乳糖苷酶活性的培养 用于筛选针对URA3表型的培养基
酿酒酵母培养基的制备实验
试剂、试剂盒 酵母提取物蛋白胨葡萄糖偏硫酸腺嘌呤琼脂水仪器、耗材 锥形瓶实验步骤 1. 在 1 L 的带螺旋盖的瓶中或锥形瓶中将下面的成分溶于 500 ml 水中，置于振荡器上。酵母提取物 6.0 g，蛋白胨 12.0 g，葡萄糖 12.0 g，偏硫酸腺嘌呤 60.0 mg，琼脂 10.0 g，加水
酿酒酵母培养基的制备实验
YPAD培养基的制备 SC培养基 SC选择培养基混合物的制备 用于检测酵母中β-半乳糖苷酶活性的培养 用于筛选针对URA3表型的培养基
酵母菌DNA制备实验2
实验材料酵母试剂、试剂盒TERNA酶乙酸铵无水乙醇仪器、耗材离心机培养箱玻璃培养管实验步骤1. 在18 mm×150 mm 无菌玻璃培养管或17 mm×100 mm 无菌聚丙烯酰胺管中用10 ml YPD培养基过夜培养酵母菌至静止期。2. 培养物室温下在台式离心机上1 200 g 离心5 min
酵母原生质体制备实验
原生质体由原生质分化形成，具体包括细胞膜和膜内细胞质及其他具有生命活性的细胞器。植物和动物的如细胞核、线粒体和高尔基体等，而细菌如核糖体、拟核等。实验材料酵母试剂、试剂盒YPD酵母消解缓冲液山梨醇抽提缓冲液贮存缓冲液液氮仪器、耗材摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤1. 将酵母菌接种于YPD培养基（
酵母菌DNA制备实验1
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD破菌缓冲液酚氯仿异戊醇LB仪器、耗材玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤1. 注盛于一个13 mm×100 mm 无菌玻璃试管中的2 ml 培养基接种含有带目的基因的质粒的酵母单菌落，在转动或摇动培养箱中30℃过夜培养到静止期。 2. 将1.5 ml 的过夜培养物转移
酵母基因组DNA的玻珠制备法
实验概要本实验利用玻珠制备法制备了酵母基因组DNA。主要试剂无菌水，裂解缓冲液，5mol/L NaCl，苯酚，氯仿：已戊醇(24：1)，乙醇，TE缓冲液，EDTA-Sark，蛋白酶K，5mol/L醋酸铵主要设备摇床，玻璃离心管，台式离心机，玻珠，振荡器，P-1000移液器，1.5ml离心管实验步骤1
酵母感受态细胞制备实验
化学法 试剂盒制备法 实验方法原理 感受态是受体最容易接受外源DNA片段并实现转化的一种生理状态，用对应化学物质处理细胞后，细胞逐渐形成感受态细胞并
植物总RNA的提取实验_研磨法
在液氮中研磨植物材料, 使部分细胞破碎, 进一步使植物细胞在裂解液中裂解, 用醋酸钠和氯仿沉淀蛋白质, 异丙醇沉淀核酸, 溶解后经氯化锂沉淀总RNA, 洗涤后得到高质量的RNA。本实验旨在了解和掌握植物总RNA 的分离和纯化方法。实验方法原理在液氮中研磨植物材料, 使部分细胞破碎, 进一步使植物细胞
植物RNA提取实验——直接研磨法
植物RNA提取可应用于：（1）进行植物分子生物学方面的研究；（2）进行Northern杂交分析、纯化mRNA以用于体外翻译或cNDA文库构建等研究。实验方法原理通过裂解液β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，植物RNA助提剂PLANTaid帮助结合多糖多酚并通过离心去除，然后用乙醇调节结合条件
植物RNA提取实验——液氮研磨法
实验方法原理独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，植物RNA助提剂PLANTaid帮助结合多糖多酚并通过离心去除，然后用乙醇调节结合条件后，RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后
人工海藻糖酶多肽片段的合成和重组海藻糖酶的制备
国外采用标准9-甲氧羰基荧光素固相合成法合成氨基酸残基序列291-307肽段(SKDVEIADT[~PEGDREA)。用反相高效液相色谱法（HPLC）分析并提纯多肽。HPLC主要是根据分子的亲水性（反相）和电荷（离子交换）方面的差别来实现样品的分离的。反相HPLC的优点是分辨率大。利用分子生物学方法
离子研磨仪的截面研磨法
截面研磨法是在样品和离子枪之间安装一个遮挡板，使样品局部突出遮挡板边缘，然后用离子束照射样品。沿遮挡板边缘溅射突出边缘的部分，由此可获得切割均匀的截面。使样品突出遮挡板数十微米至100微米，并以±15～40°旋转样品杆，以防产生离子研磨痕迹（细条纹）。截面研磨普遍适用于块状样品和多层结构等机械研
酵母蛋白质和－RNA－的制备（稀碱法）
实验概要本实验介绍了从酵母中分离制备蛋白质和 RNA 的原理和方法。实验原理酵母细胞富含蛋白质和核酸。用稀碱液（0.2% 的氢氧化钠）处理酵母使细胞裂解，离心收集上清液，得到酵母核蛋白抽提液。用盐酸调节抽提液 pH 至 3.0 （核蛋白的等电点），核蛋白溶解度下降大量沉出，离心收集沉淀物为酵母蛋白质
酿酒酵母的电穿孔转化法实验
材料的准备 电穿孔转化法 实验材料 高分子量 DNA 试剂、试剂
酿酒酵母的电穿孔转化法实验
材料的准备 电穿孔转化法 实验材料 高分子量 DNA 试剂、试剂
感受态制备：酵母感受态细胞制备实验
酵母感受态细胞制备可以：（1）用于建立酵母转化体系；（2）用于酵母表达系统构建；（3）用于酵母其他分子生物学研究。实验方法实验材料酿酒酵母 试剂、试剂盒YPDA液体培养基 蒸馏水 甘油 二甲基亚砜 仪器、耗材培养皿 离心机 离心管 冰箱 实验步骤一、试剂与耗材 1. 试剂 细菌用-酵母提取物（Fi