用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验——ATP储存液的配制
试剂、试剂盒ATP储存液实验步骤一、Mg-ATP 储存液的配制ATP 买来时通常是钠盐。大多数激酶需要 ATP 镁盐作为高效底物。有时可以用锰代替镁。1. 20 mmol/L MgCl2 或 MgSO42. 20 mmol/L Na2-ATP以 1:1 的比例混合这两种溶液，测 pH 值。慢慢将 pH 值调至 pH 7.4。如果出现沉淀，应继续搅拌，并要保持 pH 值在 pH 7.4。这就配成了 10 mmol/L 的 Mg-ATP 储存液。将溶液分成小份保存于 -20℃，可以放一年以上。二、[γ-32P] ATP 使用液的配制[γ-32P] ATP 供应商有 Amersham Int、NEN 和 ICN；通常可以买到不同比活性的 [γ-32P] ATP。适宜使用的比活性是 3000 Ci/mmol，通常刚买来时的浓度是 10 mCi/ml。Amersham’s Rerfivue [γ-32P] ATP 溶液用起来很方......阅读全文
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验——ATP储存液的配制
试剂、试剂盒ATP储存液实验步骤一、Mg-ATP 储存液的配制ATP 买来时通常是钠盐。大多数激酶需要 ATP 镁盐作为高效底物。有时可以用锰代替镁。1. 20 mmol/L MgCl2 或 MgSO42. 20 mmol/L Na2-ATP以 1:1 的比例混合这两种溶液，测 pH 值。慢慢将 p
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验
试剂、试剂盒 ATP储存液实验步骤 一、Mg-ATP 储存液的配制ATP 买来时通常是钠盐。大多数激酶需要 ATP 镁盐作为高效底物。有时可以用锰代替镁。1. 20 mmol/L MgCl2 或 MgSO42. 20 mmol/L Na2-ATP以 1:1 的比例混合这两种溶液，测 pH 值。慢慢将
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验
ATP储存液的配制依赖环核苷酸的蛋白质激酶蛋白质激酶C酪蛋白激酶酪氨酸激酶凝胶蛋白质激酶分析试剂、试剂盒ATP储存液 实验步骤一、Mg-ATP 储存液的配制ATP 买来时通常是钠盐。大多
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验
ATP储存液的配制 依赖环核苷酸的蛋白质激酶 蛋白质激酶C 酪蛋白激酶 酪氨酸激酶 凝胶蛋白质激酶分析
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验—蛋白质激酶C
试剂、试剂盒PKC 分析缓冲液组蛋白 HI 储存液磷脂酰丝氨酸甘油二油酸脂实验步骤1. 在冰浴的离心管内配制如下 20 μl 反应混合物：5X PKC 分析缓冲液 4 μl10 mg/ml 组蛋白 HI 储存液
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验——酪氨酸激酶
试剂、试剂盒烯醇化酶酪氨酸激酶分析缓冲液实验步骤1. 制备酸变性的烯醇化酶从兔肌肉中纯化的烯醇化酶通常以硫酸铵沉淀或者悬液的形式存在。(1) 含 100 μg 的烯醇化酶，于 4℃ 全速离心 5 分钟。(2) 去上清，加入含有 1 mmol/L DTT 的 10 μl 50 mmol/L HEPES
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验——酪蛋白激酶
试剂、试剂盒酪蛋白激酶分析缓冲液β-酪蛋白β-酪蛋白储存液实验步骤1. 在置于冰上的离心管内配制含下列成分的 20 μl 反应混合物：5X 酪蛋白激酶分析缓冲液 4 μl β-酪蛋白
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析—凝胶蛋白质激酶分析
试剂、试剂盒Tris-HClDTT盐酸胍尿素激酶分析缓冲液仪器、耗材SDS-PAGE实验步骤1. 准备下列材料：SDS-PAGE 要用到的所有试剂50 mmol/L Tris-HCl，室温（pH 8.0)，1 mmol/L DTT6 mol/L 盐酸胍，50 mmol/L Tris-HCl，室温（p
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验—依赖环核苷酸
试剂、试剂盒激酶分析缓冲液组蛋白 2B 储存液环核苷酸依赖的蛋白质激酶分析缓冲液环核苷酸储存液实验步骤1. 在置于冰上的离心管内配制含下列成分的 20 μl 反应混合物：5X 激酶分析缓冲液 4 μl，10 mg/ml 组蛋白 2B 储存液 1 μl，[γ-32P] ATP（终浓度为 5 μCi/5
用肽底物检测蛋白质激酶的活性和特异性实验
利用肽底物分析酪蛋白激酶Ⅰ和Ⅱ 利用肽底物分析CaMKⅠ和Ⅱ 试剂、试剂盒 酪氨酸激酶分析缓冲液
用肽底物检测蛋白质激酶的活性和特异性实验
利用肽底物分析CaMKⅠ和Ⅱ试剂、试剂盒反应缓冲液仪器、耗材磷酸纤维素滤纸离心管实验步骤1. 准备 P81 磷酸纤维素滤纸。(1) P81 磷酸纤维素滤纸切成 2cmX2cm 的方块，折起一个角，用铅笔在这里做个记号。(2) 将膜块放在一大张非吸收性材料上，如有机玻璃或者盖着铝箔的纤维板。2. 设置
用肽底物检测蛋白质激酶的活性和特异性实验1
利用肽底物分析酪蛋白激酶Ⅰ和Ⅱ试剂、试剂盒酪氨酸激酶分析缓冲液酪蛋白激酶肽底物溶液实验步骤1. 在离心管里配制 50 μl 反应混合物：5X 酪氨酸激酶分析缓冲液 10 μl10 mmol/L 酪蛋白激酶肽底物溶液 5
酪蛋白激酶分析实验_用多肽底物
实验方法原理酪蛋白激酶 I 可用多肽 AspAspAspGluGluSerIleThrArgArg 进行分析，最近酿蛋白激酶 II 也已被特异性的多肽底物分析，如 ArgArgArgGluGluGluThrGluGluGlu（下划线残基是磷酸受体）。两个多肽均可通过精氨酸残基结合到 P81 磷酸纤维
用1×储存液配制培养基
方案11.1 玻璃器皿的准备和灭菌 实验方法原理 检査配方设计：如果配方完全，在加完血清之后可直接使用；如果配方不全（例如，缺少谷氨酰胺），则加人相应的浓缩液。 实验材料 培养基储存液
用1×储存液配制培养基
实验方法原理 检査配方设计：如果配方完全，在加完血清之后可直接使用；如果配方不全（例如，缺少谷氨酰胺），则加人相应的浓缩液。实验材料 培养基储存液谷氨酰胺血清抗生素青霉素链霉素试剂、试剂盒 吸液管实验步骤 1. 检查培养基的配方，并决定需要添加何种添加剂，例如谷氨酰胺。2. 将培养基放在超净台内，如
用1×储存液配制培养基
实验方法原理检査配方设计：如果配方完全，在加完血清之后可直接使用；如果配方不全（例如，缺少谷氨酰胺），则加人相应的浓缩液。实验材料培养基储存液谷氨酰胺血清抗生素青霉素链霉素试剂、试剂盒吸液管实验步骤1. 检查培养基的配方，并决定需要添加何种添加剂，例如谷氨酰胺。2. 将培养基放在超净台内，如果需要可
用1×储存液配制培养基
方案11.1 玻璃器皿的准备和灭菌 实验方法原理 检査配方设计：如果配方完全，在加完血清之后可直接使用；如果配方不全（例如，缺少谷氨酰胺），则加人相
蛋白质能否储存
我是学生物出生。我们补充的是氨基酸而非蛋白质，氨基酸被吸收进体内后在肝脏合成新蛋白质，转运到各处，老的，被解雇的蛋白质有些通过脱氨基作用被分解，脱氨基作用是一种蛋白的代谢途径。
怎样储存纯化蛋白质
一般来说蛋白都放在-20℃冰箱里，有必要的话甚至要放到-80摄氏度，因为你在提纯的过程中没法做到无菌，因此提纯的蛋白液里肯定共有细菌的存在。而细菌在4°C中仍然是会活动的，这样它就会去水解蛋白质，辛辛苦苦提的蛋白也就质量下降。不信你可以把蛋白放在4度里过一个星期，拿出来绝对臭了，臭了就说明降解了。蛋
怎样储存纯化蛋白质
一般来说蛋白都放在-20℃冰箱里，有必要的话甚至要放到-80摄氏度，因为你在提纯的过程中没法做到无菌，因此提纯的蛋白液里肯定共有细菌的存在。而细菌在4°C中仍然是会活动的，这样它就会去水解蛋白质，辛辛苦苦提的蛋白也就质量下降。不信你可以把蛋白放在4度里过一个星期，拿出来绝对臭了，臭了就说明降解了。蛋
底物溶液的配制
pH 5.0磷酸-柠檬酸缓冲液加入邻苯二胺1mg/ml，再加入30%的H2O2 (1μl/ml)溶解后即为ELISA底物液，临用前配制，避光保存。
用分离的亚细胞组分进行激酶分析
实验材料 细胞器样品 试剂、试剂盒 激酶分析缓冲液ATP 仪器、耗材 SDS-PAGE 凝胶 实验步骤 1. 准备反应混合物：反应体积通常是 50~100 ml。 5X 激酶分析缓冲液 10
用分离的亚细胞组分分析蛋白质的磷酸化
实验材料样品试剂、试剂盒胞内缓冲液透化缓冲液仪器、耗材离心管实验步骤1. 分离细胞器。2. 于 4℃ 用胞内缓冲液清洗细胞器样品 3 次，将相当于 1 mg 蛋白质的样品转至带螺帽的小离心管，放入冰盒。3. 离心，吸去上清，加 200 μl 预热至 37℃ 的透化缓冲液，轻轻混匀，放入 37℃ 水浴
凝胶中激酶直接分析实验——－直接分析
蛋白激酶的分析是使用标记的供体底物，当酶样品中含有磷酸转移酶活性时，蛋白 质或多肽受体底物中标记物的积累就很容易被检出。实验方法原理盐酸胍或脲都能使蛋白质变性，选用哪一种取决于不同的激酶，但一般首选盐酸胍，因为对大多数激酶而言它的变性效果更好。实验材料10 mmol L 激酶底物有激酶活性的酶样品试
凝胶中激酶直接分析实验
基本方案 直接分析 实验方法原理 盐酸胍或脲都能使蛋白质变性，选用哪一种取决于不同的激酶，但一般首选盐酸胍，因为对大多数激酶而言它的变性效果更好。
凝胶中激酶直接分析实验
实验方法原理 盐酸胍或脲都能使蛋白质变性，选用哪一种取决于不同的激酶，但一般首选盐酸胍，因为对大多数激酶而言它的变性效果更好。实验材料 10 mmol L 激酶底物有激酶活性的酶样品试剂、试剂盒 2-丙醇Tris•Cl盐酸胍 脲DTTTween 20匹配的激酶反应缓冲液 Mg／ATP 溶液 [γ-3
蛋白质磷酸化的蛋白磷酸激酶的纯化与活性分析
蛋白磷酸激酶是能催化磷酸基团从磷酸供体转移到受体蛋白的酶，通常ATP的γ位磷酸(或其它三磷酸核苷)为供体。国际生物化学联合会根据受体氨基酸的特异性，将蛋白激酶分为以下几类： ①以蛋白乙醇基作为受体的磷酸转移酶称为蛋白丝氨酸或苏氨酸激酶; ②以苯基为磷酸受体的磷酸转移酶称为蛋白酪氨酸激酶;
蛋白质根据蛋白质结构进行分类
纤维蛋白（fibrous protein）：一类主要的不溶于水的蛋白质，通常都含有呈现相同二级结构的多肽链许多纤维蛋白结合紧密，并为单个细胞或整个生物体提供机械强度，起着保护或结构上的作用。球蛋白(globular protein)：紧凑的，近似球形的，含有折叠紧密的多肽链的一类蛋白质，许多都溶于水
蛋白质浓度分析实验
BRADFORD分析（BIORAD) BCA分析(PIERCE) 三氯乙醇沉淀 实验材料 标准蛋白质
蛋白质浓度分析实验
BRADFORD分析（BIORAD)BCA分析(PIERCE)三氯乙醇沉淀实验材料标准蛋白质 试剂、试剂盒BSA