牙髓干细胞的分离培养——牙髓干细胞/乳牙干细胞原代培养

实验材料牙髓组织试剂、试剂盒灭菌PBSAMSC培养基胶原酶中性蛋白酶免疫磁珠分选时所需试剂:含1%BSA的PBSA与DPSC反应的一抗用STRO-I(小鼠抗人MSC;IgM)CC9(小鼠抗人CD146 MUC-18;IgG2a)或3G5(小鼠抗人外膜细胞;IgM)仪器、耗材羊抗小鼠IgG-结合或大鼠抗小鼠IgM-结合磁珠培养瓶和培养皿手术刀片和刀柄70μm细胞滤网非灭菌器材 用于免疫磁珠分选 回转式混合仪DynalMPC®-1磁分离器实验步骤(a)用手术刀片将牙髓组织切成小碎片。(b)将剪碎的组织放入胶原酶/中性蛋白酶混合溶液中(1:1)。(c)37℃孵育30〜60min,间歇地摇匀组织/消化酶混合物。(d)消化后,加人足够的MSC培养基,终止酶的活性。(e)将悬液经70μm细胞滤膜过滤,去除细胞碎片,得到单细胞悬液。(f)500g离心6min。(g)倒掉上清液,用MSC培养基重悬细胞。然后进行免疫磁珠分选:和能与DPSC细胞反......阅读全文

干细胞技术实现全牙髓组织功能性再生

  科技日报西安8月29日电 记者29日从空军军医大学口腔医院演示现场了解到,该院金岩教授率领的科研团队通过模拟牙发育原理,建立基于干细胞自组装的细胞聚合体技术,利用脱落乳牙干细胞成功实现了全牙髓组织的功能性再生,开展国际首个全长牙髓再生的临床研究并获得成功,其学术成果近日发表于《科学转化医学》上。

科学家利用干细胞实现口腔中牙髓再生

  近日,来自美国罗格斯大学的研究人员通过研究发现了在根管疗法期间如何利用干细胞来再生牙髓而不是移除牙髓;那么好消息是什么呢?基于研究者的发现,根管治疗程序或许会很快,而且干细胞所产生的牙髓也能够明显降低患者未来发生感染或并发症的风险。图片来源:medicalxpress.com  那么坏消息又是什

干细胞技术实现全牙髓组织功能性再生

  科技日报西安8月29日电 记者29日从空军军医大学口腔医院演示现场了解到,该院金岩教授率领的科研团队通过模拟牙发育原理,建立基于干细胞自组装的细胞聚合体技术,利用脱落乳牙干细胞成功实现了全牙髓组织的功能性再生,开展国际首个全长牙髓再生的临床研究并获得成功,其学术成果近日发表于《科学转化医学》上。

胚胎干细胞的分离与培养

分离囊胚的内细胞群(ICM)细胞,再进行体外培养即可取得胚胎干细胞。目前,取得胚胎干细胞的方法已有一定改进,但仍无可避免地会杀死胚胎。囊胚由两大部分构成:处于外围的滋养层以及处于内部的内细胞群。滋养层细胞会分化为胚胎外的组织(胎盘等),而内细胞群则会分化为胚胎的各种结构。最早期分离胚胎干细胞的方法是

日本科学家用乳牙干细胞制成肝细胞

  日本研究人员最新报告称,他们利用从儿童乳牙中提取的干细胞培育出大量肝细胞,并通过移植这些细胞成功改善了肝硬化实验鼠的症状。  人在婴幼儿时期会逐渐长出20颗乳牙,随后陆续脱落,逐个由恒牙代替。近年来,乳牙干细胞作为一种应用前景广泛的干细胞受到越来越多关注,因为它们可以分化为骨骼细胞等多种细胞,甚

关于毛囊干细胞的分离培养的介绍

  毛发的周期性自我更新以及生长依赖于毛囊干细胞(hair follicle stem cells,HFSCs)周期性增殖和分化。目前研究认为HFSCs 定位于毛囊外根鞘的隆突区,大致是毛囊外根鞘最外层靠近立毛肌附着点处。研究HFSCs 对于秃发的发病机制、毛囊组织工程以及干细胞或基因治疗秃发方面均

牙髓干细胞DPSCs的冻存与复苏_DPSCs的冻存

实验材料牙髓组织试剂、试剂盒灭菌PBSA用冰预冷的冻存液I用冰预冷的冻存液II胰蛋白酶-EDTA溶液:0.05%胰蛋白酶0.54mmol L(0.2%)EDTA 无Ca2+和Mg2+的Hank’s平衡盐溶液溶解仪器、耗材1.8mL冻存管实验步骤(a)用PBSA洗培养瓶/皿三次。(b)加足够的胰蛋白酶

关于脂肪干细胞的分离和培养介绍

  将脂肪组织冲净,称重后消化。当消化完成后,弃掉上层未消化的脂肪组织,将下层的细胞悬液以1500 r/min(375g),离心10 min 后弃上清,得到离心管底部的脂肪干细胞团,将其重悬,密度调整到1×105mL-1,然后接种在培养面积为25 cm2 的细胞培养瓶中。  当干细胞长满培养瓶后按一

脐带间充质干细胞的分离培养

  脐带间充质干细胞的获取主要有组织块贴壁法与酶消化法,由于酶对细胞的损伤较大,且细胞得率较低,费用昂贵,因此大多数实验室采取了组织块贴壁法进行培养。  取新鲜健康脐带,用PBS冲洗干净后,用剪刀镊子剔去血管,剥出里面的华氏胶组织,将所得组织充分剪碎至1 mm3大小,加入α-MEM培养液置于37℃,

牙髓组织的分离

试剂和材料:1. 无镁和钙的PBS平衡盐溶液(PBSA);2. MSC培养基:含2mmol/L 谷氨酰胺的α-MEM,添加15%胎牛血清,0.1mmol/L左旋抗坏血酸磷酸盐,100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素;3. 培养皿;4. 精细镊(小号和大号);5. 牙科碳化钻头;6. 牙挖器;7

关于乳牙慢性牙髓炎的概述

  乳牙慢性牙髓炎,是乳牙龋齿引起的较常见的继发性牙齿疾病。  慢性增生性牙髓炎又称牙髓息肉,是一种呈慢性病程的乳牙、年轻恒牙中发生的牙神经发炎,在儿童中比较常见。慢性牙神经发炎、增生 成息肉,其危害是可给一些孩子带来经常性的牙齿疼痛,孩子只要进食——咀嚼食物。食物中的小颗粒进入龋洞,即可压迫、刺激

脂肪干细胞培养

吸脂术时用无菌针管从臀上方吸取深层脂肪组织20 mL. 在1 h内将其移至离心管内,加入等量PBS缓冲液,充分振荡后低速离心800 r/min×10 min. 反复冲洗3次后加入等量15 g/L I型胶原酶. 37℃水浴中充分振荡30 min,再加入等量胎牛血清(FBS)中止. 低速离心10

骨髓间充质干细胞原代分离

实验概要本实验用两种方法(贴壁培养方法和密度梯度离心法)进行了骨髓间充质干细胞原代分离。主要试剂所用试剂盒 小鼠骨髓间充质干细胞分离和培养试剂盒             货号:MBMS-000-001大鼠骨髓间充质干细胞分离和培养试剂盒             货号:RBMS-000-001猪骨髓间

脂肪间充质干细胞原代分离

实验概要本实验方法介绍了脂肪间充质干细胞原代分离所需试剂及操作流程。主要试剂所用试剂盒:小鼠脂肪干细胞分离和培养试剂盒             货号:MADS-000-001大鼠脂肪干细胞分离和培养试剂盒             货号:RADS-000-001兔子脂肪干细胞分离和培养试剂盒     

脐带间充质干细胞原代分离

实验概要本实验方法介绍了脐带间充质干细胞原代分离的操作步骤。主要试剂所用试剂盒:猪脐带间充质干细胞分离和培养试剂盒               货号:PUMS-000-001人脐带间充质干细胞分离和培养试剂盒               货号:HUMS-000-001规格:5次           

脐带和脐血来源干细胞的培养实验_从脐静脉分离干细胞

实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶培养基仪器、耗材导管实验步骤(a)在正常分娩后6〜12h内收集和处理脐带。(b)在脐静脉内插入导管,用PBSA完全地洗2次。(c)夹住远端脐带。(d)用0.1%胶原酶溶液充满静脉。(e)夹住近端脐带。(f)将脐带在37℃孵育20min。(g)轻轻按摩脐带,收集含有内皮和

牙髓干细胞DPSCs的冻存与复苏_DPSCs冻存后复苏

实验材料 DPSCs 试剂、试剂盒 MSC培养基 仪器、耗材 无菌冻存管 直接从液氮罐中取出 实验步骤 (a)将冻存管放入37℃水浴,快速溶化(1〜2 min)对最好的复苏效果很重要。 (b)加足够体积的MSC培养基,充分混匀。 (c)

脂肪源干细胞的培养

(1)吸脂术时用无菌针管从臀上方吸取深层脂肪组织20 mL。(2) 在1 h内将其移至离心管内,加入等量PBS缓冲液,充分振荡后低速离心800 r/min×10 min。(3)反复冲洗3次后加入等量15 g/L I型胶原酶,37℃水浴中充分振荡30 min,再加入等量胎牛血清(FBS)中止。(4)低

乳腺干细胞的培养实验

实验材料组织标本试剂、试剂盒无菌DMEM F12 50:50 加人1.2 mg ml重碳酸盐CMD3培养基胶原酶 900 IU mlVitrogen解剖刀培养瓶 25cm2Vitrogen包被 8μg cm2仪器、耗材摇床离心管实验步骤(a)手术后,立即将组织标本转移至DMEM/F12(1:1)。(

乳腺干细胞的培养实验

实验方法原理 实验材料 组织标本试剂、试剂盒 无菌DMEM F12 50:50 加人1.2 mg ml重碳酸盐CMD3培养基胶原酶 900 IU mlVitrogen解剖刀培养瓶 25cm2Vitrogen包被 8μg cm2仪器、耗材 摇床离心管实验步骤 (a)手术后,立即将组织标本转移至DMEM

乳腺干细胞的培养实验

乳房缩小整形术组织标本中上皮细胞的制备IrECM三维培养乳腺干细胞实验方法原理实验材料组织标本试剂、试剂盒无菌DMEM F12  50:50  加人1.2 mg ml重碳酸盐 CMD3培养基 胶原酶  900 IU ml Vitrogen 解剖刀 培养瓶 625px2 Vitrogen包被  8μg

神经干细胞的培养

神经干细胞的培养可以用于(1)使其特定分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞;(2)其可以自我更新并能提供大量脑组织细胞的细胞群。来源:《神经生物学实用实验技术》第四军医大学出版社实验方法原理由于神经干细胞(Neural Stem Cell)具有自我更新和多向分化的潜能,因此,可以采用悬浮神经球培

神经干细胞的培养

神经干细胞培养             实验方法原理 由于神经干细胞(Neural Stem Cell)具有自我更新和多向分化的潜能,因此,可以采用悬浮神经球培养的方法来获得和研

毛囊干细胞的分类培养

  毛发的周期性自我更新以及生长依赖于毛囊干细胞(hair follicle stem cells,HFSCs)周期性增殖和分化。目前研究认为HFSCs 定位于毛囊外根鞘的隆突区,大致是毛囊外根鞘最外层靠近立毛肌附着点处。研究HFSCs 对于秃发的发病机制、毛囊组织工程以及干细胞或基因治疗秃发方面均

培养干细胞的冻存

干细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。 1. 冻存细胞 (1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液。 (2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10 7 /ml左右密度,离心,去

神经干细胞的培养

一、  神经干细胞的分离无菌条件下取新生SD大鼠(出生48h内)脑组织,D-Hanks液充分漂洗后,在解剖显微镜下剥离脑膜,准确分离海马,用眼科剪将海马剪碎后,再转移到DMEM/F12(1:1)加B27 和bFGF(20ng/ml)的无血清培养基,吸管吹打机械分离制作单细胞悬液,台盼蓝染色后

骨髓间充质干细胞(MSC)原代培养与传代培养

准备工作(1)试管、试管架、滴管、吸管、小鼠固定架、玻璃瓶、玻璃皿、烧杯、橡皮头、剪刀、镊子、纱布、棉球、酒精灯、滴管、移液器、细胞计数器、生理盐水、PBS、双抗(青链霉素)、75%酒精、95%酒精、培养瓶(50ml,260ml)。(2)BALB/C小鼠(4~5周龄,18~22g,雌雄不限)、胎牛血

大鼠、小鼠心脏干细胞(祖细胞)分离培养方法

心脏病是引起人类死因的一种代表性疾病,如果失去了心肌细胞,就会引起心力衰竭等心脏疾病。心肌细胞几乎没有再生能力,一旦失去就不能再生。从前认为心脏当中没有干细胞,所以心肌没有再生能力,但是近年的研究表明,成体心脏内部也会存在一些心肌干细胞。细胞培养操作:1.摘取出心脏,去掉心脏包膜,把心尖部分剪下来(

脂肪干细胞培养和扩增实验_脂肪干细胞的传代培养

分离获得ASC后,可以通过连续传代使其生长和扩增。原代培养后,传代2〜3次,ASCs呈现单层,大而扁的细胞形态,其直径在25〜30μm。待细胞达到汇合时,它们形态上呈纺锤体形,类似于成纤维细胞。来源:《人干细胞培养》实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒ASC培养基PBSA胰蛋白酶仪器、耗材组织培养瓶 25

脐带间充质干细胞的分离培养的介绍

  脐带间充质干细胞的获取主要有组织块贴壁法与酶消化法,由于酶对细胞的损伤较大,且细胞得率较低,费用昂贵,因此大多数实验室采取了组织块贴壁法进行培养。  取新鲜健康脐带,用PBS冲洗干净后,用剪刀镊子剔去血管,剥出里面的华氏胶组织,将所得组织充分剪碎至1 mm3大小,加入α-MEM培养液置于37℃,