皮层/海马神经元的原代培养实验

实验方法原理神经元在发育过程中早于胶质细胞,因此通常选择胎鼠做脑内神经元培养。一般取El7-l8d孕大鼠或El4-16d孕小鼠做神经元培养。新生1d的仔鼠也可以用来培养神经元,但培养成功后杂细胞较多,有时需要进一步纯化。这两个部位的细胞培养方法类似实验材料El7-18d孕大鼠或E14-16d孕小鼠新生Id的仔鼠试剂、试剂盒含10%胎牛血清的DMEM培养基神经元维持培养基(Neurobasal+B27+谷氨酰胺)仪器、耗材培养瓶实验步骤1.根据离心前细胞计数的结果,先用少量神经元维持培养基重悬细胞,充分重悬后,补加液体至合适体积,按照(2-4)x104/cm2的密度在培养板、玻片等介质上接种细胞,并置于37℃孵箱培养。2.培养过程中接触细胞要注意动作轻柔,接种Id后应避免把细胞从孵箱中拿出,可根据培养液的颜色和亮度观察污染情况(污染的细胞,培养液混浊、发黄;正常应该是清亮透明的)。3d后1/3量换液,并可利用神经元标志物的免疫化学......阅读全文

皮层/海马神经元的原代培养实验

实验方法原理神经元在发育过程中早于胶质细胞,因此通常选择胎鼠做脑内神经元培养。一般取El7-l8d孕大鼠或El4-16d孕小鼠做神经元培养。新生1d的仔鼠也可以用来培养神经元,但培养成功后杂细胞较多,有时需要进一步纯化。这两个部位的细胞培养方法类似实验材料El7-18d孕大鼠或E14-16d孕小鼠新

皮层/海马神经元的原代培养实验

基本方案             实验方法原理 神经元在发育过程中早于胶质细胞,因此通常选择胎鼠做脑内神经元培养。一般取El7-l8d孕大鼠或El4-16d孕小鼠做神经元培养。新生1

皮层/海马神经元的原代培养

实验方法原理 神经元在发育过程中早于胶质细胞,因此通常选择胎鼠做脑内神经元培养。一般取El7-l8d孕大鼠或El4-16d孕小鼠做神经元培养。新生1d的仔鼠也可以用来培养神经元,但培养成功后杂细胞较多,有时需要进一步纯化。这两个部位的细胞培养方法类似实验材料 El7-18d孕大鼠或E14-16d孕小

小鼠原代海马神经元细胞的分离培养方法

原代小知识——小鼠原代海马神经元细胞的分离培养方法海马体主要负责记忆和学习,日常生活中的短期记忆都储存在海马体中。神经元是构成神经系统结构和功能的基本单位。神经元具有长突起,由细胞体和细胞突起构成。小鼠海马神经元细胞的组织来源于实验小鼠的正常脑组织,因为海马神经元细胞类似于干细胞属于高分度分化的细胞

皮层星形胶质细胞的原代培养实验

贴附差异法             实验方法原理 利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的

皮层星形胶质细胞的原代培养实验

贴附差异法             实验方法原理 利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的

原代神经元培养

Protocol for the Primary Culture of Cortical and Hippocampal neurons Solutions and media required:Poly D-lysine/laminin solution - pdfDM/KY - pdfOptim

皮层星形胶质细胞的原代培养

实验方法原理 利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的皮层来源的混合胶质细胞中去除少突胶质细胞和小胶质细胞,其中星形胶质细胞的贴附力最强。用这种方法获得的星形胶质细胞纯度很高(95%以上),且细胞具有较好的增

小脑颗粒神经元的原代培养实验

实验方法原理小脑颗粒神经元的体外培养受取材部位、特殊培养条件等因素的影响,易于获得纯度较高的培养物。该细胞为双极突起,常用来研究神经突起的生长。其培养条件具有高浓度钾离子依赖特性,常用来作为诱导神经元凋亡的研究模型。当成熟颗粒神经元的培养液由高KCl(通常是25-30mmol/L)换为低KC!(基本

小脑颗粒神经元的原代培养实验

基本方案             实验方法原理 小脑颗粒神经元的体外培养受取材部位、特殊培养条件等因素的影响,易于获得纯度较高的培养物。该细胞为双极突起,常用来研究神经突起的生长。其

小脑颗粒神经元的原代培养实验

基本方案实验方法原理小脑颗粒神经元的体外培养受取材部位、特殊培养条件等因素的影响,易于获得纯度较高的培养物。该细胞为双极突起,常用来研究神经突起的生长。其培养条件具有高浓度钾离子依赖特性,常用来作为诱导神经元凋亡的研究模型。当成熟颗粒神经元的培养液由高KCl(通常是25-30mmol/L)换为低KC

皮层星形胶质细胞的原代培养实验——贴附差异法

皮层星形胶质细胞的原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)皮层星形胶质细胞功能研究。实验方法原理利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的皮层来源的混合胶质细胞中去除少突胶质细胞和小胶质细胞,其中星形胶质细胞的

大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验

机械性划割培养 酶消化法             实验方法原理 SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7 d ,微量移液器塑料滴头于培养孔内机械性划割培养之神经元,依划割程度不同

大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验

机械性划割培养 酶消化法             实验方法原理 SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7 d ,微量移液器塑料滴头于培养孔内机械性划割培养之神经元,依划割程度不同

海马神经元细胞的分离及培养

实验概要从海马体中分离到神经元细胞,然后进行培养细胞以便进行其他的实验研究。主要试剂解剖液MEMHBSS主要设备L-多聚赖氨酸包被的平皿或盖玻片实验材料出生24h内的乳鼠实验步骤1. 用冷却的解剖液(0℃,最高2-3℃)冲洗海马两次。2. 在冷却解剖液(2-3℃)中解剖无脑膜的海马。3. 加入胰蛋白

神经元原代培养方法

从孕17-18天的雌鼠的胎儿分离神经元细胞。孕雌鼠麻醉然后解剖,胎儿收集到HBSS-1中然后快速断头。剥离脑膜和白质后,大脑皮质收集入 HBSS-2 液中机械磨碎。皮质碎片移到有0.025%胰酶的HBSS-2液中37°C消化15分钟。胰酶消化后,细胞用含有10%胎牛血清的HBSS-2液冲洗两

大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验——机械性划割培养

实验方法原理SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7 d ,微量移液器塑料滴头于培养孔内机械性划割培养之神经元,依划割程度不同分为轻、中、重3组,对照组除不进行机械性划割,其余处理同损伤组,伤后不同时间点(10,30 min , 1,3,6,12,24 h)检测细胞存活率及培养液上清乳酸脱氢酶(LDH)含量。

小脑颗粒神经元的原代培养

实验方法原理 小脑颗粒神经元的体外培养受取材部位、特殊培养条件等因素的影响,易于获得纯度较高的培养物。该细胞为双极突起,常用来研究神经突起的生长。其培养条件具有高浓度钾离子依赖特性,常用来作为诱导神经元凋亡的研究模型。当成熟颗粒神经元的培养液由高KCl(通常是25-30mmol/L)换为低KC!(基

细胞技术专题:大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验

大鼠大脑皮层神经元细胞培养可以:(1)获得大鼠大脑皮层神经元细胞;(2)用于神经元细胞定向分化研究;(3)用于神经元细胞凋亡研究。实验方法机械性划割培养 酶消化法 实验方法原理SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7 d,微量移液器塑料滴头于培养孔内机械性划割培养之神经元,依划割程度不同分为轻、中、重

大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验——酶消化法

实验材料小鼠试剂、试剂盒酒精解剖液胰蛋白酶DMEM F12B27阿糖胞苷培养液仪器、耗材培养箱实验步骤一、小鼠大脑皮层神经元原代培养步骤1.  于无菌条件下切取鼠头并以75%酒精浸泡1 min,解剖出完整鼠脑。2.  预冷解剖液中分离去除软膜、血管、取大脑皮质漂洗,用眼科剪将皮质反复剪切成碎块。3.

大鼠大脑皮层神经元细胞培养

实验方法原理 SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7 d ,微量移液器塑料滴头于培养孔内机械性划割培养之神经元,依划割程度不同分为轻、中、重3组,对照组除不进行机械性划割,其余处理同损伤组,伤后不同时间点(10,30 min , 1,3,6,12,24 h)检测细胞存活率及培养液上清乳酸脱氢酶(

浅谈大鼠海马神经元细胞的分离培养方法

大鼠海马神经元细胞分离自海马体,海马体,又名海马回、海马区、大脑海马,海马体主要负责记忆和学习。海马神经元细胞是海马区的主要细胞组成,主要功能是参与近期记忆、情绪及内脏功能调节、是老年性痴呆、癫痫等疾病的主要病灶之一。    海马属于大脑的边缘系统,在学习、记忆、情绪反应及神经系统疾病的病理生理变化

小鼠海马神经元细胞分离培养的步骤详解

  小鼠神经元细胞中神经元是构成神经系统结构和功能的基本单位。细胞体位于脑、脊髓和神经节中,细胞突起可延伸至全身各器官和组织中。   (1)75%(体积分数)酒精消毒新生24h内的健康C57小鼠,在无菌条件下脱颈处死,剪开头皮及颅骨,取出脑组织,置于盛冷的pH7.2,无钙、镁的D-Hank'

小鼠神经元原代细胞培养步骤

  小鼠大脑皮层神经元原代培养步骤:  1、 于无菌条件下切取鼠头并以75%酒精浸泡1min,解剖出完整鼠脑;  2、 预冷解剖液中分离去除软膜、血管、取大脑皮质漂洗,用眼科剪将皮质反复剪切成碎块;  3、 移入培养皿中,吸除解剖液加入0.25%胰蛋白酶2m1,37℃培养箱中消化30min;  4、

细胞原代培养实验

细胞原代培养可以:(1)为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段;(2)为传代培养创造条件;(3)服务于临床实践,用于药物筛选等。实验方法胰酶消化法组织块直接培养法实验方法原理将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合

细胞原代培养实验

胰酶消化法 组织块直接培养法             实验方法原理 将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成

细胞原代培养实验

胰酶消化法 组织块直接培养法             实验方法原理 将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成

原代培养的实验原理

将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。细胞培养是生物学和医学研究最常用的手段之一,可分为原代培养和传代培养两种。原代培养是直接从生物体获取细胞进行培养。由于

细胞的原代培养实验

实验方法原理 细胞培养(Cell culture)是模拟机体内生理条件,将细胞从机体中取出,在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。近年来,广泛地应用于分子生物学、遗传学、免疫学、肿瘤学、细胞工程等领域,发展成一种重要生物技术,并取得显著成就

原代培养的实验步骤

以胚胎小鼠为例1.取材:将孕鼠拉颈椎处死,投入75%酒精浸泡数秒消毒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织,打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的消毒器械。最后取出双角子宫置于无菌平皿内。2.用Hanks液洗涤3次,剪开子宫取出胚胎。除去子宫、血液和筋膜等组织