食管癌细胞系中干细胞样SP细胞的分离鉴定—细胞培养技术
细胞培养技术实验材料人食管癌细胞系试剂、试剂盒胰酶RNA酶碘化丙啶四甲基偶氮唑盐小牛血清DMEMDMSOK2HPO4Na2HPO4NaCI仪器、耗材无菌分选管400目细胞筛水浴锅离心机酶标仪电泳仪显微镜PCR仪实验步骤一、材料准备1. 青霉素储存液（1）将青霉素小瓶中的80万单位的干粉充分溶解于8 ml去离子水中。（2）分装为1 ml/管，-20℃保存。2. 链霉素储存液（1）将键霉素小瓶中的1 mg干粉充分溶解于10 ml去离子水中。（2）分装为1 ml/管，-20℃保存。3. RPMI 1640培养基（1）在大三角瓶中装入800 ml 去离子水。（2）加入1袋RPMI1640干粉制荆，于搅拌器上混匀。（3）加入2.0 g Na2HCO3，1 ml 10万unit/ml 的青霉素储存液。（4）1 ml 充分溶解后，调节pH值至7.4，去离子水定容为1000 ml。（5）无菌条件下0.22 u......阅读全文
食管癌细胞系中干细胞样SP细胞的分离鉴定—细胞培养技术
细胞培养技术实验材料人食管癌细胞系试剂、试剂盒胰酶RNA酶碘化丙啶四甲基偶氮唑盐小牛血清DMEMDMSOK2HPO4Na2HPO4NaCI仪器、耗材无菌分选管400目细胞筛水浴锅离心机酶标仪电泳仪显微镜PCR仪实验步骤一、材料准备1. 青霉素储存液（1）将青霉素小瓶中的80万单位的干粉充分溶解于8
食管癌细胞系中干细胞样SP细胞的分离鉴定实验
实验材料 人食管癌细胞系试剂、试剂盒 胰酶RNA酶碘化丙啶四甲基偶氮唑盐小牛血清DMEMDMSOK2HPO4Na2HPO4NaCI仪器、耗材 无菌分选管400目细胞筛水浴锅离心机酶标仪电泳仪显微镜PCR仪实验步骤 一、材料准备1. 青霉素储存液（1）将青霉素小瓶中的80万单位的干粉充分溶解于8 m
侧群干细胞（sp细胞）的分离与分选
准备工作： DF12 加入0.1%BSA，100ml,取10ml冰浴，40ml放入孵箱；其余的放入4度； DNase I 100*; PI：50ug/ml; Hoechst33342: 1000ug/ml（all from Sigma） 计数板，冰盒；各种离心管，无菌流式管（BD），400滤网（BD
干细胞鉴定和分离
干细胞鉴定干细胞的功能是明确的。因此，分离和表征这种独立的细胞群体成为一项具有挑战性的任务。胚胎干细胞（ES）是植入前胚胎的内细胞群体，属于多能干细胞群体。干细胞研究主要有两种技术：一种是在体外成功培养人类胚胎干细胞。另一个重大突破是成人干细胞的侧向分化。干细胞的分离理想的分离干细胞群体应在体内确定
侧群干细胞（sp细胞）的分离与分选2
这是我收集的SP分选的方法：与大家共享。 一 Hoechst染色方案 1. 在37℃循环水浴箱中预热DMEM+培养基。确保温度为37℃。 2. 重悬细胞于预热的DMEM+培养基中，浓度为106/ml，为了避免细胞留在试管中，所以在Hoechst染色时必须用聚丙烯试管。当要染大量细胞时，在250ml聚
脐血脐带中干细胞分离实验—脐血来源胚胎样干细胞分离
实验材料脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)试剂、试剂盒灭菌培养基TPOFLK细胞因子混合物（10 ng mL促血小板生成素50 ng mL Flt-3配体和20 ng mL c-kit配体）ACD-A缓冲液小鼠抗人CD45CD33CD47单克隆抗体抗血型糖蛋白A抗体2%人丙种球蛋白（HAG。用P
皮肤干细胞的分离与鉴定
皮肤干细胞的分离 皮肤干细胞的分离主要利用发现的相对特异的表面标志（如整合素家族成员和角蛋白家族成员）结合流式细胞术进行。 皮肤干细胞的鉴定 利用皮肤干细胞一些相对特异的标志建立了一系列的皮肤干细胞鉴别方法。最初，一些学者是从研究细胞黏附特性入手的。他们发现，在表皮基底细胞定向分化时，它会
什么是细胞系鉴定？
所谓细胞系鉴定即通过STR（短串联重复）图谱所建立细胞系的遗传特征。一株细胞系的遗传特征确立后，细胞系可以通过定期的检测，以防止出现细胞系被误认或交叉污染的情况。
细胞分离技术是细胞培养的基本方法
从原代组织中分离细胞 将组织块分离（散）成细胞悬液的方法有多种，最常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法。从原代组织中获得单细胞悬液的一般方法是酶解聚。细胞暴露在酶中的时间要尽可能的短，以保持最大的活性。下列步骤可以解聚整个组织，获得较高产量的有活性细胞。1.胰蛋白酶 (Tryp
细胞培养的基本方法细胞分离技术（一）
细胞分离技术一、从原代组织中分离细胞 将组织块分离（散）成细胞悬液的方法有多种，最常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法。从原代组织中获得单细胞悬液的一般方法是酶解聚。细胞暴露在酶中的时间要尽可能的短，以保持最大的活性。下列步骤可以解聚整个组织，获得较高产量的有活性细胞。1.胰蛋
细胞培养的基本方法细胞分离技术（二）
1.悬浮细胞 ●计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200～400g离心5分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到最小体积，不要搅乱细胞。 ●以1×107到5×107细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以0.5×107到1×107在无血清培养基中，再次悬浮细胞。 ●
原代细胞培养之——细胞分离技术（一）
原代细胞的分离和制作人或动物体内（或胚胎组织）由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，即使采用1mm3的组织块，也只有少量处于周边的细胞可能生存和生长，若需获取大量细胞，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来，常采用的方法如下： 一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水
原代细胞培养之——细胞分离技术（二）
（2） 胶原酶（Collagenase）消化法 胶原酶是一种从细菌中提取出来的酶，对胶原有很强的消化作用。适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织，它对细胞间质有较好的消化作用，对细胞本身影响不大，可使细胞与胶原成分脱离而不受伤害。该酶分离效果好，即使有钙、镁离子存在仍有活性，故可用PBS和含血清的
胚胎干细胞培养技术大全
MEDIA AND SOLUTIONS REQUIRED FOR ROUTINE ES CELL CULTURERoutine Culturing of ES CellsISOLATION OF PRIMARY MOUSE EMBRYO FIBROBLASTSMITOMYCIN C TREATMEN
细胞系鉴定的办法和依据
细胞系鉴定目前主要基于国际身份认证委员会的标准。依据该标准，可以通过多重荧光PCR技术，对人源8个STR位点以及1个性别决定位点进行检测。
细胞系错误鉴定：终结的开始
2010年5月ATCC SDO（Standards Development Organization）工作组在Nature review cancer杂志上发表了题为《Cell line misidentification：the beginning of the end》前瞻性报道。以下是全文
脐血脐带中干细胞分离实验—非限制性体干细胞的分离
实验材料脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)试剂、试剂盒灭菌起始培养基扩增培养基0.05%的胰蛋白酶含EDTAPBSA仪器、耗材T25培养瓶实验步骤(a)制备和分离脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)。(b)如果使用冻存的CB-MNCs,复苏的细胞可以用于培养，不需要其他分离步骤。(c)用起始培
干细胞有限细胞系的建立目的
目的:建立脑源性神经营养因子基因修饰的人骨髓间充质干细胞系。
胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定
方法：神经干细胞的培养①原代细胞的培养：取孕13.5天昆明种二级孕小鼠，引臼脱颈处死,碘酒、乙醇消毒腹部,逐层剖开腹部皮肤、肌肉、腹膜，取出子宫,放入盛有D1-SGH液的器皿中。仔细剥离胎膜、羊膜，暴露胎鼠，剪开颅骨，取出胎鼠脑组织并转移至另一盛有D1-SGH液的器皿中，体视显微镜下剥离脑膜,分离胎
胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定
原代、传代培养 实验材料 孕13d的昆明种二级小鼠 试剂、试剂盒 胎牛血清
胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定
原代、传代培养实验材料孕13d的昆明种二级小鼠 试剂、试剂盒胎牛血清
干细胞的鉴定实验
透 射 电 镜 样 品 制 备 技 术为了满足透射电镜观察的要求，超薄切片必须做到以下几点：①切片能够耐受电子 束 的照射，在热和高真空条件下有一定的稳定性。②细胞的超微结构保存良好，尽量减少人工假象。③ 切 片 厚 度 一 般 在 60〜80nm 为 宜 。切片太薄可得到较高的分辨率，但
皮肤干细胞的鉴定
利用皮肤干细胞一些相对特异的标志建立了一系列的皮肤干细胞鉴别方法。最初，一些学者是从研究细胞黏附特性入手的。他们发现，在表皮基底细胞定向分化时，它会失去其对基底膜蛋白的黏附性，而这种黏附性是受细胞表面受体-整合素家族调控的。 整合素为异源双聚体，包括α和β两种亚基。在基底层细胞定向分化过程中，
干细胞培养制造技术新进展！
干细胞培养制造技术新进展！ 干细胞是一种能够长期存活，且具有不断自我繁殖能力和多向化潜能，几乎存在于所有组织中的原始细胞。近年来随着科学家们研究的深入，干细胞在血液系统疾病、神经系统疾病、心血管疾病、自身免疫系统疾病以及内分泌疾病等各种疾病的治疗上让人们看到了希望。 干细胞技术是
干细胞培养制造技术新进展
干细胞是一种能够长期存活，且具有不断自我繁殖能力和多向化潜能，几乎存在于所有组织中的原始细胞。近年来随着科学家们研究的深入，干细胞在血液系统疾病、神经系统疾病、心血管疾病、自身免疫系统疾病以及内分泌疾病等各种疾病的治疗上让人们看到了希望。 干细胞技术是当今医学研究最前沿也是最热门的方向之一，近
脐血脐带中干细胞分离实验
实验方法原理 实验材料 脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)试剂、试剂盒 灭菌起始培养基扩增培养基0.05%的胰蛋白酶含EDTAPBSA仪器、耗材 T25培养瓶实验步骤 (a)制备和分离脐带血来源的MNCs(CB-MNCs)。(b)如果使用冻存的CB-MNCs,复苏的细胞可以用于培养，不需要其他分
脐血脐带中干细胞分离实验
非限制性体干细胞（unrestricted somatic stem cells，USSCs)的分离 脐血来源胚胎样干细胞（cord blood-derived embryonic-like stem cells，CBEs)的分离 脐血来源多能前体细胞（cor
脐血脐带中干细胞分离实验
非限制性体干细胞（unrestricted somatic stem cells，USSCs)的分离脐血来源胚胎样干细胞（cord blood-derived embryonic-like stem cells，CBEs)的分离脐血来源多能前体细胞（cord blood-derived multip
脂肪干细胞培养
吸脂术时用无菌针管从臀上方吸取深层脂肪组织20 mL. 在1 h内将其移至离心管内，加入等量PBS缓冲液，充分振荡后低速离心800 r/min×10 min. 反复冲洗3次后加入等量15 g/L I型胶原酶. 37℃水浴中充分振荡30 min，再加入等量胎牛血清（FBS）中止. 低速离心10
基于粘附力的新型干细胞分离技术
近日，美国佐治亚理工学院、ARUNA生物医学公司以及密歇根大学等机构的研究人员开发出了一种名为µSHEAR（micro stem cell high-efficiency adhesion-based recovery）的新型干细胞分离技术，这一技术依据的是细胞间容易区分的粘附力物理差异。相关研