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侧群干细胞(sp细胞)的分离与分选

准备工作: DF12 加入0.1%BSA,100ml,取10ml冰浴,40ml放入孵箱;其余的放入4度; DNase I 100*; PI:50ug/ml; Hoechst33342: 1000ug/ml(all from Sigma) 计数板,冰盒;各种离心管,无菌流式管(BD),400滤网(BD) 染色方案: ① 细胞染色: 细胞消化计数,用DF12重悬,调整到1×106/ml浓度,分成三组2管; 37℃DF12洗涤,制备成单细胞悬液; 两组均加入荧光染料Hoechst33342,使终浓度为6 ug/ml,其中CON组再加入维拉帕米,终浓度50 umol/......阅读全文

侧群干细胞(sp细胞)的分离与分选-2

这是我收集的SP分选的方法:与大家共享。 一 Hoechst染色方案 1. 在37℃循环水浴箱中预热DMEM+培养基。确保温度为37℃。 2. 重悬细胞于预热的DMEM+培养基中,浓度为106/ml,为了避免细胞留在试管中,所以在Hoech