微量全血直接荧光染色法流式细胞术样品制备实验
实验步骤目前制备全血细胞样品的方法很多，且很成熟，常用的方法是用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞，然后进行特异性荧光染色，其染色方法与前面介绍的方法相同。下面主要介绍与流式细胞仪配套的Q-PREP（免疫学样品处理器）进行快速制备微量全血样品的方法。1. 取肝素或EDTA抗凝全血（100μl/份），置12×75mm专用塑料试管中。2. 每份加入20μl特异性荧光单抗，另一份加入荧光标记的无关单抗作同型对照，室温下避光染色15min。3. 置 Q-PREP 仪上溶解红细胞、稳定和固定白细胞，静置5min。4. 上流式细胞仪检测。展开......阅读全文
全温空气摇床生物样品的培养制备
全温空气摇床生物样品的培养制备 全温空气摇床，是一种温度可控的培养箱和大容量振荡器有机结合的高精度实验室设备，箱内增设循环风机强迫空气循环，温度分布更均匀，实验效果更好，具有光照与无光照两种规格，实验室设备全温摇床适用于液体微生物在一定温度下的振荡培养，控温精确，振荡速度平稳，同时具有温度
全温空气摇床生物样品的培养制备
全温空气摇床，是一种温度可控的培养箱和大容量振荡器有机结合的高精度实验室设备，箱内增设循环风机强迫空气循环，温度分布更均匀，实验效果更好，具有光照与无光照两种规格，实验室设备全温摇床适用于液体微生物在一定温度下的振荡培养，控温，振荡速度平稳，同时具有温度、速度数字显示功能，运行状态清晰直观，是实验室
支原体的检测实验_荧光染色法
实验方法原理荧光显微镜检查法，荧光染料用 Hoechst 33258，它是一种能与DNA 特异结合的荧光染料。支原体内含有DNA，能着色，是现有检测法中最方便和最有效的一种。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks醋酸甲醇蒸馏水仪器、耗材盖片显微镜实验步骤1. 标本盖片培养细胞汇合前从瓶中取出（如细胞已
流式细胞仪检测全血的人淋巴细胞
实验步骤基本方案材 料（打 V 项 目 见 附 录 1)全血，通 常 用 E D T A 抗凝P B S ，有 或 无 0.1% (m /V ) 叠氮钠，过滤除菌单 克 隆 抗 体（标记的，未标记的或生物素化的），通过滴定确定最佳工作浓度间 标 二 抗（仅用于未标记的一抗）F T T C 标记的链霉
流式细胞仪检测全血的人淋巴细胞
基本方案材 料（打 V 项 目 见 附 录 1)全血，通 常 用 E D T A 抗凝P B S ，有 或 无 0.1% (m /V ) 叠氮钠，过滤除菌单 克 隆 抗 体（标记的，未标记的或生物素化的），通过滴定确定最佳工作浓度间 标 二 抗（仅用于未标记的一抗）F T T C 标记的链霉亲和素或
X荧光样品制备中物理富集技术
1)蒸发和冷冻干燥生物组织试样常用的干燥方法是冷冻干燥法,让生物样品在冷冻状态下用真空泵将水抽干。其优点是样品在处理过程中不会被污染,待测元素不因挥发而损失,但设备昂贵、费时。也可以采用放在氧等离子体低温干燥箱中灰化,低温等离子是气体在低压于高频电场的作用下产生的,在这种情况下,由于分子或原子间的间
X射线荧光分析液体样品的制备
液体样品可直接放在液体样品杯中进行直接测定，所用液体体积尽可能达到无限厚，体积应保持恒定。样品杯由不锈钢、聚四氟乙烯等材料制成，并用厚度为几个微米的聚酯、聚乙烯、聚丙烯等薄膜作为支撑保护。 液体样品也可以经富集，再将其转移到滤纸片、 Mylar膜或聚四氟乙烯基片上，经物理浓缩，使分析物成固体残
X荧光样品制备中化学富集技术
化学富集法有沉淀-共沉淀法、电沉积法、离子交换、液一液萃取法、鳌合一固定法和色层法等。 1)沉淀法螯合物沉淀法(DDTC法)是使溶液中的各金属阳离子与螯合物试剂反应后沉淀过滤,鳌合物沉淀剂常用的有DDTC(铜试剂)、PAN(1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚),8-羟基喹啉,其特点是均可与近20种元素产
X荧光制样之液体样品制备
上一章节讲解完固体样品制备大家应该都会有所了解了，下面给大家讲一下液体样品的制备要求。 液体样品可直接放在液体样品杯中进行直接测定，所用液体体积尽可能达到无限厚，体积应保持恒定。样品杯由不锈钢、聚四氟乙烯等材料制成，并用厚度为几个微米的聚酯、聚乙烯、聚丙烯等薄膜作为支撑保护。 液体样
免疫胶体金技术3
为了得到颗粒均一的免疫金试剂，可将上述初步纯化的结合物再进一步用10％～30％蔗糖或甘油进行密度梯度离心,分带收集不同梯度的胶体金与蛋白的结合物。（2）凝胶过滤法：此法只适用于以BSA作稳定剂的胶体金蛋白结合物的纯化。将胶体金蛋白结合物装入透析袋，在硅胶中脱水浓缩至原体积的 1／5～1／10。再
使用荧光底物的直接－ELISA－实验
实验概要使用荧光偶联一抗的直接 ELISA 测定的程序。实验步骤第 1 天：1. 在滤过的 PBS 中稀释包被抗体后，在每孔中加入 100 μl 进行包被。用封板膜覆盖酶标板，将酶标板在 4℃下孵育过夜。 第 2 天：2. 将 4 g Block ACE 粉末稀释于 100 ml 去离子水中，使用其
简介流式细胞术实验样本的保存
样本的保存：理想状态下，样本应在采集后立刻进行处理和染色。肝素抗凝的血和骨髓通常可保存至48-72小时/室温（16-25）；EDTA抗凝的外周血和骨髓可保存12-24小时/室温（16-25）；ACD抗凝的外周血可保存至72小时/室温（16-25）；对于只作胞内染色的样本，可固定细胞以长期保存。但
师兄攻略：流式细胞术第一期
流式细胞仪和流式细胞术指南篇历史从 1968 年最早的商品化流式细胞术 (FC) 和荧光激活细胞分类术 (FACS) 诞生以来, 它们已得到大大改进。但要成为实验室广泛接受的技术，除成本因素外，还存在不少障碍。技术上的问题主要是细胞内低丰度分子的检测，缺少「通用」细胞通透物质，细胞自发荧光的干扰效应
常规血液分析标准化的进展及质量管理
数十年来，国际血液学标准化委员会（ICSH）先后推荐了血红蛋白测定（J Clin Pathol,1996年），血细胞压积（J Clin Pathol,1980年）和红细胞、白细胞计数（Clin Lab Haematol,1994年）的参考方法。由于种种原因，血小板计数的参考方法直到2001年才正式公
常规血液分析标准化的进展及质量管理（一）
数十年来，国际血液学标准化委员会（ICSH）先后推荐了血红蛋白测定（J Clin Pathol,1996年），血细胞压积（J Clin Pathol,1980年）和红细胞、白细胞计数（Clin Lab Haematol,1994年）的参考方法。由于种种原因，血小板计数的参考方法
流式细胞术
一. 流式细胞术概述流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)是七十年代发展起来的高科学技术,它集计算机技术、激光技术、流体力学、细胞化学、细胞免疫学于一体, 同时具有分析和分选细胞功能。它不仅可测量细胞大小、内部颗粒的性状,还可检测细胞表面和细胞浆抗原、细胞内DNA、RNA含量等,可对
淋巴细胞分化抗原检测的操作方法
1.免疫组织化学染色法 （1）免疫荧光显微技术：使荧光抗体与细胞表面的淋巴细胞分化抗原进行反应，洗涤除去游离的荧光抗体后，在荧光显微镜下观察。 （2）免疫金银染色技术：利用胶体金标记淋巴细胞分化抗原对应的特异性抗体，通过免疫反应使胶体金颗粒沉积在抗原位置，加入银显影液，用对苯二酚将银离子还原
淋巴细胞分化抗原检测的操作方法
1.免疫组织化学染色法 （1）免疫荧光显微技术：使荧光抗体与细胞表面的淋巴细胞分化抗原进行反应，洗涤除去游离的荧光抗体后，在荧光显微镜下观察。 （2）免疫金银染色技术：利用胶体金标记淋巴细胞分化抗原对应的特异性抗体，通过免疫反应使胶体金颗粒沉积在抗原位置，加入银显影液，用对苯二酚将银离子还原
T淋巴细胞分化抗原检测的操作方法
1.免疫组织化学染色法 （1）免疫荧光显微技术：使荧光抗体与细胞表面的T淋巴细胞分化抗原进行反应，洗涤除去游离的荧光抗体后，在荧光显微镜下观察。 （2）免疫金银染色技术：利用胶体金标记T淋巴细胞分化抗原对应的特异性抗体，通过免疫反应使胶体金颗粒沉积在抗原位置，加入银显影液，用对苯二酚将银离子
T淋巴细胞分化抗原检测的操作方法
1.免疫组织化学染色法 （1）免疫荧光显微技术：使荧光抗体与细胞表面的T淋巴细胞分化抗原进行反应，洗涤除去游离的荧光抗体后，在荧光显微镜下观察。 （2）免疫金银染色技术：利用胶体金标记T淋巴细胞分化抗原对应的特异性抗体，通过免疫反应使胶体金颗粒沉积在抗原位置，加入银显影液，用对苯二酚将银离子
流式细胞术怎么调节荧光补偿FITC/PE/PerCP/APC
现在的机器都是自动调节，不过也要做好准备工作。我大致说一下原理。做补偿调节，需要以下的样本，无任何染色的样本，分别是FITC， PE， PerCP还有APC单染阳性的样本，所以你这里需要一共5个管子。在纯手工的年代，你需要画出这四个颜色两两配对的散点图，比如FITC-PE， FITC-PerCP，
X射线荧光分析固体样品的制备介绍
固体样品包括粉末样品、固体金属和非金属样品、固体块状样品。对于固体样品，可以采取将其制成溶液后按液体样品方式测定的方法，也可以直接以固体形态进行测定。而对于金属样品一般直接取样分析。 粉末样品制样方式比较多，通常采取压片法和熔融法。两者各有优缺点，压片法操作简便快捷但是干扰严重，测量精密度和准
人全血Foxp3实验步骤
需要试剂Human Regulatory T Cell Whole Blood Staining Kit （#88-8996-40）包含组分：(1)、1X RBC Lysis Buffer: 200 mL (2)、Flow Cytometry Staining Buffer: 600 mL (3)、
微量制备毛细管电泳实验
实验方法原理 实验材料 多肽：ACTH 4-10试剂、试剂盒 血管紧缩素I和血管紧缩素II 0.05 mmol／L 和 0.25 mmol／L 磷酸钠缓冲液(pH 2.30 存储于 4℃)0.1 mol／L 氢氧化钠仪器、耗材 75 μm 内径的融合硅毛细管柱CE 仪器锥形微量瓶实验步骤 1. 低压
微量制备毛细管电泳实验
多次分离 单次分离 实验方法原理 实验材料 多肽：ACTH 4-10
流式细胞仪标本制备荧光标记法
实验方法原理活细胞免疫荧光技术是用于FCM检测的标本准备，染色后也能在荧光显微镜下进行观察，在某些实验条件下，活细胞免疫荧光染色后的特异性和敏感性要优于滴片固定的常规间接免疫荧光的结果。活细胞表面保留有较完整的抗原或受体，先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合，再用荧光标记的第二抗体结合，
流式细胞术实验去除红细胞的方法
红细胞裂解法，操作简单、快、并最可能保持原始标本的白细胞分布。最好在染色后溶血。若在染色前溶血，需确认：（1）抗原性不被溶血过程改变；（2）溶血剂被彻底洗去，细胞和抗体结合的动力反应未受影响；（3）所用溶血剂不含固定剂，否则会影响细胞活性及表面标记结果。密度梯度离心法，靶细胞回收较好并可能得到富
流式细胞术实验样本的质量控制
用于流式分析的样本种类很多，包括外周血、骨髓穿刺液、骨髓活检物、组织活检物、浆膜腔积液、脑脊液、皮肤、黏膜（内窥镜活检物）、细针穿刺物等等。样本的条件控制可能是免疫表型分析质控最困难的环节之一。每种样本都有不同的采集、保存、运输和制备要求。观测样本外观：有严重溶血、凝聚或坏死的样本应弃用。
流式细胞术测效靶细胞杀伤实验
做免疫学特别是肿瘤学实验，总免不了要测淋巴细胞或其他细胞对肿瘤细胞的杀伤，老外最常用的是Cr51放射实验，但这个方法在国内的不少地方都不能做，而MTT这个方法又太老了，而且也不准确，那么替代方法就用流式细胞术，又方便，又准确，这也是偶参照老外的方法吧。1 计数靶细胞，并加入CFSE，使CFSE终浓度
核酸透射电镜样品制备实验——核酸样品
实验方法原理很多球状蛋白均能在水溶液或盐溶液的表面形成不溶的变性薄膜，在适当的条件下这一薄膜可以成为单分子层，由伸展的肽链构成为一个分子网。当核酸分子与该蛋白质单分子膜作用时会由于蛋白质的氨基酸碱性侧链基团的作用，使得核酸从三维空间结构的溶液构型吸附于肽链网而转化为二维空间的构型，并从形态到结构均能