四膜虫细胞核的分离实验

实验材料细胞试剂、试剂盒辛醇PMSF仪器、耗材搅拌机光学显微镜实验步骤1. 检测所用细胞数量。2. 收获细胞前在冷环境中强力搅拌时,在所有溶液中加入蛋白酶抑制剂。3. 在培养基 A 中加入辛醇,混合均匀。在培养基 A 中加入辛醇和 PMSF,即为培养基 B。4. 用吊桶式转头在 250 ml 的圆锥离心瓶中于 2℃,1500~2000 g 离心 5 分钟收获细胞。5. 快速倒出上清,搅拌松动沉淀。6. 直接在培养基 B 中重悬沉淀细胞。细胞破碎7. 在冷的搅拌机中高速搅切 30~60 秒破碎细胞。8. 用光学显微镜检查匀浆物,载玻片上放少量匀浆物,加上甲基绿。保证小核已从其临近大核的“杯状”处被移去。差异核片状沉淀9. 将搅拌过的细胞倒入圆锥形离心瓶中,用吊桶式转头在 0~4℃ 于 1500~2000 g 离心 5 分钟。可用 50~250 ml 的离心瓶。10. 轻微摇动瓶,使上清表面形成的表层松动,将上清和表层倒入冷的搅切机......阅读全文

耐热四膜虫的电穿孔转化实验

实验材料 抗生素抗性细胞试剂、试剂盒 Tris抗生素复合物 HEPES仪器、耗材 烧瓶Cormung 塑料圆锥形试管实验步骤 1. 培养适当的 2 种不同交配型的抗生素抗性细胞到对数期。2. 以约 2X105 细胞/ml,在 10 mmol/L pH 7.5 的 Tris 中洗涤细胞,常规交配使细胞

四膜虫的营养生长实验

实验材料培养物仪器、耗材培养基培养瓶实验步骤1. 准备 1 L 10X 培养基;使用前稀释到 1X,并高压灭菌。2. 将 0.5~2 ml 的保存培养物无菌转入装有 50 ml 培养基的 125 ml 培养瓶中,用铝箔或灭菌的裹有干酪布的棉絮塞子盖上培养瓶。3. 通气培养生长。

四膜虫的营养生长实验

四膜虫的营养生长             实验材料 培养物 仪器、耗材

四膜虫的营养生长实验

四膜虫的营养生长             实验材料 培养物 仪器、耗材

四膜虫的营养生长实验

实验材料 培养物仪器、耗材 培养基培养瓶实验步骤 1. 准备 1 L 10X 培养基;使用前稀释到 1X,并高压灭菌。2. 将 0.5~2 ml 的保存培养物无菌转入装有 50 ml 培养基的 125 ml 培养瓶中,用铝箔或灭菌的裹有干酪布的棉絮塞子盖上培养瓶。3. 通气培养生长。

耐热四膜虫的电穿孔转化实验

实验材料抗生素抗性细胞试剂、试剂盒Tris抗生素复合物HEPES仪器、耗材烧瓶Cormung 塑料圆锥形试管实验步骤1. 培养适当的 2 种不同交配型的抗生素抗性细胞到对数期。2. 以约 2X105 细胞/ml,在 10 mmol/L pH 7.5 的 Tris 中洗涤细胞,常规交配使细胞饥饿 6~

耐热四膜虫的电穿孔转化实验

耐热四膜虫的电穿孔转化             实验材料 抗生素抗性细胞 试剂、试剂盒

耐热四膜虫的电穿孔转化实验

            实验材料 抗生素抗性细胞 试剂、试剂盒 Tris 抗生素复合物 HEPES

四膜虫的保存实验—四膜虫在保存培养基中的长期贮存

实验材料细胞仪器、耗材聚苯乙烯培养瓶保存培养基实验步骤1. 在聚苯乙烯培养瓶中加入少量保存培养基。为了保持细胞适量的通气,培养基深度不应超过 0.5 cm。2. 将少许健康细胞无菌转入含培养基的培养瓶中。3. 轻微地旋上帽,25~26℃ 孵育。

四膜虫的保存实验—四膜虫在大豆培养基中长期贮存

实验材料大豆试剂、试剂盒蒸馏水石蜡油仪器、耗材培养试管实验步骤1. 在大的培养试管中装入 10 ml 蒸馏水,1 粒大豆,高压灭菌。将浑浊或水分蒸干的试管弃掉。2. 将少许健康细胞无菌转入大豆培养基中。3. 室温生长 1~3 天,直到靠近培养基表面有 1 层细胞。如需要,可使用抗生素和/或杀真菌剂。

差速离心分离植物(动物)细胞核

线粒体和细胞核的制备与观察利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异,可采取分级差速离心的方法,将细胞核与线粒体逐级分离出来。(差速离心技术)线粒体是真核细胞特有的进行能量转换的重要细胞器。将动植物组织制成匀浆,在适当的悬浮介质中差速离心法可以分离细胞线粒体。在一定的离心场中(选用离心机的一定转

差速离心分离植物(动物)细胞核

线粒体和细胞核的制备与观察利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异,可采取分级差速离心的方法,将细胞核与线粒体逐级分离出来。(差速离心技术)线粒体是真核细胞特有的进行能量转换的重要细胞器。将动植物组织制成匀浆,在适当的悬浮介质中差速离心法可以分离细胞线粒体。在一定的离心场中(选用离心机的一定转

植物(动物)细胞核差速离心分离

线粒体和细胞核的制备与观察利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异,可采取分级差速离心的方法,将细胞核与线粒体逐级分离出来。(差速离心技术)线粒体是真核细胞特有的进行能量转换的重要细胞器。将动植物组织制成匀浆,在适当的悬浮介质中差速离心法可以分离细胞线粒体。在一定的离心场中(选用离心机的一定转

分离的细胞核的染色质的微球菌核酸酶消化实验

实验材料动物组织 [如肝、肾和(或)脾]试剂、试剂盒核缓冲液 A、B、C无 Ca 和 Mg 离子(CMF) 的 PBSNaOH2×TNESK 溶液CaCl2微球菌核酸酶(MNase) 储液仪器、耗材剃刀刀片或解剖刀培养皿带有聚四氟乙烯包被的磨棒的组织匀浆器电动组织磨碎机相差显微镜轻薄棉布玻璃离心管(

分离的细胞核的染色质的微球菌核酸酶消化实验

实验方法原理 实验材料 动物组织 [如肝、肾和(或)脾]试剂、试剂盒 核缓冲液 A、B、C 无 Ca 和 Mg 离子(CMF) 的 PBSNaOH 2×TNESK 溶液CaCl2微球菌核酸酶(MNase) 储液仪器、耗材 剃刀刀片或解剖刀培养皿带有聚四氟乙烯包被的磨棒的组织匀浆器电动组织磨碎机 相差

细胞核连缀分析实验_体外细胞核连缀反应

实验材料组织试剂、试剂盒EDTASDS蛋白酶 K仪器、耗材玻璃试管实验步骤1. 融解从 1 g 组织或 5 瓶培养皿细胞制备、冻存于 NSB 中的细胞核。1000 g 离心 5 分钟,去上清,用 200 μl HRB 轻轻吹打重悬。2. 将悬液转至一个带有抗酚螺帽的硅化玻璃试管,37℃ 水浴 5 到

细胞核连缀分析实验

从组织中制备细胞核体外细胞核连缀反应体外细胞核连缀反应产物的分析实验材料动物组织                                                          试剂、试剂盒PBS                                          

细胞核连缀分析实验

从组织中制备细胞核 体外细胞核连缀反应 体外细胞核连缀反应产物的分析             实验材料 动物组织

细胞核连缀分析实验_从组织中制备细胞核

实验材料动物组织试剂、试剂盒PBS蔗糖仪器、耗材电动匀浆器特氟隆研杵实验步骤一、用超速离心法从组织中分离细胞核1. 切下动物组织,放入置于冰上的平皿中,用冰冷的 PBS 冲洗。2. 加少量蔗糖Ⅰ溶液,用剪刀或剃须刀片将组织切碎,转入一个干净试管中,加蔗糖Ⅰ溶液至终体积为每克组织 10 ml。3. 用

性途径(结合)诱导实验

性途径(结合)诱导             实验材料 四膜虫 试剂、试剂盒

性途径(结合)诱导实验

            实验材料 四膜虫 试剂、试剂盒 Tris 仪器、耗材

性途径(结合)诱导实验

实验材料四膜虫试剂、试剂盒Tris仪器、耗材培养基培养瓶实验步骤培养物准备1. 每种交配型都在装有 100 ml 培养基的 1 L 培养瓶中接种 5 ml 最近转接过的短期贮存的四膜虫,用铝箔或棉絮塞子盖上培养瓶。2. 30℃ 培养至对数后期,通常这一培养为静止培养。在此条件下,细胞将在 24 小时

细胞核连缀分析实验_体外细胞核连缀反应产物的分析

实验材料环状质粒 DNA试剂、试剂盒氢氧化钠SSPE预杂交缓冲液仪器、耗材狭线印迹装置实验步骤一、狭线印迹的制备1. 如果用的是环状质粒 DNA,用适当的限制酶使 DNA 探针线性化。每个狭线需用 5 μg DNA。2. 往线性 DNA 溶液中加氢氧化钠至 0.1 mol/L,混匀,室温放置 30

分离核仁实验——分离核仁

实验材料肝脏试剂、试剂盒NKM仪器、耗材粗孔滤纸Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 制备溶液:NKM:0.13 mol/L NaCl,5 mmol/L KCl,8 mmol/L MgCl20.34 mol/L 蔗糖,3 mmol/L MgCl22.3 mol/L 蔗糖,10 mmol/L MgCl

科学家发现“七性生物”:7种性别随机形成

        如果你认为两性之间的战争很复杂,那要是有7种性别该怎么办呢?   当覆盖在纤毛上的单细胞生物——四膜虫交配时,其后代的性别可能和其父母的性别都不一样——有7种可能的性别。   目前,研究人员发现了四膜虫中决定其后代性别的复杂DNA特性,并确认了性别形成是随机的。   研究人员将

高速冷冻离心机在分离细胞核基质中的应用

 核基质是指真核细胞间核中除核被膜、染色体和核仁以外的一个精密网架系统,既包含蛋白质,又包含RNA。核基质是从纯化的细胞核中分离的。要用去污剂、核酸酸处理细胞核。以分离核基质的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。 本文介绍1986年Comerford使用过的分离细胞核基质的方法和步骤。 1. 大鼠肝脏

高速冷冻离心机在分离细胞核基质中的应用

   核基质是指真核细胞间核中除核被膜、染色体和核仁以外的一个精密网架系统,既包含蛋白质,又包含RNA。核基质是从纯化的细胞核中分离的。要用去污剂、核酸酸处理细胞核。以分离核基质的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。本文介绍1986年Comerford使用过的分离细胞核基质的方法和步骤。1. 大鼠肝脏

高速冷冻离心机在分离细胞核基质中的应用

 核基质是指真核细胞间核中除核被膜、染色体和核仁以外的一个精密网架系统,既包含蛋白质,又包含RNA。核基质是从纯化的细胞核中分离的。要用去污剂、核酸酸处理细胞核。以分离核基质的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。本文介绍1986年Comerford使用过的分离细胞核基质的方法和步骤。1.   大鼠肝脏

高速冷冻离心机在分离细胞核基质中的应用

核基质是指真核细胞间核中除核被膜、染色体和核仁以外的一个精密网架系统,既包含蛋白质,又包含RNA。核基质是从纯化的细胞核中分离的。要用去污剂、核酸酸处理细胞核。以分离核基质的每一步中抑制核酸酶的活性非常重要。 本文介绍1986年Comerford使用过的分离细胞核基质的方法和步骤。 1. 大鼠肝脏(

HeLa-细胞核提取物的制备实验

试剂、试剂盒 甘油液氮MgCl2•6 H2O硫酸铵HeLa 细胞磷酸缓冲盐溶液(PBS) 缓冲液 G缓冲液 H 缓冲液 DTM 缓冲液+0.1 ml L KCl实验步骤 材料HeLa 细胞(培养和保存条件见下文。我们也成功地使用过 CellexBiosciences 公司制备并冷冻的 HeLa 细胞