四膜虫细胞核的分离实验
实验材料细胞试剂、试剂盒辛醇PMSF仪器、耗材搅拌机光学显微镜实验步骤1. 检测所用细胞数量。2. 收获细胞前在冷环境中强力搅拌时，在所有溶液中加入蛋白酶抑制剂。3. 在培养基 A 中加入辛醇，混合均匀。在培养基 A 中加入辛醇和 PMSF，即为培养基 B。4. 用吊桶式转头在 250 ml 的圆锥离心瓶中于 2℃，1500~2000 g 离心 5 分钟收获细胞。5. 快速倒出上清，搅拌松动沉淀。6. 直接在培养基 B 中重悬沉淀细胞。细胞破碎7. 在冷的搅拌机中高速搅切 30~60 秒破碎细胞。8. 用光学显微镜检查匀浆物，载玻片上放少量匀浆物，加上甲基绿。保证小核已从其临近大核的“杯状”处被移去。差异核片状沉淀9. 将搅拌过的细胞倒入圆锥形离心瓶中，用吊桶式转头在 0~4℃ 于 1500~2000 g 离心 5 分钟。可用 50~250 ml 的离心瓶。10. 轻微摇动瓶，使上清表面形成的表层松动，将上清和表层倒入冷的搅切机......阅读全文
四膜虫细胞核的分离实验
四膜虫细胞核的分离 实验材料 细胞 试剂、试剂盒
四膜虫细胞核的分离实验
四膜虫细胞核的分离 实验材料 细胞 试剂、试剂盒
四膜虫细胞核的分离实验
实验材料细胞试剂、试剂盒辛醇PMSF仪器、耗材搅拌机光学显微镜实验步骤1. 检测所用细胞数量。2. 收获细胞前在冷环境中强力搅拌时，在所有溶液中加入蛋白酶抑制剂。3. 在培养基 A 中加入辛醇，混合均匀。在培养基 A 中加入辛醇和 PMSF，即为培养基 B。4. 用吊桶式转头在 250 ml 的圆锥
四膜虫细胞核的分离实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 辛醇PMSF仪器、耗材 搅拌机光学显微镜实验步骤 1. 检测所用细胞数量。2. 收获细胞前在冷环境中强力搅拌时，在所有溶液中加入蛋白酶抑制剂。3. 在培养基 A 中加入辛醇，混合均匀。在培养基 A 中加入辛醇和 PMSF，即为培养基 B。4. 用吊桶式转头在 250 ml
单位重力沉降法纯化四膜虫细胞核实验
单位重力沉降法纯化四膜虫细胞核 实验材料 细胞核 试剂、试剂盒 PMSF 仪器、耗材 培养基
单位重力沉降法纯化四膜虫细胞核实验
实验材料 细胞核 试剂、试剂盒 PMSF 仪器、耗材
单位重力沉降法纯化四膜虫细胞核实验
实验材料细胞核试剂、试剂盒PMSF仪器、耗材培养基有机玻璃容器实验步骤1. 准备细胞核。2. 准备修订培养基，当在冷的条件下强力混合培养基时，在所有修订培养基中加入终浓度为 1 mmol/L 的 PMSF。3. 用 H2O 按 1:1 稀释 2% 修订培养基 7.5 ml。4. 将带有夹子的柔性管连
原代细胞核膜分离实验
实验概要本实验介绍了原代细胞核膜分离的实验操作流程。主要试剂1. DNA酶Ⅰ；2. KCl(1mol/L溶于20mmol/L Tris-HCl，pH7.4)；3. MgCl2(1mol/L储存液)；4. 苯甲基磺酰氟(PMSF)(无水乙醇配制的1mol/L储存液)；5. 纯化的细胞核；6. 缓冲液：
细胞核的分级分离实验
实验材料小白鼠试剂、试剂盒蔗糖氯化钙溶液甲苯胺兰染液詹纳斯绿B染液NaCl溶液仪器、耗材玻璃匀浆器离心机天平光学显微镜载玻片盖玻片离心管滴管量筒烧杯玻璃漏斗解剖剪镊子实验步骤1. 用颈椎脱位的方法处死小白鼠后，迅速剖开腹部取出肝脏，剪成小块（去除结缔组织）尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯中，反复
细胞核的分级分离实验
实验材料 小白鼠试剂、试剂盒 蔗糖氯化钙溶液甲苯胺兰染液詹纳斯绿B染液NaCl溶液仪器、耗材 玻璃匀浆器离心机天平光学显微镜载玻片盖玻片离心管滴管量筒烧杯玻璃漏斗解剖剪镊子实验步骤 1. 用颈椎脱位的方法处死小白鼠后，迅速剖开腹部取出肝脏，剪成小块（去除结缔组织）尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯
细胞核的分级分离实验
实验材料小白鼠 试剂、试剂盒蔗糖 氯化钙溶液
四膜虫的保存实验——四膜虫的冷冻
实验材料细胞试剂、试剂盒Tris仪器、耗材培养基实验步骤1. 在培养基中将细胞培养至对数生长中期。如需要，可使用抗生素和/或杀真菌剂。2. 在 pH 7.4 的 10 mmol/L Tris 中低速离心轻洗细胞 1 次，弃上清，低速离心重悬细胞，弃上清。3. 用 10 mmol/L Tris 重悬细
原代细胞核膜的分离
1. DNA酶Ⅰ；2. KCl（1mol/L溶于20mmol/L Tris-HCl，pH7.4）；3. MgCl2（1mol/L储存液）；4. 苯甲基磺酰氟（PMSF）（无水乙醇配制的1mol/L储存液）；5. 纯化的细胞核；6. 缓冲液：2mmol/L Tris-HCl，pH7.4；7. 膜悬浮缓
原代细胞核膜的分离
试剂和器材： 1. DNA酶Ⅰ；2. KCl（1mol/L溶于20mmol/L Tris-HCl，pH7.4）；3. MgCl2（1mol/L储存液）；4. 苯甲基磺酰氟（PMSF）（无水乙醇配制的1mol/L储存液）；5. 纯化的细胞核；6. 缓冲液：2mmol/L Tris-HCl，pH7.4；
细胞核的预先分离
实验材料细胞试剂、试剂盒PBSRSB 缓冲液仪器、耗材医用台式离心机Dounce 匀浆器实验步骤1. 在 4℃ 用 PBS 清洗细胞，用一医用台式离心机低速离心。然后用含 Tween 40 和 DOC 的 RSB 缓冲液悬浮沉淀。每 107 个细胞用 1 ml 缓冲液。用 0.002 英寸间隙的 D
四膜虫的保存实验——四膜虫的短期贮存
实验材料健康细胞试剂、试剂盒蛋白酶胨仪器、耗材培养试管实验步骤1. 将少许健康细胞无菌转入装有 5 ml 无菌的 0.1 mg/ml 蛋白酶胨的带旋帽的培养试管中。2. 将试管帽旋松，在室温下垂直保存细胞。
四膜虫的保存实验—冷冻四膜虫的融解
实验材料细胞仪器、耗材培养基冷冻管实验步骤1. 将 25~50 ml 培养基预热至 30℃。2. 将冷冻管放入 38~40℃ 的热水浴中搅拌，快速温暖细胞，直接加入一些预热的培养基。3. 一旦沉淀层松动，将其倒入装有预热培养基的培养瓶中。4. 30℃ 过夜孵育，中速振摇。5. 次日检测细胞生存力。
四膜虫的保存实验
四膜虫的短期贮存 四膜虫在保存培养基中的长期贮存 四膜虫在大豆培养基中长期贮存 四膜虫的冷冻 冷冻四膜虫的融解 实验材料
四膜虫的保存实验
四膜虫的短期贮存 四膜虫在保存培养基中的长期贮存 四膜虫在大豆培养基中长期贮存 四膜虫的冷冻 冷冻四膜虫的融解 实验材料
四膜虫的保存实验
实验材料 健康细胞试剂、试剂盒 蛋白酶胨仪器、耗材 培养试管实验步骤 1. 将少许健康细胞无菌转入装有 5 ml 无菌的 0.1 mg/ml 蛋白酶胨的带旋帽的培养试管中。2. 将试管帽旋松，在室温下垂直保存细胞。
分离核仁实验——HeLa细胞细胞核或核仁的制备
实验材料HeLa细胞试剂、试剂盒PBS仪器、耗材Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 准备溶液：PBSRSB-8 10 mmol/L Tris；10 mmoI/L NaCl，8 mmoI/L 乙酸镁，pH 7.4RSB 10 mmol/L Tris；10 mmol/L NaCl，1.5 mmol/L
细胞核的分离提取操作步骤
一、操作步骤1.用颈椎脱位的方法处死小白鼠后，迅速剖开腹部取出肝脏，剪成小块（去除结缔组织）尽快置于盛有0.9％NaCl的烧杯中，反复洗涤，尽量除去血污，用滤纸吸去表面的液体。2.将湿重约1g的肝组织放在小平皿中，用量筒量取8ml预冷的0.25mol／L蔗糖一0.003mol／L氯化钙溶液，先加少量
细胞核与线粒体的分级分离
实验概要通过细胞匀浆和离心的方法分级分离细胞的组分，以了解其原理及过程。实验原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过
细胞核与线粒体的分级分离
一、所需试剂及设备小白鼠、冰块、玻璃匀浆器、普通离心机、台式高速离心机、普通天平、光学显微镜、载玻片、盖玻片、刻度离心管、高速离心管、滴管、10ml量筒、25m1烧杯、玻璃漏斗、解剖剪、镊子、吸水纸、纱布、蜡盘、平皿、牙签。0.25moL/L蔗糖一0.003mol/L CaCl2溶液、1%甲苯胺
细胞核与线粒体的分级分离
一、原理 细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。 分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成
原代细胞核孔复合物的分离
试剂和器材： 1. 肝素；2. 苯甲基磺酰氟（PMSF）（溶于乙醇中配制成1mol/L储存液）；3. 纯化的核膜；4. 提取缓冲液（EB）：含1%（体积分数）Triton X-100的10mmol/L Tris-HCl，（pH7.4）、0.1mmol/L苯甲基磺酰氟；5. Tris缓冲液：2mmol
特定细胞类型标记的细胞核分离
从大量的植物或动物组织中分离出特异性的细胞类型是费力和棘手的。为了研究表观遗传学上的改变和在不同细胞系中不同表达的基因，如癌细胞与正常细胞，或者拟南芥中两种类型的表皮细胞(epidermal cell)，人们通常必须采用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,
细胞核与线粒体的分级分离
实验概要掌握细胞核与线粒体的分级分离的实验技术。实验原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级
细胞核与线粒体的分级分离
一、原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成为研究亚细胞成分的化
细胞核与线粒体的分级分离
一、原理 细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。 分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成为研究