特殊细胞培养实验_单细胞分离培养法
实验方法原理从理论上说各种培养细胞都可用以进行克隆培养。但实际上,初代培养细胞和有限细胞系(二倍体细胞)比较困难。无限细胞系、转化细胞系和肿瘤细胞等则比较容易。其原因是,当体内任何细胞被置于体外培养后,对培养环境都有一个适应过程。期间细胞对营养液具有同化作用,即从培养液中摄取营养的同时,也向培养液排出自己的代谢产物和其它一些物质,其中有排泄物,也有促细胞生长物质。有人称之为化学信使,具有促克隆细胞生长作用,实则为生长因子类物质。单细胞同化营养液能力不如群体细胞强;初代培养细胞、有限细胞系(二倍体细胞)不如无限细胞系、转化细胞和肿瘤细胞强。转化细胞和肿瘤细胞强的原因,可能与它们有自泌( Autocrine)和内泌(Endocrine),即自己合成生长因子能力有关。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶仪器、耗材离心机滤膜实验步骤一、适应性培养基1. 培养同源细胞(未克隆前时的同一细胞)至半汇合状态时,更换一次......阅读全文
神经胶质细胞培养实验_酶消化法
神经胶质细胞培养可以:(1)获得神经胶质细胞;(2)用于神经胶质细胞电生理特性,如膜电位、去极化等;(3)用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子,并能分泌多种神
神经胶质细胞培养实验_酶消化法
神经胶质细胞培养可以:(1)获得神经胶质细胞;(2)用于神经胶质细胞电生理特性,如膜电位、去极化等;(3)用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子,并能分泌多种神
细胞培养实验——贴壁细胞培养
实验材料冻存细胞试剂、试剂盒70% 乙醇PBS胰酶/EDTA仪器、耗材25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒,打开安瓿,用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起始培养基的 25 cm
细胞培养实验
贴壁细胞培养 悬浮细胞培养 实验方法原理 实验材料 冻存细胞
细胞培养实验
贴壁细胞培养 悬浮细胞培养 实验方法原理 实验材料 冻存细胞
细胞培养实验
实验方法原理 实验材料 冻存细胞试剂、试剂盒 70% 乙醇PBS胰酶/EDTA仪器、耗材 25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤 1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒,打开安瓿,用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起
单细胞培养技术的定义及介绍
单细胞培养(single cell culture)是指从植物器官、愈伤组织或悬浮培养物中游离出单个细胞,在无菌条件下,进行体外生长、发育的技术。人们分离和培养植物单细胞的设想和实践都比较早,但成功地进行单细胞培养是随着更有效的培养基的发展以及从愈伤组织悬浮培养物分离单细胞的专门技术的建立才实现的。
啤酒酵母培养生产单细胞蛋白实验_菌种培养法
实验方法原理单细胞蛋白是通过培养单细胞微生物获得的菌体蛋白质。酵母菌、丝状真菌、微型藻类及非病源细菌等单细胞微生物均可用于生产单细胞蛋白,其中酵母菌是生产单细胞蛋白的主要单细胞微生物。多种原料可用于生产单细胞蛋白,如秸秆、薯干、石油、甲烷等,特别是一些工业废水、废渣可用来生产单细胞蛋白饲料,废物利用
小鼠肝细胞培养实验——细胞培养技术
实验方法原理直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步,是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEMDMEM胰酶PBS仪器、耗材饭盒纱布小剪子小镊子大镊子大烧杯平皿研
结缔组织类细胞培养实验——巨噬细胞培养实验
实验方法原理巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。但属不繁殖型细胞群,难以长期生存,好的条件下仅能生活2~3 周,因之多用作初代培养。巨噬细胞也能建成无限细胞系;大多来自小鼠,如P388D-1、J774A.1、RAW
传代细胞培养实验
实验方法原理 当初代培养成功,细胞生长增殖形成单层细胞后,进而扩展汇合,占满一切空间,此时需要进行分离培养。这一操作称传代或再培养。如拖延传代,细胞会因增殖过度,培养基营养枯竭和代谢产物积累而发生中毒。80%汇合或刚汇合细胞是理想传代阶段。实验材料 细胞试剂、试剂盒 Hanks胰蛋白酶EDTA培养液
肿瘤细胞培养实验
肿瘤细胞培养实验 提高肿瘤细胞培养存活率和生长率的实验 实验方法原理 肿瘤组织及细胞在模拟体内生长环境的条件下、与一般组织细胞一样、也能够生长发育乃
羊水细胞培养实验
实验方法原理 羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞,可在体外培养用以检验胎儿核型。 试剂、试剂盒 碘酒 酒精 营养液
传代细胞培养实验
实验方法原理 当原代培养成功以后,随着培养时间的延长和细胞不断分裂,一方面细胞之间相互接触而发生接触性抑制,生长速度减慢甚至停止;另一方面培养基内的营养物不足和代谢物积累不利于细胞生长甚至发生中毒,如果不及时的减少细胞密度,细胞将逐渐衰老死亡
羊水细胞培养实验
实验方法原理 羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞,可在体外培养用以检验胎儿核型。试剂、试剂盒 碘酒酒精营养液血清秋水仙素醋酸甲醇仪器、耗材 棉签棉球镊子穿针培养瓶实验步骤 1. 抽取羊水无菌抽取羊水10~20 ml,立即注入无菌离心管中;2. 离心分离1000 转/分,离心10 分钟,去上清,留0.5
羊水细胞培养实验
实验方法原理羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞,可在体外培养用以检验胎儿核型。试剂、试剂盒碘酒酒精营养液血清秋水仙素醋酸甲醇仪器、耗材棉签棉球镊子穿针培养瓶实验步骤1. 抽取羊水无菌抽取羊水10~20 ml,立即注入无菌离心管中;2. 离心分离1000 转/分,离心10 分钟,去上清,留0.5 ml;
羊水细胞培养实验
羊水细胞培养实验实验方法原理羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞,可在体外培养用以检验胎儿核型。 试剂、试剂盒碘酒 酒精
传代细胞培养实验
实验方法原理当原代培养成功以后,随着培养时间的延长和细胞不断分裂,一方面细胞之间相互接触而发生接触性抑制,生长速度减慢甚至停止;另一方面培养基内的营养物不足和代谢物积累不利于细胞生长甚至发生中毒,如果不及时的减少细胞密度,细胞将逐渐衰老死亡。因此需要将培养物按照比例重新接种到新的培养器皿(瓶)内进行
肿瘤细胞培养实验
肿瘤细胞培养实验可用于:(1)研究肿瘤的发生机理;(2)研究生物学行为;(3)研究抗肿瘤药物。实验方法原理肿瘤组织及细胞在模拟体内生长环境的条件下、与一般组织细胞一样、也能够生长发育乃至繁殖、为研究癌变机理、抗癌药检测、肿瘤分子生物学提供大量的实验材料。实验材料肿瘤组织试剂、试剂盒培养液Hanks胰
肿瘤细胞培养实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 培养液Hanks胰蛋白酶EDTA胶原酶仪器、耗材 培养瓶离心管实验步骤 一、成纤维细胞排除法1. 机械刮除法 是用不锈钢丝末端插有橡胶刮头(用胶塞剪成三角形插以不锈钢丝),或裹少许脱脂棉制成,装入试管中高压灭菌后备用(也可用特制电热烧灼器刮除)。刮除程序为(1)标记镜下
猪甲状腺细胞培养实验_细胞培养技术
实验方法原理由于甲状腺富含纤维性组织,所以甲状腺的消化分离一般采用胶原酶与胰蛋白酶联合消化法,用单一的胰蛋白酶消化效果一般;促甲状腺激素(TSH)是培养甲状腺细胞必备的,它能够起到促进甲状腺细胞生长的作用。实验材料猪甲状腺试剂、试剂盒F-12培养基胎牛血清胰蛋白酶胶原酶Ⅳ牛 TSH仪器、耗材眼科剪滴
大鼠肝星状细胞培养实验——细胞培养技术
大鼠肝星状细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料雄性 SD 大鼠试剂、试剂盒戊巴比妥钠小牛血清DMEM
大鼠星型胶质细胞培养实验——酶消化法
大鼠星型胶质细胞培养可以:(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;(3)脑损伤和脑疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。实验方法原理大鼠星形胶质细胞原代培养后,作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定,应用缺氧D-Hanks'液及缺
小鼠胚胎干细胞培养实验——体外分化法
小鼠胚胎干细胞培养可以:(1)细胞保种;(2)用于干细胞研究;(3)用于细胞生理学、形态学等研究;(4)动物克隆。实验方法原理胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存在的情况下扩增(第4步)并最终分化在第5步
大鼠视神经少突胶质细胞培养实验——牛血清培养法
大鼠视神经少突胶质细胞培养可以:(1)获得大鼠视神经少突胶质细胞;(2)用于视神经损伤修复研究;(3)用于少突胶质细胞相关课题研究。实验方法原理采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行免疫组织化学鉴定。实验材料Wistar大鼠试剂、试剂盒亚硒酸钠腐胺转铁蛋白胰岛素甲状腺
肌组织细胞培养实验——心肌细胞培养实验
实验方法原理心肌组织是最早利用的培养材料,Carrel曾长期培养过鸡胚心肌组织,至今心肌仍不失为好的培养物。最常用的是鸡胚心肌、小鼠、大鼠以及人胎儿心肌等都可应用。心肌是比较容易培养和生长的组织,可应用多种方法进行培养,如悬滴培养、组织块培养和消化培养法等,主要取心室肌培养,均能获得良好的生长效果。
肌组织细胞培养实验——骨骼肌细胞培养实验
实验材料肌组织试剂、试剂盒Hanks胰蛋白酶血清胎汁仪器、耗材纱布实验步骤动物胚或幼体的大腿肌组织为最好的培养材料。取材常用生后1~2 天的乳鼠(Wistar 大鼠更好)。1. 杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5 厘米小块;2. 用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25 %胰蛋白酶消
肌组织细胞培养实验——神经组织细胞培养实验
实验方法原理神经组织主要由两种神经细胞(神经元)和神经胶质细胞组成。神经元为高度分化的细胞,在组织发生晚期已失掉增殖能力,对生存条件要求高,只有在适宜情况下,如接种在胶原底层上,或在加入神经生长因子(NGF)和胶质细胞因子时,才能生存,并可能出现一定程度的分化现象,如长出突起等,但却难使之增殖;即使
鸡胚胎成肌细胞的分离和培养实验——细胞培养物的制备
试剂、试剂盒HBSS胰酶溶液胶原溶液仪器、耗材解剖显微镜不锈钢深盘Dumom 5 号钳子柳叶刀精细弹簧剪纸巾大烧杯试管架移液管血细胞计数板实验步骤器材准备1. 在培养室实验台上放置下列物品:解剖显微镜表面和透射照明用的显微镜灯泡装有 70% 酒精的带盖不锈钢深盘Dumom 5 号钳子,至少两把柳叶刀
细胞生物基本方法:特殊培养法
特殊培养法1)二倍体细胞培养法二倍体细胞培养法与一般培养相同,关键在于传代,其传代程序为:1. 吸除旧培养液注入另瓶中。2. 用温BSS冲洗1次。3. 用0.25%温胰蛋白酶消化,加入消化液量以仅覆盖细胞层即可;作用1~5分钟。4. 待细胞附着松动、细胞质边缘