鸡胚胎成肌细胞的分离和培养实验——细胞培养物的制备
试剂、试剂盒HBSS胰酶溶液胶原溶液仪器、耗材解剖显微镜不锈钢深盘Dumom 5 号钳子柳叶刀精细弹簧剪纸巾大烧杯试管架移液管血细胞计数板实验步骤器材准备1. 在培养室实验台上放置下列物品:解剖显微镜表面和透射照明用的显微镜灯泡装有 70% 酒精的带盖不锈钢深盘Dumom 5 号钳子,至少两把柳叶刀 4 把精细弹簧剪一把洗瓶,内装 75% 酒精纸巾盛装废弃鸡蛋的大烧杯垫放培养皿的纸巾100 mm X 20 mm 的培养皿装有 Polytowel 的加盖不锈钢盘放大倍数 100 (物镜X目镜)的组合显微镜,计数细胞用2. 在培养室超净台上放置下列物品:本生灯可倾斜摆放 15 ml 试管的试管架盒子,内装:离心管,加有棉花塞的巴斯德吸管,吸球独立包装的移液管 1 ml、5 ml 和 10 ml泵血细胞计数板Hank 氏平衡盐溶液(HBSS)及无 Ca2+ 无 Mg2+ 的 HBSS2.5% 胰酶溶液2 个装有一半......阅读全文
鸡胚胎成肌细胞的分离和培养实验——细胞培养物的制备
试剂、试剂盒HBSS胰酶溶液胶原溶液仪器、耗材解剖显微镜不锈钢深盘Dumom 5 号钳子柳叶刀精细弹簧剪纸巾大烧杯试管架移液管血细胞计数板实验步骤器材准备1. 在培养室实验台上放置下列物品:解剖显微镜表面和透射照明用的显微镜灯泡装有 70% 酒精的带盖不锈钢深盘Dumom 5 号钳子,至少两把柳叶刀
鸡胚胎成肌细胞的分离和培养实验
细胞培养物的制备 试剂、试剂盒 HBSS 胰酶溶液 胶原溶液
鸡胚胎成肌细胞的分离和培养实验
细胞培养物的制备 试剂、试剂盒 HBSS 胰酶溶液 胶原溶液
原代细胞培养小鼠胚胎分离实验
原代细胞培养可应用于:(1)分子生物学;(2)细胞生物学;(3)遗传学;(4)免疫学;(5)肿瘤学;(6)病毒学等领域。实验方法原理原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物体内取出所需的组织(或器官),经胰酶消化,
原代细胞培养小鼠胚胎分离实验
鼠胚原代细胞培养 实验方法原理 原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物
原代细胞培养小鼠胚胎分离实验
鼠胚原代细胞培养 实验方法原理 原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验——分离培养细胞
骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞,可用于(1)肌细胞的结构研究(2)肌细胞功能研究(3)对肌细胞的相关课题研究(4)临床细胞移植。实验方法原理骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下,成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞,分
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验
分离培养细胞 实验方法原理 骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下,成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞,分
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验
实验方法原理 在添加 20%(fetal bovine serum, FBS) 的 Ham's F12 培养中,原代细胞容易生长。在不改变培养条件的情况下,这些细胞增殖和分化,融合形成多个细胞核的肌管。这证明培养的细胞具有成肌性。试剂、试剂盒 Ham F12FBSD-PBSA仪器、耗材 手术
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验
分离培养细胞 实验方法原理 骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下,成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞,分
小鼠胚胎干细胞培养实验
体外分化法 实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存
小鼠胚胎干细胞培养实验
实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存在的情况下扩增(第4步)并最终分化在第5步。细胞全程培养在37℃,5%CO2,100%湿度条件下。一般体外诱导向神经细胞方向分化,也可以采用低浓度的RA进
小鼠胚胎干细胞培养实验
体外分化法 实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存
天然培养基配制实验_鸡血浆的制备
天然培养基包括:血清、组织提取液、如鸡血浆,鸡胎汁等。其中血清是一种仍在广泛应用中的天然培养基,市场有产品出售。而血浆应用较少,因此用时多自己制备。内容来源:组织培养和分子细胞学技术。(北京出版社)实验方法原理鸡血浆为最早用于培养的液体,含有纤维蛋白原和一定的营养成分,当与鸡胚胎汁混合后,能发生凝固
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞
在添加 20 %(fetal bovine serum,FBS)的 Ham’s F12 培养中,原代细胞容易生长。在不改变培养条件的情况下,这些细胞增殖和分化,融合形成多个细胞核的肌管。这证明培养的细胞具有成肌性。实验方法原理在添加 20 %(fetal bovine serum,FBS)的 Ham
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞
实验方法原理 在添加 20 %(fetal bovine serum,FBS)的 Ham’s F12 培养中,原代细胞容易生长。在不改变培养条件的情况下,这些细胞增殖和分化,融合形成多个细胞核的肌管。这证明培养的细胞具有成肌性。实验材料 D-PBSA试剂、试剂盒 转运培养液生长培养液链酶菌蛋白酶液仪
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤
1、一般培养——保持胚胎干细胞处于未分化状态 培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代 2 、体外分化 培养基:包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片) 体外分化方法 注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的pr
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤
一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态 培养基 细胞复苏 冻存细胞 明胶包被 细胞传代 体外分化 培养基 包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片) 体外分化方法 注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎
培养细胞标记和裂解物的制备实验
实验材料 培养细胞试剂、试剂盒 DMEMHClTBSTris仪器、耗材 微量离心管Plexiglas盒吸头细胞刮子冷冻离心机实验步骤 1. 培养待标记的细胞至适当的生长期。 对于贴壁细胞: 2a. 吸去培养液,用37℃的含血清不加标记物的标记培养液洗尽残存的含磷酸盐培养液,吸尽该培养液。 3a.
培养细胞标记和裂解物的制备实验
温和去污裂解法 SDS煮沸法 实验材料 培养细胞 试剂、试剂盒
培养细胞标记和裂解物的制备实验
温和去污裂解法 SDS煮沸法 实验材料 培养细胞 试剂、试剂盒
鸡胚分离实验
实验方法原理 无菌操作从蛋中取出鸡胚放入培养皿中。实验步骤 材料:无菌材料DBSS: 取材用 BSS(含有高浓度抗生素的 BSS,见附录 I),装在 25〜50 ml 的螺口试管或通用容器内BSS:50 ml 盛于无菌烧杯中,用于冷却烧过的器械20〜50 ml 小烧杯或蛋杯直头和弯头镊子9 cm 皮
鸡胚分离实验
实验方法原理无菌操作从蛋中取出鸡胚放入培养皿中。实验步骤材料:无菌材料DBSS: 取材用 BSS(含有高浓度抗生素的 BSS,见附录 I),装在 25〜50 ml 的螺口试管或通用容器内BSS:50 ml 盛于无菌烧杯中,用于冷却烧过的器械20〜50 ml 小烧杯或蛋杯直头和弯头镊子9 cm 皮氏培
鸡胚分离实验
实验方法原理 无菌操作从蛋中取出鸡胚放入培养皿中。 实验步骤 材料:无菌材料DBSS: 取材用 BSS(含有高浓度抗生素的 BSS,见附录 I),装在 25
大鼠神经元细胞分离培养实验_解离神经元培养物的制备
实验材料母鼠试剂、试剂盒BSS仪器、耗材无菌器械显微镜实验步骤1. 杀死怀孕 18 天母鼠(常用过量 CO2 使其窒息),用无菌器械取出胚胎,放在无菌的培养皿中。2. 取下胚胎的头,放在盛有 4 ml 不含 Ca2+ 和 Mg2+ 的平衡盐溶液(BSS)的培养皿中。3. 从头颅骨上取下脑,放在 35
大鼠神经元细胞分离和培养实验_培养神经元支持物制备
试剂、试剂盒浓硝酸仪器、耗材玻璃盖玻片层流柜实验步骤一、盖玻片的预处理1. 玻璃盖玻片放在瓷染色架上,用蒸馏水冲洗。2. 架子放在玻璃容器中,浓硝酸泡 48 小时。3. MilliQ 水漂洗盖玻片 1 小时,重复 3 次。4. 200℃ 烤 8 小时灭菌盖玻片。5. 在层流柜中将盖玻片放在 60 m
特殊细胞培养实验_单细胞分离培养法
实验方法原理从理论上说各种培养细胞都可用以进行克隆培养。但实际上,初代培养细胞和有限细胞系(二倍体细胞)比较困难。无限细胞系、转化细胞系和肿瘤细胞等则比较容易。其原因是,当体内任何细胞被置于体外培养后,对培养环境都有一个适应过程。期间细胞对营养液具有同化作用,即从培养液中摄取营养的同时,也向培养液排
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤(一)
一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代体外分化培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片)体外分化方法注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的protocol,需要用专用
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤(四)
第3步--ITSFn培养基在最少量培养基中选择神经前体细胞1.在胚状体接种在组织培养皿一天后将培养基换成ITSFn培养基2.并非所有胚状体在这一时期都已经发生粘附,因此在移除培养基时要小心谨慎以使大部分胚状体留在培养皿内。3.保持细胞在ITSFn中培养大约10天,根据需要更换培养基--大约每隔一天。
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤(三)
ITSFn and N3(分化培养基):配制一20×不含DMEM/F12的溶液。分装在15ml 离心管中,(稀释为1×,ITSFn 7.05ml,N3 12.55ml),0.2μm滤膜过滤,贮存在-20℃。将该溶液加入DMEM/F12中制备培养基,贮存于4℃。 贮存液 DMEM(高