上皮细胞类培养实验_肝细胞培养实验
实验方法原理肝实质由大量肝细胞和少量间质组成，人胎儿、成人和动物的肝脏皆可用于培养；肝脏具有取材方便和易于生长的优点，能获得典型上皮细胞培养。肝细胞形态规整，有多种功能并具有代谢活化致癌物的能力，适用做多种研究；我国已建有多个人肝癌细胞系。实验材料肝脏试剂、试剂盒BSS消化液胰蛋白酶胶原酶仪器、耗材注射器离心管培养基实验步骤一、初代组织块培养肝组织做组织块培养效果很好。取新鲜肝脏，先剥除被膜和血管等纤维成分，用刀或剪刀把肝剪成1 mm3左右的小块，采用贴壁培养法。肝组织易于贴壁，生长力好，一般次日即可出现生长晕。二、初代消化法培养 1. 把肝组织切成2~4 立方毫米的小块，用不含钙镁的BSS液洗两次。2. 移入1：1 的0.1 %胰蛋白酶和0.1 %胶原酶（都用无钙镁BSS配制）中，4 ℃冷消化10~12 小时后，通过250 微米和64 微米尼龙网或不锈钢纱网滤过（用纱布滤过亦可）。3. &nb......阅读全文
上皮细胞培养
1、取材：外科植皮或手术残余皮肤小块，早产流产儿皮肤更好，取角化层薄者，切成0.5－1平方厘米小块。2、置0.02%EDTA中，室温，5分钟。3、换入0.25%胰蛋白酶中，4℃过夜。4、分离：取出皮块，用血管钳或镊子将表皮与真皮层分开。5、取出表皮，剪成更小的块后，置0.25%胰酶中，37℃，30—
细菌培养实验
实验步骤一、需氧培养法：本法是临床细菌室最常用的培养方法，适合一般需氧和兼性厌氧菌的培养。需氧培养的常用温度为 35-37℃，这适合于绝大多数致病菌的生长。此外，还有用 4℃ 培养，如李斯德菌除了能在 37℃ 中生长外。还能在 4℃ 中生长，而其他革兰氏阳性菌则不能，故可用于鉴别。李斯德菌在 25℃
器官培养实验
实验方法原理取出器官或组织，将其切成 1 mm3 小块或成薄膜状、杆状。然后，将组织放在位于气液界面的支持物上，如滤膜培养皿。在湿润的 CO2 培养箱中培养，根据需要更换培养液。试剂、试剂盒M199仪器、耗材解剖器械滤膜培养皿12 孔培养板受精鸡蛋实验步骤一、材料无菌 1. 解剖器械 2. 含有或不
器官培养实验
实验方法原理 取出器官或组织，将其切成 1 mm3 小块或成薄膜状、杆状。然后，将组织放在位于气液界面的支持物上，如滤膜培养皿。在湿润的 CO2 培养箱中培养，根据需要更换培养液。试剂、试剂盒 M199仪器、耗材 解剖器械滤膜培养皿12 孔培养板受精鸡蛋实验步骤 一、材料无菌 1. 解剖器械 2.
器官培养实验
实验方法原理取出器官或组织，将其切成 1 mm3 小块或成薄膜状、杆状。然后，将组织放在位于气液界面的支持物上，如滤膜培养皿。在湿润的 CO2 培养箱中培养，根据需要更换培养液。试剂、试剂盒M199
细菌培养实验
一、需氧培养法：本法是临床细菌室最常用的培养方法，适合一般需氧和兼性厌氧菌的培养。需氧培养的常用温度为 35-37℃，这适合于绝大多数致病菌的生长。此外，还有用 4℃ 培养，如李斯德菌除了能在 37℃ 中生长外。还能在 4℃ 中生长，而其他革兰氏阳性菌则不能，故可用于鉴别。李斯德菌在 25℃
特殊细胞培养实验_球体细胞培养实验
实验方法原理大多数培养细胞都具有贴附在底物上生长成单层细胞的性质，如细胞长成片之后，让细胞片与底物脱离，更换到使细胞不易贴附的底物上继续生长时，则细胞片能卷聚成球体形，成为球体培养。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1. 琼脂铺底的培养瓶30 ml无菌培养瓶，每
上皮细胞的培养方法
上皮细胞的培养方法上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别受到重视.但上皮细胞培养中常混杂有成纤维细胞,培养时生长速度往往超过上皮细胞,并难以纯化,同时上皮细胞难以在体外长期生存,因此纯化和延长生存时间是培养关键.体内上皮细胞生长在胶原构成的
上皮细胞的培养方法
上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别受到重视.但上皮细胞培养中常混杂有成纤维细胞,培养时生长速度往往超过上皮细胞,并难以纯化,同时上皮细胞难以在体外长期生存,因此纯化和延长生存时间是培养关键.体内上皮细胞生长在胶原构成的基膜,因此培养在有
角膜上皮细胞培养
实验方法原理 将角膜组织置于胶原蛋白上，使其附着。然后，在涂有纤连蛋白和胶原蛋白的培养皿扩增培养。试剂、试剂盒 D-PBSA无血清角质形成细胞培养液 胰蛋白酶 EDTA Biocoat6孔培养板实验步骤 一、材料 灭菌无血清角质形成细胞培养液（keratinocyteserum-freemedium
乳腺上皮细胞培养
实验方法原理 在内源性巨噬细胞存在的条件下，将经离心得到的哺乳早期的乳汁上皮细胞放入营养丰富的培养液中培养，并可用混合性蛋白酶螯合液传代。试剂、试剂盒 RPMI 1640胎牛血清人血清胰岛素氢化可的松霍乱毒素胰蛋白酶液仪器、耗材 培养瓶 离心管实验步骤 材料无菌1. 生长培养液：RPMI 16402
细胞培养实验
贴壁细胞培养 悬浮细胞培养 实验方法原理 实验材料 冻存细胞
细胞培养实验
实验方法原理 实验材料 冻存细胞试剂、试剂盒 70% 乙醇PBS胰酶／EDTA仪器、耗材 25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤 1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒，打开安瓿，用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起
支原体培养实验
实验材料 肺炎支原体试剂、试剂盒 糖酵解培养基基础培养基牛血清酵母浸液酚红醋酸铊 青霉素仪器、耗材 培养皿烧杯玻璃棒天平移液管离心机棉花拭子实验步骤 一、标本采集 支原体常侵及人和动物的粘膜表面，一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中，或取其分泌液，若标本是组织块，可在灭
细胞培养实验
贴壁细胞培养 悬浮细胞培养 实验方法原理 实验材料 冻存细胞
ES细胞分化培养实验——悬滴培养
实验材料未分化 ES 细胞试剂、试剂盒PBS仪器、耗材ES 分化培养基移液器实验步骤1. 准备下列试剂和材料：未分化 ES 细胞无 Ca2+ 和 Mg2+ PBSES 分化培养基8 道微量移液器无菌多道移液器容器2. 收获未分化 ES 细胞。3. 在 100 mm 组织培养皿中加 10 ml PBS
细胞培养实验——悬浮细胞培养
实验材料冻存 HeLa S3 细胞试剂、试剂盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶／EDTA仪器、耗材旋转瓶完全培养基-525 cm2 组织培养瓶C02 培养箱Sorvall H-6000A 转子100 ml 或 200 ml 通气旋转瓶和带滤膜的瓶盖实验步骤1. 将含有冻存 HeLa S3 细胞的安
固体培养基上细菌培养实验
实验方法原理 通过平板划线法分离单菌落试剂、试剂盒 培养液仪器、耗材 平板接种环牙签实验步骤 1. 用接种环或无菌牙签将接种菌体从琼脂平板的一侧开始划线。2. 重新消毒接种环或用新的无菌牙签，从第一划线处将样品划线至平板的其余部分，重复划线至少一次。3. 于37 °C培养直至长出单菌落。如果要
液体培养基中细菌培养实验
仪器、耗材 玻璃瓶烧瓶实验步骤 一、过夜培养1. 将5 ml预热的液体培养基移入一无菌的16 mm或18 mm管中。2. 用接种环挑一个单菌落，浸没于培养液中并轻轻振动接种环，使待接种的细菌分散在培养液中。3. 盖好试管，在摇床或转鼓式培养装置上以60 r/min速度，于37°C培养至饱和（1
特殊细胞培养实验_悬浮培养法
实验方法原理悬浮培养是使贴附性细胞呈悬浮状态生长。如所培养的细胞本身属悬浮生长类型，则无须做任何处理，在传代时先做离心处理去除旧培养液，添加新培养液即可。但在培养贴附型细胞时，因其有贴附性，必须进行干扰使细胞不能贴附，才能形成悬浮状态生长的细胞。实验材料细胞仪器、耗材培养瓶搅拌器实验步骤1. 用大
液体培养基中细菌培养实验
仪器、耗材玻璃瓶烧瓶实验步骤一、过夜培养1. 将5 ml预热的液体培养基移入一无菌的16 mm或18 mm管中。2. 用接种环挑一个单菌落，浸没于培养液中并轻轻振动接种环，使待接种的细菌分散在培养液中。3. 盖好试管，在摇床或转鼓式培养装置上以60 r/min速度，于37°C培养至饱和（1X1
单层培养细胞更换培养液实验
实验方法原理以肉眼和倒置显微镜观察培养物，若有指征，如PH降低，则去除旧培养基加如新鲜培养基，再重新放入温箱培养。实验步骤材料无菌培养的细胞：A549细胞，以2×10^4ml接种到25cm2培养瓶后4天……4瓶生长培养液……………………………………………………100ml例如：Eagle1×MEM含H
单层培养细胞更换培养液实验
实验方法原理以肉眼和倒置显微镜观察培养物，若有指征，如PH降低，则去除旧培养基加如新鲜培养基，再重新放入温箱培养。实验步骤材料无菌培养的细胞：A549细胞，以2×10^4ml接种到25cm2培养瓶后4天……4瓶生长培养液……………………………………………………100ml例如：Eagle1×MEM含H
小鼠肝细胞原代培养
实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 DMEM无血清DMEM培养基胰酶PBS仪器、耗材 饭盒纱布剪子镊子烧杯平皿研磨玻片滤网离心管6孔培养板吸管移液管手套微量加样器实验
纯上皮细胞的培养方法
因此培养在有胶原的底物上可能利于生长，另外人或小鼠表皮在以3T3细胞为饲养层（用射线照射后）时，细胞易生长并可发生一定程度的分化现象。降低PH、Ca2 含量和温度，向培养基中加入表皮生长因子，均有利于表皮细胞生长。以表皮细胞为例，用皮肤表皮和分离培养法可获得纯上皮细胞，方法如下：1、 取材：外
各类上皮细胞培养2
6）毛细血管内皮细胞培养 肿瘤条件培养基制备： 1．取C3H 小鼠的S-180 实体肉瘤组织。 2．胰蛋白酶消化，Dulbecco 改良Eagle 氏培养液15ml（含10％小牛血清），接种到T-75 Falcon 产培养瓶中培养。 3．在细胞生长接近完全汇合时，收集培养液制成条件培养基；再用含10
动物胸腺上皮细胞的培养
正常动物胸腺上皮细胞的培养 实验材料： 1. 胸腺上皮细胞来源；一般取材小鼠或手术切取的儿童之胸腺； 2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2； 3. 有血清培养液：可使用RPMI1640培养液，添加10%
各类上皮细胞培养1
上皮细胞培养 1）表皮细胞培养 1．取材：取外科植皮或手术残余皮肤小块，以角化层薄者为佳，早产流产儿皮肤更好，切成0.5～1 平方厘米小块。 2．EDTA 处理：先置入0.02％EDTA 中室温置5 分钟。 3．冷消化：换入0.25％胰蛋白酶中，置4℃过夜。 4．分离：取出皮肤，用血管钳或镊子把表皮
动物胸腺上皮细胞的培养
实验材料：1. 胸腺上皮细胞来源；一般取材小鼠或手术切取的儿童之胸腺；2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2；3. 有血清培养液：可使用RPMI1640培养液，添加10%胎牛血清、谷氨酰胺2mmol/L、丙酮酸钠1mmol/L、非必
传代培养的培养实验原理介绍
传代培养是组织培养常规保种方法之一。也是几乎所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释分种成多瓶，细胞才能继续生长。这一过程就叫传代。传代培养可获得大量细胞供实验所需。传代要在严格的无菌条件下进行，每一步都需要认真仔细的无菌操作。