各类上皮细胞培养2
6）毛细血管内皮细胞培养 肿瘤条件培养基制备： 1．取C3H 小鼠的S-180 实体肉瘤组织。 2．胰蛋白酶消化，Dulbecco 改良Eagle 氏培养液15ml（含10％小牛血清），接种到T-75 Falcon 产培养瓶中培养。 3．在细胞生长接近完全汇合时，收集培养液制成条件培养基；再用含10％小牛血清的新培养液后，也每隔两天收集一次，可获得多量条件培养基。 4．4000 转/分离心后，再通过0.22μm 微孔滤膜滤过，－20℃冻存备用（临用前融解）。 初代培养： 1．取材：取新鲜牛肾上腺数个，先用Hanks 液洗除血污。 2．剥除被膜，分离出皮质，切成1 立方毫米小块，加0.5％胶原酶室温中消化1 小时，每隔10 分钟用吸管......阅读全文
各类上皮细胞培养2
6）毛细血管内皮细胞培养 肿瘤条件培养基制备： 1．取C3H 小鼠的S-180 实体肉瘤组织。 2．胰蛋白酶消化，Dulbecco 改良Eagle 氏培养液15ml（含10％小牛血清），接种到T-75 Falcon 产培养瓶中培养。 3．在细胞生长接近完全汇合时，收集培养液制成条件培养基；再用含10
各类上皮细胞培养1
上皮细胞培养 1）表皮细胞培养 1．取材：取外科植皮或手术残余皮肤小块，以角化层薄者为佳，早产流产儿皮肤更好，切成0.5～1 平方厘米小块。 2．EDTA 处理：先置入0.02％EDTA 中室温置5 分钟。 3．冷消化：换入0.25％胰蛋白酶中，置4℃过夜。 4．分离：取出皮肤，用血管钳或镊子把表皮
上皮细胞培养
1、取材：外科植皮或手术残余皮肤小块，早产流产儿皮肤更好，取角化层薄者，切成0.5－1平方厘米小块。2、置0.02%EDTA中，室温，5分钟。3、换入0.25%胰蛋白酶中，4℃过夜。4、分离：取出皮块，用血管钳或镊子将表皮与真皮层分开。5、取出表皮，剪成更小的块后，置0.25%胰酶中，37℃，30—
上皮细胞培养
1）表皮细胞培养 1．取材：取外科植皮或手术残余皮肤小块，以角化层薄者为佳，早产流产儿皮肤更好，切成0.5～1平方厘米小块。 2．EDTA处理：先置入0.02%EDTA中室温置5分钟。 3．冷消化：换入0.25%胰蛋白酶中，置4℃过夜。 4．分离：取出皮肤，用血管钳或镊子把表皮与真皮层分
乳腺上皮细胞培养
实验方法原理 在内源性巨噬细胞存在的条件下，将经离心得到的哺乳早期的乳汁上皮细胞放入营养丰富的培养液中培养，并可用混合性蛋白酶螯合液传代。试剂、试剂盒 RPMI 1640胎牛血清人血清胰岛素氢化可的松霍乱毒素胰蛋白酶液仪器、耗材 培养瓶 离心管实验步骤 材料无菌1. 生长培养液：RPMI 16402
角膜上皮细胞培养
实验方法原理 将角膜组织置于胶原蛋白上，使其附着。然后，在涂有纤连蛋白和胶原蛋白的培养皿扩增培养。试剂、试剂盒 D-PBSA无血清角质形成细胞培养液 胰蛋白酶 EDTA Biocoat6孔培养板实验步骤 一、材料 灭菌无血清角质形成细胞培养液（keratinocyteserum-freemedium
乳腺上皮细胞培养实验
实验方法原理在内源性巨噬细胞存在的条件下，将经离心得到的哺乳早期的乳汁上皮细胞放入营养丰富的培养液中培养，并可用混合性蛋白酶螯合液传代。试剂、试剂盒RPMI 1640胎牛血清人血清胰岛素氢化可的松霍乱毒素胰蛋白酶液仪器、耗材培养瓶离心管实验步骤材料无菌1. 生长培养液：RPMI 16402. 胎牛血
乳腺上皮细胞培养实验
实验方法原理在内源性巨噬细胞存在的条件下，将经离心得到的哺乳早期的乳汁上皮细胞放入营养丰富的培养液中培养，并可用混合性蛋白酶螯合液传代。试剂、试剂盒RPMI 1640 胎
角膜上皮细胞培养实验
实验方法原理将角膜组织置于胶原蛋白上，使其附着。然后，在涂有纤连蛋白和胶原蛋白的培养皿扩增培养。试剂、试剂盒D-PBSA无血清角质形成细胞培养液胰蛋白酶EDTABiocoat6孔培养板实验步骤一、材料 灭菌无血清角质形成细胞培养液（keratinocyteserum-freemedium，KGM;C
上皮细胞类培养实验_胃上皮细胞培养实验
实验方法原理胃癌为我国高发癌症之一，培养正常人胃上皮细胞对研究胃癌癌变机理有很大应用价值。近年来培养人的肾脏上皮、气管上皮、前列腺上皮等都有报道，但培养人胃上皮细胞少见成功。近年我研究室通过培养90例正常胃上皮细胞初代培养获得成功，并建成转化细胞系（Ges-1）。培养人正常胃上皮细胞获得成功主要在于
原代肾上皮细胞培养实验
实验方法原理将自皮质切除的组织快切成碎块，冲洗后放入胶原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，摇晃消化。定时用吸管研磨组织块，然后收集分离的细胞。用一定孔径大小的滤网过滤细胞悬液，除去未消化的组织块。然后，洗细胞，清除消化酶。用添加血清的培养液混悬细胞，将细胞接种于塑料培养器皿。实验材料肾组织片试剂、试剂盒DME
原代肾上皮细胞培养实验
实验方法原理 将自皮质切除的组织快切成碎块，冲洗后放入胶原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，摇晃消化。定时用吸管研磨组织块，然后收集分离的细胞。用一定孔径大小的滤网过滤细胞悬液，除去未消化的组织块。然后，洗细胞，清除消化酶。用添加血清的培养液混悬细胞，
原代肾上皮细胞培养实验
原代肾上皮细胞培养实验 实验方法原理 将自皮质切除的组织快切成碎块，冲洗后放入胶原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，摇晃消化。定时用吸管研磨组织块，然后收集分离的细胞。
兔食管上皮细胞培养步骤
原代细胞实验材料： 1. 大兔的正常食管组织 2. 6孔培养板：用多聚赖氨酸4℃包被过夜 3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素，pH7.4 4. 手术刀、解剖剪、解剖镊、
细胞生物基本方法：上皮细胞培养
上皮细胞培养1）表皮细胞培养1．取材：取外科植皮或手术残余皮肤小块，以角化层薄者为佳，早产流产儿皮肤更好，切成0.5～1平方厘米小块。2．EDTA处理：先置入0.02％EDTA中室温置5分钟。3．冷消化：换入0.25％胰蛋白酶中，置4℃过夜。4．分离：取出皮肤，用血管钳或镊子把表皮与真皮层分开。5．
方案23.3－乳腺上皮细胞培养实验
乳腺上皮细胞培养 实验方法原理 在内源性巨噬细胞存在的条件下，将经离心得到的哺乳早期的乳汁上皮细胞放入营养丰富的培养液中培养，并可用混合性蛋白酶螯合液传代。
方案－23.2－角膜上皮细胞培养实验
实验方法原理 将角膜组织置于胶原蛋白上，使其附着。然后，在涂有纤连蛋白和胶原蛋白的培养皿扩增培养。 试剂、试剂盒 D-PBSA
大鼠卵巢上皮细胞培养注意事项
大鼠卵巢上皮细胞培养注意事项：1. 收到后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承
细胞培养技术2
◇湿热消毒的注意事项①不可用安全阀摘子排气。②消毒的过程中若出现漏气现象，可调节消毒器盖内的胶垫的位置。③灭菌完毕，不要急于取出消毒品，可利用消毒器的余热去除物品部分湿气，待半小时左右再移入干燥箱烘干。2.干热消毒 这种消毒方法主要用于玻璃器皿消毒，一般温度在160℃维持90—120分钟就可以杀死
降低上皮细胞培养过程中的污染
实验方法原理上皮细胞易存在纤维细胞污染，其污染程度能够采用特异的中等纤维蛋百亚基波形蛋内（vimentin，作为成纤维细胞的标记）和角蛋白（作为上皮细胞的标 记）抗体进行双重免疫荧光染色。关于如何降低污染的方法前面已述及；另一种用来降低贴壁上皮细胞群屮成纤维细胞数量的方法是采用不同浓度的胰蛋白酶
上皮细胞类培养实验_肝细胞培养实验
实验方法原理肝实质由大量肝细胞和少量间质组成，人胎儿、成人和动物的肝脏皆可用于培养；肝脏具有取材方便和易于生长的优点，能获得典型上皮细胞培养。肝细胞形态规整，有多种功能并具有代谢活化致癌物的能力，适用做多种研究；我国已建有多个人肝癌细胞系。实验材料肝脏试剂、试剂盒BSS消化液胰蛋白酶胶原酶仪器、耗材
降低上皮细胞培养过程中的污染
实验方法原理上皮细胞易存在纤维细胞污染，其污染程度能够采用特异的中等纤维蛋百亚基波形蛋内（vimentin，作为成纤维细胞的标记）和角蛋白（作为上皮细胞的标 记）抗体进行双重免疫荧光染色。关于如何降低污染的方法前面已述及；另一种用来降低贴壁上皮细胞群屮成纤维细胞数量的方法是采用不同浓度的胰蛋白酶化。
上皮细胞类培养实验_内皮细胞培养实验
实验方法原理内皮细胞易于从血管分离进行培养成单层细胞，对研究内皮细胞再生生、肿瘤促血管生长因子（TAF）等有很大应用价值。人内皮细胞培养可应用人脐带脐静脉、动物大动脉等，用灌流消化法获取细胞最为简便。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液PBS仪器、耗材注射器离心管培养基实验步骤1. 取产后的新鲜脐
细胞培养大攻略2
26、PFHM-II 和HYBRIDOMA-SFM之间有什么差别？ PFHM-II (Protein-free Hybridoma Medium)是不包含有蛋白质的单克隆抗体生产培养基。如果作为杂交瘤生产培养基使用，PFHM-II可能需要补充低水平的血清。HYBRIDOMA-SFM即是杂交瘤生产培养
WML2细胞培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mLWML2细胞。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 250px 皿中，加入约 8
2A1细胞培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL2A1细胞。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 250px 皿中，加入约 8m
细胞培养基各类添加剂（生长因子等）模式
成分复杂的培养基还含有许多化合物，包括蛋白质、多肽、核苷、柠檬酸循环的中间产物、丙酮酸及脂类等。已发现当培养基中的血清浓度减少时，这些成分都是必需的。既使在使用血清的情况下，这些成分也可帮助细胞的克隆化培养及维持某些特殊细胞系的生长。 激素和生长因子在大多数常规培养基的配方中都没有注明，但
平滑肌细胞培养方法2
1 材料与方法1.1 材料 9~12d新生健康清洁级KM小鼠，雌雄不限，购自重庆医科大学实验动物中心。RPMI-1640干粉培养基，D-Hanks粉，标准胎牛血清，胰蛋白酶粉（1∶250）均购自Hy-Clone公司；青霉素钠、硫酸链霉素购自华北制药厂；鼠抗兔平滑肌α肌动蛋白单克隆抗体，购自Zymed
HepG2细胞培养的条件
HepG2人肝肿瘤细胞株广泛应用于遗传毒理学及病毒培养等方面的研究,研究肝脏疾病发病机理及其临床应用有着重要意义。由于其与肝细胞具有相同的生物学活性，还被用于胰岛素抵抗的研究。本文对肝癌细胞培养的最佳条件做一简单综述。1.HepG2细胞的复苏条件1.1 复苏温度的选择唐孟萱等采用下述方法进行细胞复苏
2B4细胞培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL2B4细胞。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 250px 皿中，加入约 8m