上皮细胞的培养方法
上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别受到重视.但上皮细胞培养中常混杂有成纤维细胞,培养时生长速度往往超过上皮细胞,并难以纯化,同时上皮细胞难以在体外长期生存,因此纯化和延长生存时间是培养关键.体内上皮细胞生长在胶原构成的基膜,因此培养在有胶原的底物上可能利于生长,另外人或小鼠表皮细胞培养在以3T3细胞为饲养层（用射线照射后）时,细胞易生长并可发生一定程度的分化现象.降低PH、Ca2+含量和温度,向培养基中加入表皮生长因子,均有利于表皮细胞生长.以表皮细胞为例,用皮肤表皮和分离培养法可获得纯上皮细胞,其法如下（黑木凳志夫 1981）1、取材：外科植皮或手术残余皮肤小块,早产流产儿皮肤更好,取角化层薄者,切成0.5－1平方厘米小块.2、置0.02%EDTA中,室温,5分钟.3、换入0.25%胰蛋白酶中,4℃过.4、分离：取出皮块,用血管钳或镊子将表皮......阅读全文
上皮细胞类培养实验_胃上皮细胞培养实验
实验方法原理胃癌为我国高发癌症之一，培养正常人胃上皮细胞对研究胃癌癌变机理有很大应用价值。近年来培养人的肾脏上皮、气管上皮、前列腺上皮等都有报道，但培养人胃上皮细胞少见成功。近年我研究室通过培养90例正常胃上皮细胞初代培养获得成功，并建成转化细胞系（Ges-1）。培养人正常胃上皮细胞获得成功主要在于
上皮细胞培养
1、取材：外科植皮或手术残余皮肤小块，早产流产儿皮肤更好，取角化层薄者，切成0.5－1平方厘米小块。2、置0.02%EDTA中，室温，5分钟。3、换入0.25%胰蛋白酶中，4℃过夜。4、分离：取出皮块，用血管钳或镊子将表皮与真皮层分开。5、取出表皮，剪成更小的块后，置0.25%胰酶中，37℃，30—
上皮细胞的培养
上皮细胞培养 1）表皮细胞培养 1．取材：取外科植皮或手术残余皮肤小块，以角化层薄者为佳，早产流产儿皮肤更好，切成0.5～1平方厘米小块。 2．EDTA处理：先置入0.02％EDTA中室温置5分钟。 3．冷消化：换入0.25％胰蛋白酶中，置4℃过夜。 4．分离：取出皮肤，用血管钳或镊子把表皮与真皮层
上皮细胞培养
1）表皮细胞培养 1．取材：取外科植皮或手术残余皮肤小块，以角化层薄者为佳，早产流产儿皮肤更好，切成0.5～1平方厘米小块。 2．EDTA处理：先置入0.02%EDTA中室温置5分钟。 3．冷消化：换入0.25%胰蛋白酶中，置4℃过夜。 4．分离：取出皮肤，用血管钳或镊子把表皮与真皮层分
乳腺上皮细胞培养
实验方法原理 在内源性巨噬细胞存在的条件下，将经离心得到的哺乳早期的乳汁上皮细胞放入营养丰富的培养液中培养，并可用混合性蛋白酶螯合液传代。试剂、试剂盒 RPMI 1640胎牛血清人血清胰岛素氢化可的松霍乱毒素胰蛋白酶液仪器、耗材 培养瓶 离心管实验步骤 材料无菌1. 生长培养液：RPMI 16402
上皮细胞类培养实验
实验方法原理 利于皮肤表皮细胞培养成功的因素有，在有胶原的底物上易生长；另有人发现把人或小鼠表皮细胞培养在以3T3 细胞为饲养层（用射线照射后）上时，细胞易生长并可发生一定程度的分化现象。降低pH、Ca2+的含量和温度等，均利于表皮细胞生长。向培养基中加氢化可的松（ 10 μg/ml ）
上皮细胞类培养实验
表皮细胞培养实验 乳腺组织培养实验 胃上皮细胞培养实验 肝细胞培养实验 内皮细胞培养实验 毛细血管内皮细胞培养实验 实验方法原理
上皮细胞的培养方法
上皮细胞的培养方法上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别受到重视.但上皮细胞培养中常混杂有成纤维细胞,培养时生长速度往往超过上皮细胞,并难以纯化,同时上皮细胞难以在体外长期生存,因此纯化和延长生存时间是培养关键.体内上皮细胞生长在胶原构成的
角膜上皮细胞培养
实验方法原理 将角膜组织置于胶原蛋白上，使其附着。然后，在涂有纤连蛋白和胶原蛋白的培养皿扩增培养。试剂、试剂盒 D-PBSA无血清角质形成细胞培养液 胰蛋白酶 EDTA Biocoat6孔培养板实验步骤 一、材料 灭菌无血清角质形成细胞培养液（keratinocyteserum-freemedium
上皮细胞的培养方法
上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别受到重视.但上皮细胞培养中常混杂有成纤维细胞,培养时生长速度往往超过上皮细胞,并难以纯化,同时上皮细胞难以在体外长期生存,因此纯化和延长生存时间是培养关键.体内上皮细胞生长在胶原构成的基膜,因此培养在有
乳腺上皮细胞培养实验
实验方法原理在内源性巨噬细胞存在的条件下，将经离心得到的哺乳早期的乳汁上皮细胞放入营养丰富的培养液中培养，并可用混合性蛋白酶螯合液传代。试剂、试剂盒RPMI 1640胎牛血清人血清胰岛素氢化可的松霍乱毒素胰蛋白酶液仪器、耗材培养瓶离心管实验步骤材料无菌1. 生长培养液：RPMI 16402. 胎牛血
乳腺上皮细胞培养实验
实验方法原理在内源性巨噬细胞存在的条件下，将经离心得到的哺乳早期的乳汁上皮细胞放入营养丰富的培养液中培养，并可用混合性蛋白酶螯合液传代。试剂、试剂盒RPMI 1640 胎
纯上皮细胞的培养方法
因此培养在有胶原的底物上可能利于生长，另外人或小鼠表皮在以3T3细胞为饲养层（用射线照射后）时，细胞易生长并可发生一定程度的分化现象。降低PH、Ca2 含量和温度，向培养基中加入表皮生长因子，均有利于表皮细胞生长。以表皮细胞为例，用皮肤表皮和分离培养法可获得纯上皮细胞，方法如下：1、 取材：外
各类上皮细胞培养2
6）毛细血管内皮细胞培养 肿瘤条件培养基制备： 1．取C3H 小鼠的S-180 实体肉瘤组织。 2．胰蛋白酶消化，Dulbecco 改良Eagle 氏培养液15ml（含10％小牛血清），接种到T-75 Falcon 产培养瓶中培养。 3．在细胞生长接近完全汇合时，收集培养液制成条件培养基；再用含10
动物胸腺上皮细胞的培养
正常动物胸腺上皮细胞的培养 实验材料： 1. 胸腺上皮细胞来源；一般取材小鼠或手术切取的儿童之胸腺； 2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2； 3. 有血清培养液：可使用RPMI1640培养液，添加10%
动物胸腺上皮细胞的培养
实验材料：1. 胸腺上皮细胞来源；一般取材小鼠或手术切取的儿童之胸腺；2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2；3. 有血清培养液：可使用RPMI1640培养液，添加10%胎牛血清、谷氨酰胺2mmol/L、丙酮酸钠1mmol/L、非必
角膜上皮细胞培养实验
实验方法原理将角膜组织置于胶原蛋白上，使其附着。然后，在涂有纤连蛋白和胶原蛋白的培养皿扩增培养。试剂、试剂盒D-PBSA无血清角质形成细胞培养液胰蛋白酶EDTABiocoat6孔培养板实验步骤一、材料 灭菌无血清角质形成细胞培养液（keratinocyteserum-freemedium，KGM;C
各类上皮细胞培养1
上皮细胞培养 1）表皮细胞培养 1．取材：取外科植皮或手术残余皮肤小块，以角化层薄者为佳，早产流产儿皮肤更好，切成0.5～1 平方厘米小块。 2．EDTA 处理：先置入0.02％EDTA 中室温置5 分钟。 3．冷消化：换入0.25％胰蛋白酶中，置4℃过夜。 4．分离：取出皮肤，用血管钳或镊子把表皮
上皮细胞类培养实验_肝细胞培养实验
实验方法原理肝实质由大量肝细胞和少量间质组成，人胎儿、成人和动物的肝脏皆可用于培养；肝脏具有取材方便和易于生长的优点，能获得典型上皮细胞培养。肝细胞形态规整，有多种功能并具有代谢活化致癌物的能力，适用做多种研究；我国已建有多个人肝癌细胞系。实验材料肝脏试剂、试剂盒BSS消化液胰蛋白酶胶原酶仪器、耗材
上皮细胞类培养实验_乳腺组织培养实验
实验方法原理乳腺主要由腺上皮组成，培养成功时可获纯上皮细胞培养物。乳腺材料易于获得，既可培养正常乳腺，也可利用乳腺癌组织。乳腺组织不难培养，是很好的培养和研究对象。实验材料乳腺试剂、试剂盒Hanks培养液仪器、耗材吸管纱布实验步骤一、取材培养正常乳腺可从乳腺切除组织或乳腺成形术组织取材。预先把无菌容
胰腺上皮细胞分离及培养实验
实验方法原理从豚鼠胰腺组织分离细胞，用纱布或尼龙网过滤细胞悬液，将过滤的细胞悬液轻轻加于 BSA 液上面。通过 3 次连续离心和混悬细胞，使呈团状的细胞分散。然后，将细胞接种于涂有胶原蛋白的培养器皿。试剂、试剂盒F12K 组织培养液含有 20% 小牛血清HBSSHBSS-DVC葡萄糖胰蛋白酶液胰蛋白
原代肾上皮细胞培养实验
实验方法原理将自皮质切除的组织快切成碎块，冲洗后放入胶原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，摇晃消化。定时用吸管研磨组织块，然后收集分离的细胞。用一定孔径大小的滤网过滤细胞悬液，除去未消化的组织块。然后，洗细胞，清除消化酶。用添加血清的培养液混悬细胞，将细胞接种于塑料培养器皿。实验材料肾组织片试剂、试剂盒DME
原代肾上皮细胞培养实验
实验方法原理 将自皮质切除的组织快切成碎块，冲洗后放入胶原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，摇晃消化。定时用吸管研磨组织块，然后收集分离的细胞。用一定孔径大小的滤网过滤细胞悬液，除去未消化的组织块。然后，洗细胞，清除消化酶。用添加血清的培养液混悬细胞，
原代肾上皮细胞培养实验
原代肾上皮细胞培养实验 实验方法原理 将自皮质切除的组织快切成碎块，冲洗后放入胶原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，摇晃消化。定时用吸管研磨组织块，然后收集分离的细胞。
上皮细胞类培养实验_内皮细胞培养实验
实验方法原理内皮细胞易于从血管分离进行培养成单层细胞，对研究内皮细胞再生生、肿瘤促血管生长因子（TAF）等有很大应用价值。人内皮细胞培养可应用人脐带脐静脉、动物大动脉等，用灌流消化法获取细胞最为简便。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液PBS仪器、耗材注射器离心管培养基实验步骤1. 取产后的新鲜脐
牛角质上皮细胞的分离和培养
1) 用 1％ 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗涤牛眼，水漂洗，再用 70% 乙醇简单处理一下。2）用 3.5 mm 活组织钻孔器切取眼小块上皮组织连同其下的结缔组织（最好选取枝状角膜边缘组织)。3）将上述组织置于干燥的聚赖氨酸包被的表面，让其黏附全少 10 分钟。4) 加入培养液（MEM, 含 10%FCS，
牛角质上皮细胞的分离和培养
实验步骤 1) 用 1％ 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗涤牛眼，水漂洗，再用 70% 乙醇简单处理一下。2）用 3.5 mm 活组织钻孔器切取眼小块上皮组织连同其下的结缔组织（最好选取枝状
兔食管上皮细胞培养步骤
原代细胞实验材料： 1. 大兔的正常食管组织 2. 6孔培养板：用多聚赖氨酸4℃包被过夜 3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素，pH7.4 4. 手术刀、解剖剪、解剖镊、
人肾小管上皮细胞－4100培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL人肾小管上皮细胞 4100。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 250px 皿
牛角质上皮细胞的分离和培养
实验步骤1) 用 1％ 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗涤牛眼，水漂洗，再用 70% 乙醇简单处理一下。2）用 3.5 mm 活组织钻孔器切取眼小块上皮组织连同其下的结缔组织（最好选取枝状角膜边缘组织)。3）将上述组织置于干燥的聚赖氨酸包被的表面，让其黏附全少 10 分钟。4) 加入培养液（MEM, 含 10%