血管内皮细胞的分离和培养_分离小鼠心脏内皮细胞

实验方法原理本方法是由 Marelli-Berg 等 [ 2000 ] 的方法改写的。实验材料小鼠心脏胶原蛋白酶A无关对照抗体大鼠抗小鼠内皮糖蛋白(endoglin)(CD105)抗体山羊抗大鼠IgG微珠试剂、试剂盒MCEC生长培养液非内皮细胞培养液HBSS PSHHSS FBCMF胰蛋白酶和EDTA混合液FBS仪器、耗材细胞滤器Petri培养皿IS MACs柱实验步骤1. 将心脏放入盛有约 5 ml HBSS/PS(HBSS,添加 150 U/ml 青霉素和 150 μg/ml 链霉素) 的 Petri 培养皿。2. 除去主动脉和肺动脉等与心脏相连的血管。3. 将心脏(小鼠心脏:放入含有 300 U/ml 青霉素和链霉素混合液、50 μg/ml 庆大霉素的 HBSS/PSG)切成两半,取出较大的血块和掉落的结缔组织。4. 将心脏放入盛有 CMF (不含 Ca2+ 和 Mg2+ 的 HBSS,添加 150 U......阅读全文

血管内皮细胞的分离和培养_分离小鼠心脏内皮细胞

实验方法原理本方法是由 Marelli-Berg 等 [ 2000 ] 的方法改写的。实验材料小鼠心脏胶原蛋白酶A无关对照抗体大鼠抗小鼠内皮糖蛋白(endoglin)(CD105)抗体山羊抗大鼠IgG微珠试剂、试剂盒MCEC生长培养液非内皮细胞培养液HBSS PSHHSS FBCMF胰蛋白酶和EDT

血管内皮细胞的分离和培养_分离人心脏内皮细胞(HCEC)

实验方法原理根据 McDouall 等 [ 1996 ] 的方法可以分离人的 CEC。实验材料Ⅱ型胶原蛋白酶试剂、试剂盒HCEC生长培养液仪器、耗材磁珠实验步骤1. 按分离小鼠心脏内皮细胞的步骤操作。2. 在步骤 7 用 Ⅱ 型胶原蛋白酶(1 mg/ml)消化组织。3. 按照方案23.28C 的步骤

血管内皮细胞的分离和培养_分离人脐静脉内皮细胞

实验方法原理本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改写的。实验材料D-PBSA胰蛋白酶EDTA人脐带胶原蛋内酶H冷的新生小牛血试剂、试剂盒Hank平衡盐溶液HBSS PSG70%乙醇HUVRC生长培养液仪器、耗材培养瓶手术刀和22号刀片手术针20ml注射器鳄鱼夹动脉夹尖头剪棉纸铝箔塑料

血管内皮细胞的分离和培养

分离人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分离牛主动脉内皮细胞(PAECs)分离小鼠心脏内皮细胞(MCECs)分离人心脏内皮细胞(HCEC)实验方法原理本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改写的。实验材料D-PBSA                                    

血管内皮细胞的分离和培养

实验方法原理 本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改写的。实验材料 D-PBSA胰蛋白酶EDTA人脐带胶原蛋内酶H冷的新生小牛血试剂、试剂盒 Hank平衡盐溶液HBSS PSG70%乙醇HUVRC生长培养液仪器、耗材 培养瓶手术刀和22号刀片手术针20ml注射器鳄鱼夹动脉夹尖头剪棉纸

血管内皮细胞的分离和培养_分离牛主动脉内皮细胞

实验方法原理本方法是由 Bravery 等 [ 1995 ] 的方法改写的。实验材料HBSS PSGA新鲜猪主动脉胶原蛋白酶HFBS试剂、试剂盒PAEC生长培养液实验步骤1. 将铝箔铺在软木板上。2. 将主动脉(新鲜猪主动脉:如条件允许,需无菌取材。放入 HBSS/PSGA 中转运)放于 70 %

分离和培养人角膜内皮细胞实验——分离人角膜内皮细胞

实验材料完整的人角膜试剂、试剂盒CMF-SalineG胰蛋白酶 EDTADMEM F-12 GASPDMEM F-12 2FB:DMEM:Ham’sF-12 1:1 含2%FBSCMF GASP仪器、耗材手术刀或单刃安全刀片弯虹膜剪 11cm(4-3 8 in.)Jeweler’s慑子 10cm(4

分离和培养人角膜内皮细胞实验——培养内皮细胞球

实验材料角膜内皮细胞试剂、试剂盒ESM胰蛋白酶 EDTA仪器、耗材未经组织培养处理的24孔板实验步骤(a)胰蛋白酶消化细。(b)将分离出的细胞用培养基以10个细胞/μL的密度重悬,并接种于未经组织培养处理的24孔板中。(c)7天后用胰蛋白酶消化细胞并离心收集细胞,继续接种。

分离和培养人角膜内皮细胞实验—角膜内皮细胞常规培养

实验材料 角膜内皮细胞 试剂、试剂盒 CECM胰蛋白酶 EDTA 仪器、耗材 6孔板 实验步骤 (a)将细胞接种于包被有FNC的6孔板中。 (b)每3天换液一次。 (c)当细胞90%汇合时用胰蛋白酶消化传代。

原代微血管内皮细胞的体外分离培养

微血管内皮细胞生长因子的应用和免疫磁珠技术的发展,使微血管内皮细胞的培养和纯化变得相对简化。 1、微血管内皮细胞培养简述人体主要器官和组织的微血管内皮细胞已经培养成功的有:骨骼肌、心、脑、胃、视网膜、肺、皮肤、脉络膜、小肠、脂肪、肝窦、肾、关节滑膜、胎盘、骨髓、胰岛、角膜及食道等器官组织的微血管内皮

分离和培养人角膜内皮细胞实验

分离人角膜内皮细胞角膜内皮细胞的常规培养培养内皮细胞球实验方法原理实验材料完整的人角膜试剂、试剂盒CMF-SalineG 胰蛋白酶 EDTA DMEM F-12 GASP DMEM F-12 2FB:DMEM:Ham’sF-12 1:1 含2%FBS CMF GASP仪器、耗材手术刀或单刃安全刀片

分离和培养人角膜内皮细胞实验

实验方法原理 实验材料 完整的人角膜试剂、试剂盒 CMF-SalineG胰蛋白酶 EDTADMEM F-12 GASPDMEM F-12 2FB:DMEM:Ham’sF-12 1:1 含2%FBSCMF GASP仪器、耗材 手术刀或单刃安全刀片弯虹膜剪 11cm(4-3 8 in.)Jeweler’

分离和培养人角膜内皮细胞实验

分离人角膜内皮细胞角膜内皮细胞的常规培养培养内皮细胞球实验方法原理实验材料完整的人角膜                                                                                      试剂、试剂盒CMF-SalineG    

人毛细血管内皮细胞的分离

分离样品的制备 偶联抗PECAM抗体的磁珠的制备 偶联了抗PECAM抗体的磁珠筛选细胞             实验材料 样品

人毛细血管内皮细胞的分离

分离样品的制备 偶联抗PECAM抗体的磁珠的制备 偶联了抗PECAM抗体的磁珠筛选细胞             实验材料 样品

人毛细血管内皮细胞的分离——分离样品的制备

实验材料样品试剂、试剂盒PBS两性霉素庆大霉素仪器、耗材大剪刀刮刀烧瓶钢筛网离心管层流柜实验步骤1. 准备下列器械并消毒(高压灭菌,或者可能的话一次性使用):大剪刀(两把)刮刀(两或三把)胰蛋白酶消化的烧瓶(每 30 g 绞碎样品一个)带接液器的 250-μM 钢筛网15-ml 和 50-ml 离心

小鼠脑微血管内皮细胞的体外培养

摘要:  目的 探讨脑微血管内皮细胞的体外培养方法并进行细胞超微结构研究及组织型纤溶酶原激活物(TPA ) 活性测定。 方法 取新生小鼠脑组织, 通过匀浆、过筛、胶原酶消化、差速粘附等技术对鼠脑微血管内皮细胞进行原代培养, 待细胞铺满瓶底时, 用01125%胰酶20102%EDTA 消化, 离心收集

人脐静脉内皮细胞分离培养仪器试剂和操作步骤

溶液以及器材:1、用RPMI-1640配I型胶原酶 0.1g/100ml2、配三抗:青霉素:100ku/L链霉素:100ku/L庆大霉素:100ku/L3、培养液(M199+ECGS[3ug/ml]+15%胎牛血清)有EGF可以适当加点10ng/ml4、大瓶生理盐水5、广口瓶(脐带数+1)6、止血钳

血管内皮细胞培养

研究人内皮细胞培养以人脐带静脉灌流消化法最为简便,其法如下:1、产后新鲜脐带,无菌剪取10—15厘米长一段,如不能立即培养,可于12小时内保存于4℃。2、用三通注射器吸取温PBS液注入脐静脉中洗去残血,在入口处用线绳扎紧,以防液体返流。3、用血管钳夹紧脐带一端,从另一端向脐静脉中徐徐注入终浓度为0.

人脐带静脉内皮细胞的分离培养与增殖实验

            实验方法原理 在体外,内皮细胞在内皮细胞生长因子存在的条件下可迅速增殖,并可传代,可作为内皮细胞增殖,细胞因子分泌、表型等研究的模型。 实验材料 胶原酶

人脐带静脉内皮细胞的分离培养与增殖试验

血管内皮细胞不仅参与调节血管通透性和凝血过程,在免疫调节,移植排斥,肿瘤转移,炎症等许多过程中也具有重要作用。内皮细胞培养是体外研究内皮细胞功能的重要手段。70年代Eric等建立了内皮细胞分离及体外培养的方法。人脐带静脉是人血管内皮细胞最易获取的来源,在人内皮细胞的研究中被普遍采用。  ㈠ 原理在体

人脐带静脉内皮细胞的分离培养与增殖实验

实验方法原理在体外,内皮细胞在内皮细胞生长因子存在的条件下可迅速增殖,并可传代,可作为内皮细胞增殖,细胞因子分泌、表型等研究的模型。实验材料胶原酶血清试剂、试剂盒Cord Buffor硫酸链霉素生埋盐水EDTA-Na明胶仪器、耗材插管止血钳注射器手套丝线饭盒匀浆机离心机振荡器培养瓶CO孵箱显微镜超净

人脐带静脉内皮细胞的分离培养与增殖实验

            实验方法原理 在体外,内皮细胞在内皮细胞生长因子存在的条件下可迅速增殖,并可传代,可作为内皮细胞增殖,细胞因子分泌、表型等研究的模型。 实验材料 胶原酶

小鼠血管内皮细胞生长因子

小鼠血管内皮细胞生长因子 样本要求:在收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,及时储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,请造模取材后,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差

小鼠角质细胞的分离和培养

实验步骤                                                         1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗,然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3)

小鼠角质细胞的分离和培养

实验步骤1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗,然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 将小鼠从尾巴至鼻子的皮肤作一简单切口,用大鼠牙齿镊轻轻将整个身体的皮肤剥下,用一把镊子夹住身体,另一把镊子拉开皮肤。4) 将

小鼠角质细胞的分离和培养

实验试剂HBSS: NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4 60mg/L无水Na2PO4 47.86mg/L无水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3 350mg/L实验材料妊娠期BALB/c小鼠实验步骤1. 将1~2天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠,流

小鼠角质细胞的分离和培养

实验步骤 1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗,然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 将小鼠从尾巴至鼻子的皮肤作一简单切口,用大鼠牙齿镊轻轻将整个身体的皮

小鼠角质细胞的分离和培养

实验概要本实验是根据Hennings等(1980)的方法改进而来的。该方案也适用于原代大鼠角质细胞的分离。主要试剂HBSS: NaCl 8g/L KCl 400mg/L KH2PO4 60mg/L 无水Na2PO4 47.86mg/L 无水葡萄糖 1000mg/L NaHCO3 350mg/L实验

小鼠角质细胞的分离和培养

实验试剂HBSS: NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4 60mg/L无水Na2PO4 47.86mg/L无水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3 350mg/L实验材料妊娠期BALB/c小鼠实验步骤将1~2天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠,流水彻底