细胞膜完整性及膜转运功能检测实验——HoechstPI染色法
实验步骤1. 主要试剂的配制碘化丙锭贮存液:100 μg/ml,4℃ 避光保存。Hoechst 33258 贮存液:100 μg/ml,4℃ 避光保存。2. 操作流程2.1 常规制备单细胞悬液(方法同 PI 染色法),加入 Hoechst 33258 溶液,使其终浓度为 1 μg/ml,37℃ 孵育 7 min,离心后弃染液,用PBS重悬。2.2 加入 PI 染液,使其终浓度为 5 μg/ml,置冰块上片刻,离心弃染液,用 PBS 洗 1 次后,即可上机检测,紫外激光记录 400~500 nm 处蓝色荧光和 >630 nm 处红色荧光。3. 结果观察正常对照细胞呈弱蓝色及弱红色荧光,凋亡细胞呈蓝色及弱红色荧光,死亡细胞呈强红色及弱蓝色荧光。展开 ......阅读全文
红细胞膜的结构与功能
1)红细胞膜的组成与结构 红细胞膜含脂类40%,蛋白质50%,碳水化合物10%。膜的主要蛋白有主体蛋白和外周蛋白。后者包括收缩蛋白、肌动蛋白、锚蛋白和区带(4.1~4.5)等,即骨架系统,起支架作用,对维持红细胞的形状、稳定性和变形性有重要作用。膜的主要脂类为磷脂和胆固醇,起屏障和保持内环境稳定性作
细胞膜的结构、功能、和组成
一、细胞膜的结构 1、按组成元素分 构成细胞膜的成分有磷脂,糖蛋白,糖脂和蛋白质。 2、按组成结构分 磷脂双分子层是构成细胞膜的的基本支架。细胞膜的主要成分是蛋白质和脂质,含有少量糖类。其中部分脂质和糖类结合形成糖脂,部分蛋白质和糖类结合形成糖蛋白。 3、化学组成 细胞膜主要由脂质(
概述细胞膜的生理功能
细胞膜有重要的生理功能,它既使细胞维持稳定代谢的胞内环境,又能调节和选择物质进出细胞。细胞膜通过胞饮作用(pinocytosis)、吞噬作用(phagocytosis)或胞吐作用(exocytosis)吸收、消化和外排细胞膜外、内的物质。在细胞识别、信号传递、纤维素合成和微纤丝的组装等方面,质膜
细胞膜的主要功能
(1)分隔、形成细胞和细胞器,为细胞的生命活动提供相对稳定的内部环境,膜的面积大大增加,提高了发生在膜上的生物功能;(2)屏障作用,膜两侧的水溶性物质不能自由通过;(3)选择性物质运输,伴随着能量的传递;SARS-COV-2病毒欺骗细胞,通过细胞膜 (4)生物功能:激素作用、酶促反应、细胞识别、电子
细胞膜糖类电镜显示实验
实验方法原理 细胞膜糖类包括糖蛋白和糖脂,其显示技术较常用的是凝集素细胞化学技术,此外,还有钌红染色法等。钌红染色法的原理是钌红可以与羧基(酸性基)通过静电结合,电镜下呈电子密度高染色。实验材料 组织样品试剂、试剂盒 钌红原液戊二醛 二甲胂酸钠缓冲液锇酸实验步骤 1. 钌红原液配制钌红溶于双蒸水,浓
细胞膜的制备方法实验
从悬浮细胞中制备细胞膜从组织培养皿中的汇合或部分汇合细胞中分离顶层膜、基底膜或中间膜从生长于微载体上的细胞中分离细胞膜实验材料胶原酶 试剂、试剂盒EDTA
细胞膜的制备方法实验
从悬浮细胞中制备细胞膜 从组织培养皿中的汇合或部分汇合细胞中分离顶层膜、基底膜或中间膜 从生长于微载体上的细胞中分离细胞膜 实验材料
生物物理所揭示细菌脂多糖跨膜转运机理
4月10日,《自然-结构与分子生物学》(Nature Structural & Molecular Biology)在线发表了中国科学院生物物理研究所研究员黄亿华课题组的研究论文Structural basis for lipopolysaccharide extraction by ABC t
Nature Structural Molecular Biology揭示细菌脂多糖跨膜转运机理
4月10日,《自然-结构与分子生物学》(Nature Structural & Molecular Biology)在线发表了中国科学院生物物理研究所研究员黄亿华课题组的研究论文Structural basis for lipopolysaccharide extraction by ABC t
揭示内质网融合蛋白调控膜转运的分子机制
《美国国家科学院院刊》(PNAS)杂志在线发表了中国科学院生物物理研究所胡俊杰课题组的研究论文“Atlastin-mediated membrane tethering is critical forcargo mobility and exit from the endoplasmic ret
LB膜多功能拉膜机
LB膜多功能拉膜机是测定极性有机物(两亲分子)物理化学特性的精密测量仪器。可以动态地研究各种有极性有机物质(蛋白质,脂质,高聚物等)的单分子层表面膜,记录膜的分子表面积( A)与表面张力( r)或表面压力(π)之间的函数关系,著名的生物膜脂质双层结构假说以及肺内可能存在一种表面活性物质,都是采用膜天
LB膜多功能拉膜机
产品详细介绍LB膜多功能拉膜机JML04C2JML04 LB膜多功能拉膜机(又称膜天平 FILM BALNCE)是测定极性有机物(两亲分子)物理化学特性的精密测量仪器。它可以动态地研究各种有机极性物质(蛋白质、脂质、高聚物等)的单分子层表面膜,记录膜的分子表面积(A)与表面张力(r)或表面压力(π)
活体生理检测仪NMT验证NRT1.5的钾转运功能
2017年,中国农业大学的王毅教授课题组在植物科学领域的顶级期刊Plant Cell上发表了题为NRT1.5/NPF7.3 Functions as a Proton-Coupled H+/K+ Antiporter for K+ Loading into the Xylem in Arabidop
流式细胞仪定量分析细胞凋亡
流式细胞仪检测具有以下特点:1)、检测的细胞数量大,因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确2)、可以做许多相关性分析3)、结合被检测细胞的DNA含量的分析,可确定凋亡的细胞所处的细胞周期■检测形态学及细胞膜完整性的Hoechs-PI双染色法细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性液增加,但其程度介于正常细胞和
流式细胞仪检测细胞凋亡(双染色法)实验步骤
一、基本原理经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞,而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色,且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据
流式细胞仪检测细胞凋亡实验PI单染色法
一、基本原理其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征性,主要包括以下几个方面:1、细胞核的改变由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生改变
流式细胞仪检测细胞凋亡实验——PI单染色法
实验方法原理主要根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变,包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等进行检测。实验材料细胞试剂、试剂盒PBSPI蒸馏水乙醇仪器、耗材棕色瓶400目筛网流式细胞仪实验步骤一、收集细胞收集细胞{数目约(1~ 5)x106个/mL}
临床微生物检验之解脲支原体介绍
解脲支原体(M.urealyticum)为脲原体属中唯一的一个种,因生长需要尿素而得名。菌落微小,直径仅有15~25um,须在低倍下观察,故旧称T株 (tiny strain)。菌落表面有粗糙颗粒,在合适条件下可转成典型的荷包蛋样菌落。生长需要胆固醇和尿素,分解尿素为其代谢特征,产生氨氮,使
细胞膜流动性测定实验_电子自旋共振法
实验材料对数生长期肿瘤细胞试剂、试剂盒PBS游离5NSA仪器、耗材毛细管离心机离心管试管烧杯电子自旋共振仪膜的流动性是生物膜结构的基本特征之一,主要指膜脂肪酸链部分及膜蛋白的运动状态。膜脂类分子在相变温度以上条件下主要有侧向扩散、旋转、左右摇摆、伸缩振荡、翻转及异化运动等方式。膜蛋白的运动方式大体分
研究揭秘植物糖转运蛋白的进化史
近日,中国农业科学院棉花研究所棉花高产育种创新团队系统解析了SWEET糖转运蛋白在绿色植物中的起源、进化过程及功能分化,明确该蛋白的进化轨迹及功能多样性。相关研究成果发表在《植物杂志》(The Plant Journal)上。SWEET糖转运蛋白在植物中负责跨膜转运糖,参与植物生长发育和胁迫响应过程
细胞膜的制备方法实验——从悬浮细胞中制备细胞膜
实验材料胶原酶试剂、试剂盒EDTAHBSS胶原酶溶液阳离子硅胶贮存液仪器、耗材离心机实验步骤一、用胶原酶/EDTA 释放细胞1. 用预保温溶液洗涤单层细胞并用胶原酶处理(1) 预保温溶液洗涤细胞。预保温溶液:5 mmol/L EDTA 钠盐溶于 HBSS,不含二价阳离子。(2) 在单层细胞上加 1%
植物所揭示叶绿体蛋白转运马达新功能
叶绿体是植物进行光合作用的细胞器。正常发育过程受到核基因组和叶绿体基因组在多个层次的协同调控。核质互作的分子机理是叶绿体生物发生的核心科学问题之一。光合膜蛋白复合体的反应中心亚基通常由叶绿体基因编码,而外周蛋白和天线蛋白由核基因组编码。这些核基因组编码的叶绿体蛋白,在细胞质中合成,而后通过叶绿体被膜
关于链霉素的药理作用说明
链霉链霉素是一种氨基糖苷类药。其作用机制是作用于细菌体内的核糖体,抑制细菌蛋白质合成,并破坏细菌细胞膜的完整性。敏感菌具有氧依赖性抗生素跨膜转运系统,链霉素可首先经被动扩散通过细胞外膜孔蛋白,然后经此转运系统通过细胞膜进入细胞内,并不可逆地结合到分离的核糖体30S亚基上,导致A位的破坏,进而:
细胞膜的主要功能介绍
原生质膜的功能主要有以下几个方面:维持细胞的结构完整性,保护细胞内成分细胞内外选择性物质运输的通道和桥梁细胞抗原-抗体特异性识别的物质基础和位置细胞表面绒毛、纤毛、鞭毛的着生位点对于原核细胞而言,细胞质膜是很多催化生化反应的酶附着的位点。
细胞膜有那三大功能
细胞膜的三大功能是: 1、分泌功能 2、排泄功能 3、免疫功能 细胞膜(cell membrane)又称 细胞质膜(plasma membrane)。细胞表面的一层薄膜。有时称为细胞 外膜或 原生质膜。厚度约为7~8nm,细胞膜的化学组成基本相同,主要由脂类、蛋白质和糖类组成。各成分含量
细胞膜的被动输运功能简介
1)单纯扩散:脂溶性物质由膜的高浓度侧向低浓度侧的扩散过程,称为单纯扩散。不耗能,不需要载体。如:水、尿素、二氧化碳等. 2)协助扩散:非脂溶性物质在膜蛋白的帮助下,顺浓度差或电位差跨膜扩散的过程,称为协助扩散。不耗能,但是需要载体。协助扩散的三个特点:1、特异性:记忆中离子通道或载体一般只转
简述革兰氏染色法的实验原理
原理 通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色;而革兰氏阴性菌因其
蛋白质凝胶染色法实验
实验步骤 总蛋白质的检测 1. 总蛋白质色度法染色 简便的目视检测、相对简单的使用及广大熟悉方法的用户基础群,使得考马斯亮蓝(C B B )—直是最普遍使用的总蛋白质凝胶染色剂。如需要比考马斯亮蓝染色更高的检测敏感度,那么银
蛋白质凝胶染色法实验
实验步骤总蛋白质的检测1. 总蛋白质色度法染色简便的目视检测、相对简单的使用及广大熟悉方法的用户基础群,使得考马斯亮蓝(C B B )—直是最普遍使用的总蛋白质凝胶染色剂。如需要比考马斯亮蓝染色更高的检测敏感度,那么银染法是可选择的色度方法。如果需要对切下的蛋白质进行质谱分析,则首选不会引入共价蛋白
过滤器完整性检测仪的检测原理分析
过滤器的完整性检测主要有: 起泡点法测试原理:当滤膜和滤芯用一定的溶液完全浸润,然后通过气源在一侧加压(我们仪器里面有进气控制系统,可以稳定压力,调节进气),随着压力的增加,气体从滤膜的一侧放出,表现膜一侧出现大小、数量不等的气泡,通过仪器判断出对应的压力值就是泡点。 扩散流法测