荚膜染色实验——干墨水法

实验方法原理荚膜是包围在细菌细胞外的一层粘液状或胶质状物质,其成分为多糖、糖蛋白或多肽。由于荚膜与染料的亲和力弱不易着色;而且可溶于水,易在用水冲洗时被除去。所以通常用衬托染色法染色,使菌体和背景着色,而荚膜不着色合在菌体周围形成一透明圈。由于荚膜含水量高。制片时通常不用热固定,以免变形影响观察。实验材料褐球固氮菌/胶质芽孢杆菌(约 2d 无氮培养基琼脂斜面培养物)试剂、试剂盒绘图墨水1% 甲基紫水溶液1% 结晶紫水溶液6% 葡萄糖水溶液20% 硫酸铜水溶液甲醇仪器、耗材载玻片盖玻片滤纸显微镜实验步骤1. 制混合液加一滴 6% 葡萄糖液于洁净载玻片的一端,然后挑取少量菌体与其混合,再加一环墨水,充分混匀。2. 涂片另取一端边缘光滑的载玻片作推片,将推片一端的边缘置于混合液前方,然后稍向后拉,当推片与混合液接触后,轻轻左右移动,使之沿推片接触的后缘散开,尔后以大约 30° 角迅速将混合液推向玻片另一端,使混合液铺成薄层(图 IV-......阅读全文

培养细胞的染色实验——吖啶橙染色荧光观察法

实验方法原理吖啶橙(Acridine Oringe:AO)是一种常用荧光染料,用于直接染色观察活细胞或固定染色观察细胞均可。吖啶橙对DNA和RNA都能染色,快速、简便和有一定的特异性。吖啶橙对活细胞毒性小,配成2×10-4~1×10-4 可用于直接染色观察法更好。实验材料细胞试剂、试剂盒酒精PBSC

过载染色-SDS-凝胶扫描法估测纯度实验

试剂、试剂盒 考马斯亮蓝(CBB) 染色液脱色液实验步骤 试剂考马斯亮蓝(CBB) 染色液脱色液(配方,见“试剂的配制”,PP.184~189)操作程序1) 按实验 4(pp.159~160) 所述,取一较纯蛋白质的若干稀释的样品(约含 1、3、10 和 30ug 的总蛋白), 于小型 SDS-聚丙

过载染色-SDS-凝胶扫描法估测纯度实验

由于蛋白质在 SDS 凝胶上可得到高分辨分离,并可用考马斯亮蓝(CBB) 给予灵敏的染色,故按本单元实验 4 所述的方法,对经 SDS 凝胶分离的蛋白质制备物进行染色和脱色后扫描,可得到蛋白质样品的纯度。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒考马斯亮蓝(CBB) 染色液脱色

过载染色-SDS-凝胶扫描法估测纯度实验

            试剂、试剂盒 考马斯亮蓝(CBB) 染色液 脱色液 实验步骤 试剂考马斯亮蓝(CBB) 染色液脱色液(配方,见“试剂的

蛋白质染色实验——快速银染法

实验材料蛋白质试剂、试剂盒甲醛固定液硫代硫酸钠干胶液甲醇仪器、耗材摇床透析膜实验步骤1. 将凝胶置于塑料容器中,加入50 ml 甲醛固定液,在旋转摇床中缓慢摇动10 min。 2.  倾去固定液,用水冼两次,每次5 min,缓慢摇动。 3.  倾去水,凝胶浸泡在0.2 g/l 硫代硫酸钠溶液中1 m

染色体分离实验——蔗糖梯度纯化法

实验材料染色质粗品试剂、试剂盒蔗糖分离缓冲液仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 准备两种 18ml,浓度分别为 20% 和 60% 的蔗糖分离缓冲液(聚胺,水相或己二醇法的缓冲液),然后以线性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯离心管中,用梯度生成器形成沿离心管的密度梯度。2. 将染色质粗品溶液轻轻

几种细菌染色方法的改良

  细菌是一类原核细胞型。因菌体小半透明,要想更清楚地观察其大小和形态,需经染色和放大后才能看到。常用的细菌染色法有单染法和复染法。复染法是用两种以上的染料染色,可将细菌染成不同颜色,除可观察细菌的形态外还能鉴别细菌。主要有革兰染色法、抗酸染色法、特殊染色法[1] 。笔者为了克服传统染色方法存在

常见的几种细菌染色方法及细菌染色方法的改良

细菌是一类原核细胞型微生物。因菌体小半透明,要想更清楚地观察其大小和形态,需经染色和显微镜放大后才能看到。常用的细菌染色法有单染法和复染法。复染法是用两种以上的染料染色,可将细菌染成不同颜色,除可观察细菌的形态外还能鉴别细菌。主要有革兰染色法、抗酸染色法、特殊染色法[1] 。笔者为了克服传统染色

几种细菌染色方法的改良

细菌是一类原核细胞型微生物。因菌体小半透明,要想更清楚地观察其大小和形态,需经染色和显微镜放大后才能看到。常用的细菌染色法有单染法和复染法。复染法是用两种以上的染料染色,可将细菌染成不同颜色,除可观察细菌的形态外还能鉴别细菌。主要有革兰染色法、抗酸染色法、特殊染色法[1] 。笔者为了克服传统染色方法

培养细胞染色体显示法实验——传代培养细胞染色体显示法

实验方法原理培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和制出标本清晰度高等优点,是制备染色体极好的对象。实验材料细胞试剂、试剂盒HanksNaHCO3培养基血清秋水仙素仪器、耗材酒精灯镊子培养瓶吸管离心管实验步骤1.  培养细胞取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80 %~90 %汇合单层培养细胞;2.  加

干热灭菌法简介

  干热灭菌法是指在干燥环境(如火焰或干热空气)进行灭菌的技术。一般有火焰灭菌法和干热空气灭菌法。  1. 火焰灭菌法 是指用火焰直接烧灼的灭菌方法。该方法灭菌迅速、可靠、简便,适合于耐火焰材料(如金属、玻璃及瓷器等)物品与用具的灭菌,不适合药品的灭菌。  2. 干热空气灭菌法 是指用高温干热空气灭

墨水粘度检测

01 量子点简介量子点(Quantum dot,QD)又称半导体纳米晶,是一类由 II-VI 族元素(如 CdS、CdSe、CdTe、ZnSe、ZnS 等)或 III-V 族元素(无镉量子点,如 InP、InAs 等)等半导体材料构成的尺寸。在 1-10nm 之间的纳米颗粒。量子点具有光色纯度高、发

果蝇唾腺染色体制片实验_观察法

实验方法原理果蝇唾腺染色体是处于体细胞同源染色体的配对状态,由于多次复制而不分开,因而形成具有1 000-4 000根染色体丝的巨大染色体,又称为多线染色体.,本实验利用剖离果蝇三龄幼虫的唾腺,,压制染色体玻片标本的方法,观察多线染色体的特征。实验材料果蝇试剂、试剂盒水醋酸洋红仪器、耗材解剖针双筒解

免疫金组织化学染色实验——CIGSS-法

实验方法原理彩色免疫金银染色方法(coloured IGSS,CIGSS)是由 Frite 和 Hoenes 等(1986)建立的一种新方法,刘彦仿等1988)在《中华病理学杂志》上也报道了改进后的 CIGSS 方法。其基本原理是在 IGSS 法的基础上,根据洗彩色照片的显影原理而发展起来的,即 I

染色体组型分析实验_观察法

实验方法原理染色体组型分析是对染色体组中处于有丝分裂中期时染色体的数目、大小、形态、着丝点的位置以及次缢痕、随体的有无等形态特征作一描述。将一个细胞内的染色体按照一定的顺序排列起来所构成的图像就称为该细胞的核型。 染色体的排列原则:①染色体的大小(即长度),②着丝粒的位置,③特殊标记。实验材料小鼠仪

免疫金组织化学染色实验——IGSS-法

实验方法原理免疫金银染色(immunogold silver staining;IGSS)的基本原理是通过免疫反应沉积在抗原位置的胶体金颗粒起着一种催化剂作用,用对苯二酚还原剂将银离子(Ag+)还原成银原子(Ag),被还原的银原子围绕金颗粒形成一个「银壳」,「银壳」一旦形成本身亦具有催化作用,从而使

荚膜的介绍

  荚膜(capsule)是某些细菌表面的特殊结构,是位于细胞壁表面的一层松散的粘液物质,荚膜的成分因不同菌种而异,主要是由葡萄糖与葡萄糖醛酸组成的聚合物,也有含多肽与脂质的

染色体分离实验——用己二醇法分离中期染色质

实验材料细胞试剂、试剂盒己二醇缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 按聚胺法第 1 和 2 步中所述诱导 500 ml 悬浮或单层培养细胞为中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃ 1000 r/min 离心 10 分钟,用 10 ml 培养基重悬浮。3. 将重悬浮的细胞冷却至 4℃ 放置 20

糖类染色实验——糖原染色

实验方法原理糖原由多糖衍化而来,是单纯的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反应(PAS)染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒高碘酸蒸馏水碱性复红盐酸焦亚硫酸钠(偏重亚硫酸钠)双重蒸馏水

糖原染色(Schiff法)

1. 实验原理过碘酸是氧化剂,使含有乙二醇基(-CHOH—CHOH)的多糖类物质(糖原粘多糖、粘蛋白、糖蛋白及糖脂等)氧化,形成双醛基(—CHO—CHO)。醛基与雪夫试剂中的无色品红结合,使无色的品红变成紫红色化合物,定位于含有多糖类的细胞内。2. 标本采集2.1 病人准备:了解病人是否对局麻药有过

半干电转印法

先将凝胶紧贴于一块硝酸纤维滤膜,然后再将这种夹层组合直接置于两个乎板电极之间,采用这种半干方法可将蛋白质从凝胶中转印至硝酸纤维素膜上(Kyhse-Andersen1984)。平板可以是石墨(这种平板较便宜,但使用100次后必须更换)制成的,也可以是铂金的(这种子板价格较贵,但使用寿命较长)。通过电洗

半干电转印法

实验概要本方法是先将凝胶紧贴于一块硝酸纤维滤膜,然后再将这种夹层组合直接置于两个乎板电极之间,采用这种半干方法可将蛋白质从凝胶中转印至硝酸纤维素膜上。平板可以是石墨(这种平板较便宜,但使用100次后必须更换)制成的,也可以是铂金的(这种子板价格较贵,但使用寿命较长)。通过电洗脱将蛋白质从凝胶中转印至

干热空气灭菌法简介

  是指用高温干热空气灭菌的方法。该法适用于耐高温的玻璃和金属制品以及不允许湿热气体穿透的油脂(如油性软膏机制、注射用油等)和耐高温的粉末化学药品的灭菌,不适合橡胶、塑料及大部分药品的灭菌。  在干热状态下,由于热穿透力较差,微生物的耐热性较强,必须长时间受高温的作用才能达到灭菌的目的。因此,干热空

什么是干热灭菌法?

  干热灭菌法是在干燥环境下用高温杀死细菌和细菌芽胞的技术。用于不能耐受湿热蒸气、不能用高压蒸汽灭菌的物品,如必须保持干燥的化学物品,有刃器械如刀、剪之类,无水的油剂、油膏、甘油等。干热灭菌法所需温度较高,时间较长。常用温度是160℃,持续2h。干热最适用于玻璃器皿的灭菌,尤其是玻璃注射器等。温度可

细菌染色方法

涂片及染色是微生物学的基本技术,也是观察细菌最简单且行之有效的方法。通常情况下,由于细菌个体较小,较透明或半透明,如未经染色往往不以观察识别。因此借助于染色法可以使细菌着色,与视野背景形成鲜明对比,从而易于在显微镜下进行观察。 常见的染色方法包括简单染色、负染色、革兰氏染色、芽孢染色法、鞭毛染色、荚

细菌染色方法一网打尽,一文读懂解细菌染色的方法!

涂片及染色是微生物学的基本技术,也是观察细菌最简单且行之有效的方法。通常情况下,由于细菌个体较小,较透明或半透明,如未经染色往往不以观察识别。因此借助于染色法可以使细菌着色,与视野背景形成鲜明对比,从而易于在显微镜下进行观察。 常见的染色方法包括简单染色、负染色、革兰氏染色、芽孢染色法、鞭毛染色、荚

常见细菌染色方法

常见的染色方法包括简单染色、负染色、革兰氏染色、芽孢染色法、鞭毛染色、荚膜染色、死活染色。制备细菌染色片一般要经过涂片、固定、染色、水洗、干燥等步骤,然后用显微镜甚至油镜观察。简单染色:不同细菌或者由于观察者所侧重观察的内容不同,所以使用的染料也有差异,但是简单染色的方法是一样的。先按照上述的制片方

常见细菌染色方法

   常见的染色方法包括简单染色、负染色、革兰氏染色、芽孢染色法、鞭毛染色、荚膜染色、死活染色。制备细菌染色片一般要经过涂片、固定、染色、水洗、干燥等步骤,然后用显微镜甚至油镜观察。   简单染色:    为准不同细菌或者由于观察者所侧重观察的内容不同,所以使用的染料也有差异,

免疫金组织化学染色实验——双-PAG-法

实验方法原理免疫金银染色方法敏感、简便、省时、安全可靠,葡萄球菌 A 蛋白(SPA)金标记四步法是在此基础上发展起来的更为敏感的一种新方法。SPA 和许多哺乳类动物 IgG 具有亲和性,且它们之间的连接不会干扰抗原-抗体的结合。简单的 SPA 金标记二步法后,第三步用抗 SPA 与 SPA 金表面分

蛋白质染色实验——非氨盐银染法

实验材料蛋白质试剂、试剂盒DTT硝酸银碳酸盐显影液柠檬酸仪器、耗材摇床实验步骤1.  将凝胶置于玻璃或聚乙烯容器中,加入100 ml 固定液,在旋转摇床中缓慢摇动30 min。 2.  倾去固定液,将凝胶浸没在脱色液中,缓慢摇动30 min。 3.  倾去脱色液,加50 ml 10%戊二醛,在通风橱