染色体分离实验——用己二醇法分离中期染色质
实验材料细胞试剂、试剂盒己二醇缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 按聚胺法第 1 和 2 步中所述诱导 500 ml 悬浮或单层培养细胞为中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃ 1000 r/min 离心 10 分钟，用 10 ml 培养基重悬浮。3. 将重悬浮的细胞冷却至 4℃ 放置 20 分钟。4. 细胞在 4℃ 1000 r/min 离心 4 分钟，取出培养基。5. 在 4℃ 用己二醇缓冲液清洗细胞，按第 4 步进行离心。己二醇缓冲液：1.0 mol/L 己二醇（2-甲基-2，4 戊二醇）0.5 mmol/L CaCl20.1 mmol/L PIPES，pH 6.56. 用 10 ml 冷己二醇缓冲液温和地重悬浮细胞，37℃ 孵育 10 分钟。7. 缓慢地将细胞悬液通过 25 号针头注射器或用 Dounce 匀浆器匀浆 10 次（避免产生过多气泡）。8. 染色体悬液粗品用 JA-20 转头（Beclanan J-2......阅读全文
染色体分离实验——用己二醇法分离中期染色质
实验材料细胞试剂、试剂盒己二醇缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 按聚胺法第 1 和 2 步中所述诱导 500 ml 悬浮或单层培养细胞为中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃ 1000 r/min 离心 10 分钟，用 10 ml 培养基重悬浮。3. 将重悬浮的细胞冷却至 4℃ 放置 20
己二醇法分离中期染色质
试剂、试剂盒：己二醇缓冲液仪器、耗材：Dounce 匀浆器实验步骤：按聚胺法第 1 和 2 步中所述诱导 500 ml 悬浮或单层培养细胞为中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃ 1000 r/min 离心 10 分钟，用 10 ml 培养基重悬浮。3. 将重悬浮的细胞冷却至 4℃ 放置 20 分钟。4.
染色体分离实验—水相法分离染色质
实验材料细胞试剂、试剂盒水相裂解缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤1. 像聚胺法的第 1、2 步中讲的那样诱导悬浮或单层培养细胞的中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃，1000 g 离心 10 分钟然后重悬浮，典型的制备量为 10 ml 新鲜培养基含 108 个细胞。3. 将浓的细胞悬液在冰上放置至少 30
染色体分离实验——聚胺法分离染色质
实验材料细胞试剂、试剂盒秋水仙胺聚胺缓冲液实验步骤有丝分裂中细胞的同步化1. 37℃，用合适的含有 FCS，抗生素和其他必要成分的培养基培养细胞。2. 收集有丝分裂细胞前 10~16 小时在培养基中以 0.06 μg/ml 的浓度加入秋水仙胺。收获细胞并在聚胺缓冲液中裂解3. 收获细胞。对于悬浮培养
【锐赛小课题】染色体分离实验
一、聚胺法分离染色质 试剂、试剂盒：秋水仙胺、聚胺缓冲液 实验步骤： 有丝分裂中细胞的同步化 1. 37℃，用合适的含有 FCS，抗生素和其他必要成分的培养基培养细胞。 2. 收集有丝分裂细胞前 10~16 小时在培养基中以 0.06 μg/ml 的
原代细胞中期染色体的分离
试剂和器材： 1. 秋水仙胺；2. 2-甲-2，4-戊二醇缓冲液：1mol/L 2-甲-2，4-戊二醇、0.5mmol/L CaCl2、0.1mmol/L Pipes-NaOH，pH6.8； 3. 梯度溶液：用2-甲-2，4-戊二醇缓冲液配制成280g/L、580g/L和600g/L的Nycoden
染色体分离实验——甘油梯度法
实验材料染色质试剂、试剂盒甘油 染色质分离缓冲液溶液仪器、耗材JS-13 转桶式转头实验步骤1. 准备 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%（v/v）甘油/染色质分离缓冲液溶液。2. 用 JS-13 转桶式转头在 4℃，1000 r/min 离心 50 分钟进行染色质梯度沉降
染色体分离实验——Percoll梯度法
实验材料染色质试剂、试剂盒精胺精咪Percoll 溶液仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 在体积为 10 ml 分离得到的染色质物质中加入精胺和精咪至终浓度分別为 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。2. 加入 10 ml Percoll 溶液，匀浆分离得到的染色质。Percoll 溶液：
水相法分离染色质
水相法分离染色质试剂、试剂盒：水相裂解缓冲液仪器、耗材：离心机实验步骤：像聚胺法的第 1、2 步中讲的那样诱导悬浮或单层培养细胞的中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃，1000 g 离心 10 分钟然后重悬浮，典型的制备量为 10 ml 新鲜培养基含 108 个细胞。3. 将浓的细胞悬液在冰上放置至少
聚胺法分离染色质
聚胺法分离染色质试剂、试剂盒：秋水仙胺、聚胺缓冲液实验步骤：有丝分裂中细胞的同步化37℃，用合适的含有 FCS，抗生素和其他必要成分的培养基培养细胞。2. 收集有丝分裂细胞前 10~16 小时在培养基中以 0.06 μg/ml 的浓度加入秋水仙胺。收获细胞并在聚胺缓冲液中裂解3. 收获细胞。对于悬浮
染色体分离实验——蔗糖梯度纯化法
实验材料染色质粗品试剂、试剂盒蔗糖分离缓冲液仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 准备两种 18ml，浓度分别为 20% 和 60% 的蔗糖分离缓冲液（聚胺，水相或己二醇法的缓冲液），然后以线性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯离心管中，用梯度生成器形成沿离心管的密度梯度。2. 将染色质粗品溶液轻轻
染色体分离实验
聚胺法分离染色质 水相法分离染色质 用己二醇法分离中期染色质 蔗糖梯度纯化法 Percoll梯度法 甘油梯度法
分离核仁实验——高镁法分离核仁
实验材料细胞试剂、试剂盒Dulbecco’s 盐溶液蔗糖核仁保存液仪器、耗材Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 准备溶液Dulbecco’s 盐溶液：0.136 mol/L NaCl2.6 mmol/L KCl8 mmol/L Na2HPO41.4 mmol/L KH2PO4，pH 7.0蔗糖 A
关于染色体中期染色质的介绍
在有丝分裂或减数分裂（细胞分裂）的早期，染色质双螺旋变得越来越浓缩。此时的染色体不再是可以进入的遗传物质（转录停止），而是一种紧凑的可运输的结构，形成经典的四臂结构，一对姐妹染色单体在着丝粒处相互连接。较短的手臂被称为 p 臂，较长的手臂称为 q 手臂 [7] 。这个时期是用光学显微镜观察单个染
用流式法（FACS)分离间质SP细胞实验
实验方法原理 实验材料 2〜4代的间质细胞试剂、试剂盒 HBSS 2FBHoechst33342染料 lmg ml水溶碘化丙啶（PI) 2mg ml水溶维拉帕米 500μg ml水溶DMEM 2FB胰蛋白酶 TrypLE:TrypLEExpress或0.25%胰蛋白酶 溶于CMF-SalineG仪器
用流式法（FACS)分离间质SP细胞实验
利用Hoechst33342外流性质分选角膜间质干细胞用ABCG2表达特性免疫分选角膜间质干细胞实验方法原理实验材料2〜4代的间质细胞 试剂、试剂盒HBSS 2FB
用流式法（FACS)分离间质SP细胞实验
利用Hoechst33342外流性质分选角膜间质干细胞 用ABCG2表达特性免疫分选角膜间质干细胞 实验方法原理
蔗糖梯度纯化法实验
实验材料：染色质粗品试剂、试剂盒：聚碳酸酯离心管仪器、耗材：Dounce 匀浆器实验步骤：准备两种 18ml，浓度分别为 20% 和 60% 的蔗糖分离缓冲液（聚胺，水相或己二醇法的缓冲液），然后以线性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯离心管中，用梯度生成器形成沿离心管的密度梯度。2. 将染色质粗品
用尼龙毛法分离B细胞
用尼龙毛法分离B细胞1）尼龙毛柱的制备1．取直接3D，长度约250px的尼龙毛，用0.2mol/L HCl浸泡处理过夜。用双蒸水洗净HCl，置37℃烘干备用。2．称取50mg尼龙毛，均匀分散，置Hanks液中浸泡。取1ml注射器，出口接塑料管并夹住。将尼龙毛均匀填塞入注射器中，排净空气，柱高约5～1
组织的分离实验_EDTA－消化分离法
实验方法原理EDTA是一种非酶性消化物，常用不含Ca2+和Mg2+的BSS 配成0.02%的工作液。关于EDTA的作用机制一般认为是：一些组织，尤其是上皮组织，在生存中需要Ca2+和Mg2+才能维持组织的完整性。EDTA能从这些组织生存环境中吸收这些离子，形成螯合物，能促进细胞相互分离。EDTA 作
组织的分离实验_离心分离法
实验方法原理如培养物为血液、羊水、腹水和胸水等细胞悬液时，可采用离心法分离。一般用低速500~1000 转/分速度，离心5~10 分钟即可。如悬液量大，离心时间可适当延长，但如离心速度过大和时间太长，易压挤细胞使之受损或死亡。微量全血法淋巴细胞培养时，可不必进行淋巴细胞分离，可采用全血培养法。在需用
用流式法（FACS)分离间质SP细胞实验1
利用Hoechst33342外流性质分选角膜间质干细胞实验材料2〜4代的间质细胞试剂、试剂盒HBSS 2FBHoechst33342染料 lmg ml水溶碘化丙啶（PI) 2mg ml水溶维拉帕米 500μg ml水溶DMEM 2FB胰蛋白酶 TrypLE:TrypLEExpress或0.25%胰蛋
用流式法（FACS)分离间质SP细胞实验2
实验材料2〜4代的间质细胞试剂、试剂盒PBSA BSA：PBSA+0.5%BSAPBSA 2FB:含2%FBS的PBSA封闭缓冲液抗体：MAB4155F克隆5D3抗ABCG2-FITC或同型抗体-FITC仪器、耗材具有488 nm氩激光器和525 20带通滤波器的高速细胞分选仪实验步骤(a)胰蛋白酶
线粒体分离实验—用蔗糖密度梯度法纯化线粒体
实验材料线粒体悬液试剂、试剂盒蔗糖溶液Tris-HClEDTA仪器、耗材Bockman SW28 号转头实验步骤1. 在用于 Bockman SW28 号转头（或与其等同的产品）的 Uitradear 离心管中，小心地在 15 ml 1.5 mol/L 的蔗糖溶液上加一层 15 ml 1.5 mol
染色体相邻分离
中文名称相邻分离英文名称adjacent segregation定 义染色体平衡易位携带者相互易位杂合子，在粗线期由于同源染色体紧密配对形成特异的“十字形”图像，并在相继的分裂过程中十字形图像逐渐开放形成环形，相邻的两条染色体分离至同一极，即称相邻分离。应用学科遗传学（一级学科），细胞遗传学（二级
微生物分离纯化实验——平板划线分离法
实验方法原理该方法操作简便，普通用于微生物的分离与纯化。其基本原理包括两方面：1. 选择适合于待分离微生物的生长条件，如营养、酸碱度、湿度和氧等要求或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制其他微生物生长的环境，从面淘汰一些不需要的微生物。2. 微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个
树突细胞的分离实验（二）
1.将2 管 I m l 的 4000U /m l 胶 原 酶 D 稀 释（足够用于2 0 个脾脏）： Im l 加 入 9m l H B S S(稀 释 至 400U /m l ，步 骤 8 使用）， I m l 加 入 39m l 的 H B S S (稀 释 至 100U /ml)。置
分离核仁实验——分离核仁
实验材料肝脏试剂、试剂盒NKM仪器、耗材粗孔滤纸Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 制备溶液：NKM：0.13 mol/L NaCl，5 mmol/L KCl，8 mmol/L MgCl20.34 mol/L 蔗糖，3 mmol/L MgCl22.3 mol/L 蔗糖，10 mmol/L MgCl
组织的分离实验_胶原酶消化分离法
实验方法原理胶原酶是一种由细菌中提取出的酶，对胶原有很强的消化作用，适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织等。上皮细胞本身对胶原酶有一定耐性，但胶原酶对细胞间质有好的消化作用，可使上皮细胞与胶原成分脱离而不受伤害，效果甚好。此酶在钙和镁离子存在情况下仍有活性，故可用BSS和含有血清的培养液配制。实验
微生物分离纯化实验——简易单孢子分离法
实验方法原理简易单孢子分离法是一种不需显微单孢操作器，直接在普通显微镜下利用低倍镜分离单孢子的方法。它采用很细的毛细管吸取较稀的萌发的孢子悬浮液滴在培养皿盖的内壁上，在低倍镜下逐个检查微滴。将只含有一个萌发孢子的微滴放一小块营养琼脂片，使其发育成微菌落。再将微菌落转移到培养基中，即可获得仅由单个孢子