超速离心法纯化病毒实验——界面离心分离法
实验方法原理离心管内病毒悬液中的病毒和细胞碎片随其自身密度的大小而下沉或上浮到相等密度梯层中实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒蔗糖溶液仪器、耗材离心机实验步骤(1) 取浓缩后的病毒悬液 5 ml, 加入 1/5 或 1. 66/5 体积的 600 g/L 的蔗糖溶液，使其含蔗糖10%~15%, 摇匀。(2) 取一内盛 4 ml 40%~60% 的蔗糖溶液的离心管，将上述病毒悬液小心铺加于此蔗糖溶液上面，于 20 000~40 000g( 根据病毒的大小和密度而定）离心 60~90 min血病毒在两个界面间形成一条明显的带。(3) 小心用毛细吸管或注射针头吸出，此时病毒悬液中大部分密度大小不同的颗粒即被分开。密度较小的浮在上层，密度较大的沉在下层。以上过程必要时可重复一次。此法所制备的病毒悬液体积较小，纯度较高。......阅读全文
超速离心法纯化病毒实验——界面离心分离法
实验方法原理离心管内病毒悬液中的病毒和细胞碎片随其自身密度的大小而下沉或上浮到相等密度梯层中实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒蔗糖溶液仪器、耗材离心机实验步骤(1) 取浓缩后的病毒悬液 5 ml, 加入 1/5 或 1. 66/5 体积的 600 g/L 的蔗糖溶液，使其含蔗糖10%~15%, 摇匀。
超速离心法纯化病毒实验
实验方法原理 不同大小和比重的粒子在沉降速度上存在差别，沉降速度差别（相差）在一个或几个数量级的粒子，可用本法分离提取。实验材料 待纯化的病毒试剂、试剂盒 无仪器、耗材 差速离心机实验步骤 将被分离的样品交替进行低速离心与高速（或超速）离心。差速离心适用于从组织培养液、鸡胚尿囊液或经过红细胞吸附－释
超速离心法纯化病毒实验——差速离心法
实验方法原理不同大小和比重的粒子在沉降速度上存在差别，沉降速度差别（相差）在一个或几个数量级的粒子，可用本法分离提取。实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒无仪器、耗材差速离心机实验步骤将被分离的样品交替进行低速离心与高速（或超速）离心。差速离心适用于从组织培养液、鸡胚尿囊液或经过红细胞吸附－释放的病毒悬
吸附法纯化病毒实验
实验方法原理 实验材料 待纯化的病毒试剂、试剂盒 凝胶材料仪器、耗材 烧杯实验步骤 磷酸钙凝胶：这是病毒凝胶吸附法中较为常用的凝胶，由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4 溶液混合制备凝胶状沉淀物，用 0. 001mol/L 磷酸盐缓冲液悬浮，置千 4℃ 4~5
慢病毒的浓缩与纯化——超速离心沉淀法
实验概要本实验介绍了用超速离心沉淀法浓缩与纯化慢病毒的操作步骤。主要试剂1. 70%乙醇2. 20%的蔗糖溶液3. PBS缓冲液主要设备1. Ultra-clear SW28离心管2. 超净工作台3. 紫外灯4. 10ml移液管5. Beckman SW28 超速离心转头6. 高速离心机7. 50m
超速离心法纯化病毒实验——密度梯度离心
实验方法原理病毒的密度与细胞碎片不同，用梯度制备仪制成适宜的介质梯度如蔗糖梯度或 CsCl 密度梯度，将病毒悬液加到密度梯度的上层，进行超速离心，离心管内病毒悬液中的病毒和细胞碎片随其自身密度的大小而下沉或上浮到相等密度梯层中，吸出含有病毒的沉淀带，即可得到相当纯净的病毒。实验材料待纯化的病毒试剂、
吸附法纯化病毒实验_凝胶吸附法
实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒凝胶材料仪器、耗材烧杯实验步骤磷酸钙凝胶：这是病毒凝胶吸附法中较为常用的凝胶，由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4 溶液混合制备凝胶状沉淀物，用 0. 001mol/L 磷酸盐缓冲液悬浮，置千 4℃ 4~5小时使之充分沉淀后应用
超速离心法纯化病毒实验——等密度梯度离心
实验方法原理离心过程中 CsCl 随离心力而下沉，形成连续梯度，上部密度小而下部密度大，离心管内病毒悬液中的病毒和细胞碎片随其密度的大小而下沉或上浮到相等密度梯层中实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒CsCl仪器、耗材离心机实验步骤在每毫升病毒悬液中，加入 CsCl 约 1 g, 混匀，4℃以 40 0
吸附法纯化病毒实验——红细胞吸附法
实验方法原理用于某些可与红细胞吸附的病毒的浓缩，如正粘病毒和副粘病毒，由于红细胞吸附法是特异的，故可达到浓缩并纯化的目的。实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液鸡红细胞悬液仪器、耗材烧杯水浴锅实验步骤用作吸附病毒的红细胞一般选择适宜动物的红细胞，常用的是鸡红细胞。基本步骤为：① 1%~3% 鸡
吸附法纯化病毒实验_葡聚糖柱层析法
实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液仪器、耗材分光光度计实验步骤(1) 经初步纯化浓缩后的材料，通过葡聚糖 G150 或 G200 柱层析。(2) 用 0. 02~0. 15mol/L 磷酸缓冲液 (pH 7. 0~7. 6) 洗脱，洗脱时适宜流速为 2~5ml/(cm2•h) 。分部收集，
组织的分离实验_离心分离法
实验方法原理如培养物为血液、羊水、腹水和胸水等细胞悬液时，可采用离心法分离。一般用低速500~1000 转/分速度，离心5~10 分钟即可。如悬液量大，离心时间可适当延长，但如离心速度过大和时间太长，易压挤细胞使之受损或死亡。微量全血法淋巴细胞培养时，可不必进行淋巴细胞分离，可采用全血培养法。在需用
痘苗病毒纯化实验
实验方法原理 对于很多研究，部分纯化的病毒就足够了（进行到本实验步骤 14）， 如果是纯化 MVA 病毒，则不能用胰酶消化，也不能用 CEF 细胞或 BHK-21 细胞代替 HeLa 细胞。实验材料 痘苗病毒储液HeLa S3 细胞（悬浮培养）试剂、试剂盒 胰酶Tris • Cl蔗糖仪器、耗材 旋转
痘苗病毒纯化实验
大规模纯化 实验方法原理 对于很多研究，部分纯化的病毒就足够了（进行到本实验步骤 14）， 如果是纯化 MVA 病毒，则不能用胰酶消化，也不能用 CEF 细胞
痘苗病毒纯化实验
痘苗病毒通常采用蔗糖密度梯度离心的方法纯化。纯化的病毒可用于制备痘苗病毒 DNA ，用于不允许存在感染细胞蛋白污染的研究中，同时也可以用作高滴度的病毒储液。对于大规模的纯化（至少 1 L 的培养物），最好的方法是用 HeLa 细胞悬液作为感染的对象，而不要用单层培养的细胞。内容来源于《精编分子生物学
蔗糖梯度纯化法实验
实验材料：染色质粗品试剂、试剂盒：聚碳酸酯离心管仪器、耗材：Dounce 匀浆器实验步骤：准备两种 18ml，浓度分别为 20% 和 60% 的蔗糖分离缓冲液（聚胺，水相或己二醇法的缓冲液），然后以线性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯离心管中，用梯度生成器形成沿离心管的密度梯度。2. 将染色质粗品
聚乙二醇－(PEG)－浓缩法及超过滤法纯化病毒实验
实验方法原理 这一方法是浓缩大量病毒悬液和初步纯化病毒的常用方法之一。 PEG 是环氧乙烷和水缩合而成的水溶性非离子型聚合物，相对分子质量为 2 000-6 000 的 PEG 多用于浓缩病毒，其中以 PEG6 000 效果最好。 PEG 浓缩法能成百倍的浓缩病毒，而且对病毒的结构和抗原性有
重组杆状病毒的纯化实验
实验材料 杆状病毒试剂、试剂盒 琼脂牛血清仪器、耗材 培养瓶冻存管实验步骤 1. 制备病毒上清的系列稀释液，该病毒上清获得自在无血清完全培养液中转染 pAC360β-gal DNA的细胞。在含150 μg/ml X-gal 的琼脂糖顶层覆盖物下病毒形成蚀斑。 2. 当蚀斑形成后，用灭菌巴斯德吸管
DNA纯化实验——PCR清洁试剂盒纯化法
实验方法原理硅胶膜可在高盐条件下结合DNA，又可在低盐条件下与DNA分离。用于清洁目的的含DNA溶液中的引物、单核苷酸、酶、矿物油、盐离子等杂质因为没有与DNA相似的特性，所以被分离开来。 实验材料PCR产物试剂、试剂盒PCR清洁试剂盒仪器、耗材96孔DNA制备板96孔深孔板96孔V型底板实验步骤一
聚乙二醇－(PEG)－浓缩法及超过滤法纯化病毒实验1
聚乙二醇 (PEG) 浓缩法实验方法原理这一方法是浓缩大量病毒悬液和初步纯化病毒的常用方法之一。 PEG 是环氧乙烷和水缩合而成的水溶性非离子型聚合物，相对分子质量为 2 000-6 000 的 PEG 多用于浓缩病毒，其中以 PEG6 000 效果最好。 PEG 浓缩法能成百倍的浓缩病毒，而且对病
DNA纯化实验——DNA凝胶回收试剂盒纯化法
DNA纯化可用于：（1）获得高纯度的DNA；（2）浓缩DNA；（3）测序、遗传信息分析等分子生物学应用。实验方法原理本试剂盒适合从各种琼脂糖凝胶中提取多至 8 μg DNA（70 bp-10 Kb），回收率为 60-85%。琼脂糖凝胶在温和的缓冲液(DE-A 溶液)中溶解，其中的保护剂能防止线状 D
血清脂蛋白的快速离心分离法
血清脂蛋白的快速离心分离法 YU.2003.7利用不同容量的角式转头及很容易配制的梯度液，在各种型号的超速离心机上都能得到满意的分离结果。下面举了几个分离实例，实际上还可以应用于各种
血清脂蛋白的快速离心分离法
利用不同容量的角式转头及很容易配制的梯度液，在各种型号的超速离心机上都能得到满意的分离结果。下面举了几个分离实例，实际上还可以应用于各种型号各种容量的固定角式转头。（一） 梯度液A液：11.40gNacl，0.1g EDTA-Na2，置于1000ml量筒中加入500ml重蒸水及1ml 1N Na
聚乙二醇－(PEG)－浓缩法及超过滤法纯化病毒实验_超过滤法
实验方法原理超过滤法是利用超滤膜将水、盐及小分子滤过，将一定大小的大分子或病毒等颗粒截住从而使后者得到浓缩的一种方法。超过滤法是浓缩大容量的病毒样品的一种非常有效的方法，浓缩的同时可达到部分纯化。实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒PBS仪器、耗材超滤膜实验步骤该法通常将孔径比病毒颗粒小的硝酸纤维素滤膜
病毒纯化和蛋白纯化区别
病毒纯化和蛋白质纯化都是生物制剂工程中常见的分离纯化方法，但它们的对象不同，具体区别如下：1. 病毒纯化与蛋白质纯化对象不同。病毒纯化的目标是将病毒从其它生物物质中进行分离和去除，以获得单个且纯净的病毒颗粒，如用于疫苗生产的病毒载体，而蛋白质纯化的目标是从生物体或来源中提取和纯化单一或多种蛋白质，如
离心分离方法的技术应用
胶体化学1924年瑞典的丁.斯韦德贝里设计了超速离心机，这是一种以极高的角速度运转的离心机，1940年获得的离心加速度30万倍于重力加速度，它和30年代多层吸附理论的建立，以及40年代疏液胶体稳定理论的建立，可说是近半世纪中胶体化学(见胶体和表面化学)领域内的三大成就。超速离心机的分离原理是，当一个
野生型杆状病毒的纯化实验
基本方案 实验材料 杆状病毒 试剂、试剂盒
野生型杆状病毒的纯化实验
基本方案 实验材料 杆状病毒 试剂、试剂盒
野生型杆状病毒的纯化实验
实验材料杆状病毒试剂、试剂盒TE蛋白酶KN-十二烷基肌氨酸苯酚氯仿异戊醇乙醇乙酸钠仪器、耗材培养瓶锥形瓶转子离心机聚苯乙烯管实验步骤1. 以每1.8x107细胞的密度接种Sf9细胞于至少10个150 cm2 培养瓶中。27℃温育约2 h，让细胞牢固贴壁，以0.1的感染复数用野生型AcMNPV感染。
超离心分离法的基本信息介绍
超离心分离法通常指用超速离心机分离高分子的方法。含有高分子的溶液(如核酸和蛋白质的溶液)受到强大的离心力作用时，如果这些高分子物质的密度大于溶液的密度就会沉降下来达到分离的目的。其沉降的速度既与其分子的大小和密度有关，也与溶液的分子密度和粘度及其分子的形状有关。超速离心法也可用来测定高分子的分子
Optima－XPN系列超速离心机在病毒分离的应用
在病毒研究与药物研发中，病毒的分离必不可少。但是病毒颗粒（直径介于20nm-300nm之间1，电镜结果显示病毒直径约为100nm2）和包装产生假病毒的慢病毒、腺病毒、腺相关病毒（AAV）等多种类型病毒载体的沉降系数各不相同，而低转速、低离心力无法使病毒沉降，通常需要60,000-100,000×g以