病毒免疫荧光实验_病毒染色标本的制备

实验材料待检测病毒试剂、试剂盒丙酮0. 01mol L PBS95%乙醇二甲苯仪器、耗材玻片实验步骤1. 培养细胞小玻片标本的制备 根据所检测病毒种类,选择敏感细胞进行培养,如乙型肝炎病毒用乳地鼠肾细胞 (BHK21 细胞)培养,森林脑炎病毒用绿猴肾细胞 (Vero 细胞)培养,登革热病毒用白纹伊蚊传代细胞 (C6/36 细胞)培养。按细胞培养方法,将其分装在有盖玻片的培养板或培养瓶中,置 37℃温箱培养成单层细胞,然后接种病毒。接种病毒量及培养时间因病毒种类而异。如乙型肝炎病毒接种的病毒滴度为约 10-5, 培养 24 h 收片;森林脑炎病毒接种的病毒滴度为 10-6 ,24 h 收片;登革热病毒接种的病毒滴度为 10-6,48 h 收片。设未接种病毒的正常细胞作对照。感染和对照标本从培养板或培养瓶中取出后用 0. 01mol/L PBS 漂洗 2 次,放滤纸上,干燥后放预冷丙酮中置- 30~-28℃冰箱中固定 30......阅读全文

正常细胞常规核型标本制备_人淋巴细胞染色体标本制备

实验方法原理在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋白质,使染色体清晰且分散良好。再结合离心技术去掉红细胞碎片,然后采用空气干燥法制片获得中期染色体标本。实验材料HeLa细胞

动物染色体标本的制备与观察

实验原理凡细胞处于活跃增殖状态,或者经过各种处理后,细胞就可进入分裂的任何动物组织,均可用于染色体分析。在正常动物体内,骨髓是处于不断分裂的组织之一。给动物注射一定剂量的秋水仙碱即可使许多处于分裂的细胞停滞于中期,然后采用常规空气干燥法制备染色体,即可得到大量可分析的染色体标本。本方法简便、可靠,不

动物染色体标本的制备与观察

实验概要本实验介绍了动物染色体标本(cell chromosome)制备的原理及操作步骤。实验原理凡细胞处于活跃增殖状态,或者经过各种处理后,细胞就可进入分裂的任何动物组织,均可用于染色体分析。在正常动物体内,骨髓是处于不断分裂的组织之一。给动物注射一定剂量的秋水仙碱即可使许多处于分裂的细胞停滞于中

骨髓细胞染色体标本的制备

一、原理骨髓染色体标本制备通常用于白血病患者,特别是慢性或急性粒细胞性白血病,因为骨髓反映粒系统细胞增生情况,这些病人不宜用外周血。即使是淋巴细胞性白血病,也不主张用外周血,因为加PHA刺激外周血培养,只能获得正常淋巴细胞分裂相,并不能反映那些病理淋巴细胞的染色体改变。骨髓细胞属不断增殖的细胞,培养

病毒包装技术5——腺病毒载体的制备介绍

  1 菌液的准备   1.1. 取含目的质粒的甘油菌液(-80℃或-20℃冰箱中),待菌液融化后,在超净台用接种环划线于氨苄抗性的平板上,37℃倒置培养12-16h。待平板长出菌落,挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无目的质粒的菌液,则需取库存质粒进行转化,然后挑单克隆摇菌。   1.2. 将单

杆状病毒毒种贮液的制备实验

杆状病毒是一类具有囊膜包裹的双链环状DNA病毒,其基因组大小为80~180 kb,在自然界中以节肢动物作为专一性宿主进行感染和传播。实验材料杆状病毒试剂、试剂盒胎牛血清重组病毒仪器、耗材培养箱培养瓶转子实验步骤从单层培养中制备: 1a.  以毎瓶1.8×107 Sf9细胞的密度,将细胞接种于两个15

假包膜型反转录病毒载体的制备实验

实验材料反转录病毒载体质粒试剂、试剂盒293GP 和 NIH3T3 细胞的培养物仪器、耗材超速离心机细胞培养皿聚丙烯管灭菌无热原的注射器式滤器超干净的离心管宽嘴离心瓶超速离心机G S A 转子实验步骤展开

制备细菌染色标本时,应该注意哪些环节

1,接种环需以无菌操作,载玻片要洁净无油迹,滴生理盐水和取菌不宜过多,涂片要涂抹均匀,不宜过厚;2,干燥是室温干燥;3,热固定温度不宜过高,以玻片背面不烫手为宜,否则会改变甚至破坏细胞形态;4,染色时滴加染液覆盖上菌体薄膜即可;5,染色过程中,不可使染液干涸。

制备细菌染色标本时,应注意哪些问题

1.首先挑取一环(接种环)生理盐水于玻片上.2.再挑一点菌落(量要少,看你键盘上小键盘上的"."那么大就够了)3.先在玻片上生理盐水附近磨菌落,把菌落都磨到玻片上,再将生理盐水拉进来,与菌落混合涂匀.****如果直接放到生理盐水里,很可能菌落整块从环上脱落就不容易涂开了.4.涂好后,在酒精灯火焰上来

杆状病毒储液制备实验——从单层培养中制备

实验材料单层培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1

杆状病毒储液制备实验——从悬浮培养中制备

实验材料悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1

人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备

实验概要本文介绍了人外周血染色体制备和体外培养细胞染色体标本制备的原理、操作流程及注意事项。实验原理人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下,人外周血小淋巴细胞都处在G1期(或G0期),但在体外给予一定的条件,进行培养,经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种

洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察实验_压片法

实验方法原理有丝分裂是细胞均等增殖的过程,是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中,细胞内每条染色体都能复制一份,然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的,在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。 分生组织→固定→解离→染色→压片→观察(间期、早期、中

实验动物组织标本的制备实验_解剖法

通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物,禁食24 小时。击头致昏,以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔,取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2 )保温(37 ℃)的营养液中,并以注射器用营养液将管腔内的食物残渣清洗干净。实验材料家兔

痘苗病毒储液制备

实验方法原理 实验材料 悬浮培养的 HeLa S3 细胞痘苗病毒试剂、试剂盒 完全 MEM-10 和 MEM-2.50.25 mg ml 胰酶仪器、耗材 Sorvall H-6000A 转子150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤 1. 用血细胞计数器对悬浮培养的 HeLa S3 细胞进行细

痘苗病毒储液制备

基本方案 噬斑分析测定滴度             实验方法原理 实验材料 悬浮培养的 HeLa S3

痘苗病毒储液制备

实验材料悬浮培养的 HeLa S3 细胞痘苗病毒试剂、试剂盒完全 MEM-10 和 MEM-2.50.25 mg ml 胰酶仪器、耗材Sorvall H-6000A 转子150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤1. 用血细胞计数器对悬浮培养的 HeLa S3 细胞进行细胞计数。2. 将 5×

人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备1

一、 人外周血染色体制备实验原理 人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下,人外周血小淋巴细胞都处在G1期(或G0期),但在体外给予一定的条件,进行培养,经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种取材简易、用血量少的培养方法已被广泛采用。在培养液中加入植

人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备2

⑦ 再固定:加固定液8ml,混匀,固定10min。⑧ 离心:同上,吸去上清液。⑨ 制细胞悬液:根据细胞量多少,加入适量固定液,充分混匀,制成细胞悬液。⑩ 滴片:取出预先经冰水浸泡的载玻片,用吸管吸取混匀的细胞悬液在离冰片约30cm距离进行滴片,每片约滴2~3滴细胞悬液,使细胞较好分散。一般每一培养瓶

关于诺瓦克病毒的标本检测的方法介绍

  为避免实验室污染,食品、水、环境样品与病人标本不能在同一实验室检测,必须分别在独立的空间进行样品处理和检验。  1. 核酸检测和基因型鉴定  ⑴Real-time RT-PCR  ORF1/ORF2区是诺如病毒基因组中最保守的区域,在同一基因型不同毒株间有相同的保守序列,根据这段保守区域可用于设

活细胞免疫荧光技术-流式细胞仪标本的制备

实验方法原理活细胞表面保留有较完整的抗原或受体,先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合,再用荧光标记的第二抗体结合,根据所测定的荧光强度和阳性百分率即可知相应抗原的密度和分布。实验材料抗体血清试剂、试剂盒RPMI1640DPBS洗涤液固定液仪器、耗材玻璃管塑料管离心机显微镜实验步骤1.  

活细胞免疫荧光技术-流式细胞仪标本的制备

实验方法原理活细胞表面保留有较完整的抗原或受体,先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合,再用荧光标记的第二抗体结合,根据所测定的荧光强度和阳性百分率即可知相应抗原的密度和分布。实验材料细胞样品试剂、试剂盒兔血清第二抗体单克隆抗体FCS-RPMI1640DPBS仪器、耗材玻璃管塑料管离心机荧

新型冠状病毒患者标本采集技术

摘要标本采集在促进临床诊断新型冠状病毒感染中发挥着重要的角色。为规范临床医务人员进行新冠肺炎患者标本采集技术行为,减少医务人员职业暴露,提高送检标本的合格率和标本质量,笔者团队严格按专家共识制订规范要求,完成文献检索、文献评价及总结和两轮专家函询会,最终形成了《新冠肺炎患者标本采集技术专家共识》,并

正常细胞常规核型的标本制备实验

微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析             实验方法原理 采用微量全血培养人体外

正常细胞常规核型的标本制备实验

微量全血培养人淋巴细胞染色体标本制备肿瘤细胞的染色体标本制备人体染色体常规核型的分析实验方法原理采用微量全血培养人体外周血中淋巴细胞,在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋

离体蛙心标本的制备实验

实验材料 蛙仪器、耗材 蛙板小玻板粗剪刀直剪刀大镊子小镊子眼科剪刀探针玻璃分针大烧杯小烧杯滴管培养皿棉线任氏液锌铜叉实验步骤 (1)暴露蛙心:取蟾蜍一只,毁坏脑和脊髓,将其仰卧固定在蛙板上。从剑突下将胸部皮肤向上剪开或剪掉,然后剪掉胸骨,打开心包,暴露心脏和动脉干。 (2)观察心脏的解剖结构:在腹面

离体蛙心标本的制备实验

实验材料蛙仪器、耗材蛙板小玻板粗剪刀直剪刀大镊子小镊子眼科剪刀探针玻璃分针大烧杯小烧杯滴管培养皿棉线任氏液锌铜叉实验步骤(1)暴露蛙心:取蟾蜍一只,毁坏脑和脊髓,将其仰卧固定在蛙板上。从剑突下将胸部皮肤向上剪开或剪掉,然后剪掉胸骨,打开心包,暴露心脏和动脉干。 (2)观察心脏的解剖结构:在腹面可以看

正常细胞常规核型的标本制备实验

微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析             实验方法原理 采用微量全血培养人体外

扫描电镜生物标本制备实验

实验材料病毒试剂、试剂盒无仪器、耗材扫描电镜实验步骤1. 标本的初步处理 待检标本都具有柔软而且含有大量水分的特点,在高度真空的扫描电镜中观察的标本都必须是干燥标本,因此,病毒标本在用扫描电镜观察之前都必须进行预处理并达到以下要求:(1) 标本的预处理要求:①尽可能使标本的形貌和结构保持活体时的近似

扫描电镜生物标本制备实验

实验方法原理 实验材料 病毒试剂、试剂盒 无仪器、耗材 扫描电镜实验步骤 1. 标本的初步处理 待检标本都具有柔软而且含有大量水分的特点,在高度真空的扫描电镜中观察的标本都必须是干燥标本,因此,病毒标本在用扫描电镜观察之前都必须进行预处理并达到以下要求:(1) 标本的预处理要求:①尽可能使标