病毒免疫荧光实验_病毒染色标本的制备
实验材料待检测病毒试剂、试剂盒丙酮0. 01mol L PBS95%乙醇二甲苯仪器、耗材玻片实验步骤1. 培养细胞小玻片标本的制备 根据所检测病毒种类，选择敏感细胞进行培养，如乙型肝炎病毒用乳地鼠肾细胞 (BHK21 细胞）培养，森林脑炎病毒用绿猴肾细胞 (Vero 细胞）培养，登革热病毒用白纹伊蚊传代细胞 (C6/36 细胞）培养。按细胞培养方法，将其分装在有盖玻片的培养板或培养瓶中，置 37℃温箱培养成单层细胞，然后接种病毒。接种病毒量及培养时间因病毒种类而异。如乙型肝炎病毒接种的病毒滴度为约 10-5, 培养 24 h 收片；森林脑炎病毒接种的病毒滴度为 10-6 ,24 h 收片；登革热病毒接种的病毒滴度为 10-6,48 h 收片。设未接种病毒的正常细胞作对照。感染和对照标本从培养板或培养瓶中取出后用 0. 01mol/L PBS 漂洗 2 次，放滤纸上，干燥后放预冷丙酮中置- 30~-28℃冰箱中固定 30......阅读全文
离体蛙心标本的制备实验
实验材料 蛙仪器、耗材 蛙板小玻板粗剪刀直剪刀大镊子小镊子眼科剪刀探针玻璃分针大烧杯小烧杯滴管培养皿棉线任氏液锌铜叉实验步骤 （1）暴露蛙心：取蟾蜍一只，毁坏脑和脊髓，将其仰卧固定在蛙板上。从剑突下将胸部皮肤向上剪开或剪掉，然后剪掉胸骨，打开心包，暴露心脏和动脉干。 （2）观察心脏的解剖结构：在腹面
免疫荧光的标本怎么制作
免疫荧光的标本制作的基本程序和DAB显色的组化类似：1 免疫荧光不需要使用双氧水处理，封闭和一抗孵育与其它相同2 免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育，孵育时间根据抗体的工作浓度确定3 二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察4、免疫荧光在封片使用专用封片剂（如果你经费比较充足）或甘油：0.0
扫描电镜生物标本制备实验
实验材料病毒试剂、试剂盒无仪器、耗材扫描电镜实验步骤1. 标本的初步处理 待检标本都具有柔软而且含有大量水分的特点，在高度真空的扫描电镜中观察的标本都必须是干燥标本，因此，病毒标本在用扫描电镜观察之前都必须进行预处理并达到以下要求：(1) 标本的预处理要求：①尽可能使标本的形貌和结构保持活体时的近似
扫描电镜生物标本制备实验
实验方法原理 实验材料 病毒试剂、试剂盒 无仪器、耗材 扫描电镜实验步骤 1. 标本的初步处理 待检标本都具有柔软而且含有大量水分的特点，在高度真空的扫描电镜中观察的标本都必须是干燥标本，因此，病毒标本在用扫描电镜观察之前都必须进行预处理并达到以下要求：(1) 标本的预处理要求：①尽可能使标
病毒中和实验
实验方法原理 病毒的复制需要宿主细胞供应原料、能量和复制场所，因此病毒必须在活的细胞内复制增殖。病毒进入机体后，吸附于敏感细胞的表面，然后通过穿入，脱壳，侵入细胞，进行病毒复制和装配，并引起机体感染。特异性的抗病毒抗体（中和抗体）与病毒结合之后，使病毒失去吸附、穿入宿主细胞的能力，从而阻止了病毒在宿
病毒样品的制备方法有哪些
从病株直接观察病毒的制片法有以下几种：（1）蘸取法。在清洁的载玻片上滴1滴水，把病叶的新鲜切口，在水滴上沾几下，使受伤细胞的内容物流入水滴，将覆有支持膜的铜网与水滴面接触，入真空中干燥后进行投影检镜。（2）叶汁渗出法。把切取的茎段浸于水中给以水压，在叶片或茎端的切口出现渗出液，将铜网与渗出液表面接触
病毒样品的制备方法有哪些
从病株直接观察病毒的制片法有以下几种：（1）蘸取法。在清洁的载玻片上滴1滴水，把病叶的新鲜切口，在水滴上沾几下，使受伤细胞的内容物流入水滴，将覆有支持膜的铜网与水滴面接触，入真空中干燥后进行投影检镜。（2）叶汁渗出法。把切取的茎段浸于水中给以水压，在叶片或茎端的切口出现渗出液，将铜网与渗出液表面接触
灭活病毒疫苗的制备方法
灭活病毒疫苗的研发工艺主要是通过在细胞基质上对病毒进行培养，然后用物理或化学方法将具有感染性的病毒杀死但同时保持其抗原颗粒的完整性，使其失去致病力而保留抗原性。灭活疫苗既可由整个病毒或细菌组成，也可由它们的裂解片段组成为裂解疫苗。
病毒实验诊断及质量控制
病毒感染病原学诊断在疾病的预防上可了解流行病学情况，疫苗的免疫效果以及采取及时的免疫措施及必要的隔离和防护，在病毒感染的诊断和治疗上可避免不必要的诊断检查，避免滥用抗生素。对某些病毒疾病可选用有效的抗病毒药物，如用阿糖腺苷或无环鸟苷治疗单母子疱疹脑炎，丙氧鸟苷治疗严重的巨细胞病毒感染，病毒唑雾化吸入
大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验
对于某些用途来说（如体内感染细胞），有必要浓缩反转染病毒原液以增加其滴度。如果想要用不编码可选择标记的病毒感染一群细胞，必须用髙滴度的病毒。操作中需用几百毫升至几升的产毒细胞上清。聚乙二醇相沉淀及层析法浓缩病毒实验材料病毒试剂、试剂盒PEGNTE仪器、耗材转子离心机实验步骤1. 制备病毒原液。加5
大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验
实验材料 病毒细胞试剂、试剂盒 小牛血清仪器、耗材 滤器转子实验步骤 1. 将产病毒细胞按1：10或1：20从刚生长汇片的细胞分传至20~50个10 cm 培养皿中，培养细胞至50%~90%汇片。2. 弃去培养液，轻轻加入半量的培养液，注意培养液碱性不要过大，培养2~3天。 3. 收取上清，用
大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验
离心法 聚乙二醇相沉淀及层析法浓缩病毒 实验材料 病毒细胞 试剂
肺结核患者痰标本抗酸染色实验
实验方法原理 分枝杆菌一般不易着色，经加温或延长染色时间而着色后，能抵抗酸酒精的脱色作用，故又称抗酸杆菌。对人有致病性的分枝杆菌主要是结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌。实验步骤 1. 取痰中粘稠脓性或干酪样带血丝部分涂片（略厚），自然干燥后，通过火焰固定，于涂片外周用蜡笔划圆。 2. 用木夹持玻片，滴
DNA荧光染色的样品制备实验
试剂、试剂盒PBS仪器、耗材DNA荧光染料流式细胞仪实验步骤DNA是细胞内含量比较恒定的参量，随着细胞增殖周期的各时相而发生变化。荧光染料（如PI）可选择性地定量嵌入核酸（DNA/RNA）的双螺旋碱基之间，与细胞特异性结合，DNA含量与荧光染料的结合量成正比，因此通过测定荧光强度可获知细胞的增殖情况
DNA荧光染色的样品制备实验
试剂、试剂盒 PBS 仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪 实验步骤
DNA荧光染色的样品制备实验
试剂、试剂盒 PBS 仪器、耗材 DNA荧光染料 流式细胞仪 实验步骤
羊水标本的制备、培养和分析实验
实验材料羊水试剂、试剂盒乙醇chang 培养基秋水仙胺低渗液甲醛 冰乙酸固定剂Permount 封固剂仪器、耗材用于细胞培养的20ml 注射器或试管15ml 离心管离心机盖玻片巴氏吸管倒置显微镜精细镊蓝垫或纸巾玻片加热器实验步骤展
用于－PCR－的模板－DNA－制备实验——含血标本
实验步骤1. 3 ml 外周血或 1 ml 骨髓液放入含 50 μl 0.5mol/L EDTA 的无菌离心管（15 ml 管）中。2. 2000 r/min 离心 10 min。吸去血浆，用指弹匀剩余的有核细胞和红细胞，加入红细胞溶解液 10 ml 并混匀，常温下放置 30 min。红细胞溶解液配
免疫荧光的标本要如何制作？
荧光显微技术主要靠观察切片标本上荧光抗体的染色结果作为抗原的鉴定和定位。因此标本制作的好坏直接影响到检测的结果。在制作标本过程中应力求保持抗原的完整性，并在染色、洗涤和封埋过程中不发生溶解和变性，也不扩散至临近细胞或组织间隙中去。标本切片要求尽量薄些，以利抗原抗体接触和镜检。标本中干扰抗原抗体反应的
肺结核患者痰标本抗酸染色实验_抗酸染色法
实验方法原理分枝杆菌一般不易着色，经加温或延长染色时间而着色后，能抵抗酸酒精的脱色作用，故又称抗酸杆菌。对人有致病性的分枝杆菌主要是结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌。实验步骤1. 取痰中粘稠脓性或干酪样带血丝部分涂片（略厚），自然干燥后，通过火焰固定，于涂片外周用蜡笔划圆。 2. 用木夹持玻片，滴加石
豚鼠离体气管标本制备实验
实验材料豚鼠仪器、耗材木棍Kerbs营养溶液手术剪实验步骤1. 气管连环标本 豚鼠1只，体重500g，用木槌击毙，立即从腹面正中切开皮肤和皮下组织，细心分离出气管，自甲状软骨下剪下整段气管，置于盛有Kerbs营养溶液的平皿中，剪除气管周围组织。从软骨环之间由前向后和由后向前进行交叉横切，均不完全切断
豚鼠离体气管标本制备实验
实验材料 豚鼠仪器、耗材 木棍Kerbs营养溶液手术剪实验步骤 1. 气管连环标本 豚鼠1只，体重500g，用木槌击毙，立即从腹面正中切开皮肤和皮下组织，细心分离出气管，自甲状软骨下剪下整段气管，置于盛有Kerbs营养溶液的平皿中，剪除气管周围组织。从软骨环之间由前向后和由后向前进行交叉横切
EB病毒的实验诊断
EBV分离培养困难，一般用血清学方法辅助诊断。 在有条件实验室可用核酸杂交和PCR等方法检测细胞内EBV基因组及其表达产物。
昆虫病毒的培养实验
实验方法原理 培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法，后者比较容易成功，使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾（Prodenialitura）核型多角体感染宿主来培养病毒。斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后，在细胞核内形成多角体，多角体内包含着很多病毒粒子。
病毒的培养方法实验
实验方法原理 鸡胚培养方法操作简便，适用于流感病毒，痘病毒，疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种，即绒毛尿囊膜接种法，羊膜腔（羊水囊）接种法，尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不同目的采用适宜的接种方法。实验步骤 1. 鸡胚的检查将9～11 日龄鸡胚置于检卵器上，照视观察
昆虫病毒的培养实验
实验方法原理培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法，后者比较容易成功，使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾（Prodenialitura）核型多角体感染宿主来培养病毒。斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后，在细胞核内形成多角体，多角体内包含着很多病毒粒子。斜
病毒－DNA－的提取实验
实验方法原理 实验材料 全血试剂、试剂盒 裂解缓冲液 A裂解缓冲液 B蛋白酶 K仪器、耗材 离心机水浴锅实验步骤 1. 在 750µl 全血中加入等量裂解缓冲液 A,混匀， 12000 r/min 离心 30 s, 弃上清液。2. 用 1.5mL 裂解缓冲液 A 悬起沉淀，再重复离心 1次，弃上清液
细胞免疫荧光染色
实验概要细胞免疫荧光染色实验原理利用抗原抗体反应，鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后，用特异性抗体（一抗）识别目的蛋白，再用一抗的抗体（二抗）识别一抗，二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团，通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、1
LSCM免疫荧光染色
免疫荧光染色 使用预冷的 PBS 缓冲溶液洗涤细胞，去除残留的培养液。立即加入 4% 多聚甲醛(PFA)固定液。在室温固定15 min。用 PBS 洗涤残留的固定液后，用 0. 5% Triton X-100 处理细胞 5 min，这样可以通透细胞膜，使抗体等大分子能通过细胞膜，进到固定细胞的内部。
组织免疫荧光染色
概述： 织免疫荧光染色多是使用组织的冰冻切片，因为在切片过程中基本上暴露了细胞和细胞核内结构，故不需要使用细胞通透剂(Triton-100,NP-40)。染色后的切片应放置冰箱内避光保存，防止荧光淬灭。常用的荧光素有：异硫氰酸(fluorescein isothiocyanate,FITC,发