细菌V.P实验
实验材料大肠埃希氏菌产气肠杆菌普通变形杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒NaOH溶液肌酸甲基红试剂吲哚试剂乙醚溴甲基酚紫指示剂仪器、耗材超净工作台恒温培养箱高压灭菌锅试管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基糖发酵培养基实验步骤1. 标记试管 取装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管,根据需要将培养的细菌做好标记。2. 接种培养 以无菌操作分别接种少量菌苔至以上相应试管中,空白对照管不接种,置37℃恒温箱中,培养24~48h。3. 观察记录 取出以上试管,振荡2min。另取5支空试管相应标记菌名,分别加入3~5ml以上对应管中的培养液,再加入40%NaOH溶液10~20滴,并加入约0.5~1mg微量肌酸,振荡试管,以使空气中的氧溶入,置37℃恒温箱中保温15~30min后,若培养液呈红色,记录为V.P.试验阳性反应(用“+”表示);若不呈红色,记录为V.P.试验阴性反应(用“-”表示)。展开......阅读全文
细菌V.P实验
实验材料大肠埃希氏菌产气肠杆菌普通变形杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒NaOH溶液肌酸甲基红试剂吲哚试剂乙醚溴甲基酚紫指示剂仪器、耗材超净工作台恒温培养箱高压灭菌锅试管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基糖发酵培养基实验步骤1. 标记试管 取装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管,根据需要将培养的细
细菌V.P实验
实验材料大肠埃希氏菌产气肠杆菌普通变形杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒NaOH溶液肌酸甲基红试剂吲哚试剂乙醚溴甲基酚紫指示剂仪器、耗材超净工作台恒温培养箱高压灭菌锅试管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基糖发酵培养基实验步骤1. 标记试管 取装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管,根据需要将培养的细
细菌V.P实验
实验材料大肠埃希氏菌产气肠杆菌普通变形杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒NaOH溶液肌酸甲基红试剂吲哚试剂乙醚溴甲基酚紫指示剂仪器、耗材超净工作台恒温培养箱高压灭菌锅试管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基糖发酵培养基实验步骤1. 标记试管 取装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管,根据需要将培养的细
细菌V.P实验
实验材料 大肠埃希氏菌产气肠杆菌普通变形杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒 NaOH溶液肌酸甲基红试剂吲哚试剂乙醚溴甲基酚紫指示剂仪器、耗材 超净工作台恒温培养箱高压灭菌锅试管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基糖发酵培养基实验步骤 1. 标记试管 取装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管,根据需要将
副溶血性弧菌PCR检测技术
近年来,随着微生物基因组学的发展,微生物基因检测迎来了新的机遇。2000年,Makino等已经完成V.p的基因组测序,V.p毒力基因及特异的基因序列得到进一步确定。根据V.p特异基因序列,设计引物,进行PCR检测,是现阶段检测V,p的最快速准确的方法。目前应用于检测V.p的PCR方法主要有任意引物
细菌培养实验
实验步骤一、需氧培养法:本法是临床细菌室最常用的培养方法,适合一般需氧和兼性厌氧菌的培养。需氧培养的常用温度为 35-37℃,这适合于绝大多数致病菌的生长。此外,还有用 4℃ 培养,如李斯德菌除了能在 37℃ 中生长外。还能在 4℃ 中生长,而其他革兰氏阳性菌则不能,故可用于鉴别。李斯德菌在 25℃
细菌培养实验
一、需氧培养法:本法是临床细菌室最常用的培养方法,适合一般需氧和兼性厌氧菌的培养。需氧培养的常用温度为 35-37℃,这适合于绝大多数致病菌的生长。此外,还有用 4℃ 培养,如李斯德菌除了能在 37℃ 中生长外。还能在 4℃ 中生长,而其他革兰氏阳性菌则不能,故可用于鉴别。李斯德菌在 25℃
细菌鉴定实验
实验方法原理 玻片凝集反应(slide agglutirlation)是将已知的抗体直接与未知的颗粒性抗原物质(如细菌,立克次体,钩端螺旋体等)混合,在有适当电解质存在的条件下,如两者对应便发生特异性结合而形成肉眼可见的凝集物,即为阳性:如两者不对应便无凝集物出现,即为阴性。此法属定性试验,
细菌细胞的制备实验实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材 弗氏破碎器实验步骤 1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为
细菌细胞的制备实验实验
细胞抽提物的制备 核糖体及多核糖体的分离 70S核糖体的纯化 多核糖体的纯化 将核糖体解离为大亚基和小亚基 实验材料
细菌细胞的制备实验实验
细胞抽提物的制备核糖体及多核糖体的分离70S核糖体的纯化多核糖体的纯化将核糖体解离为大亚基和小亚基实验材料细胞 试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液
副溶血性弧菌的PCR检测的介绍
用于检测V.p的PCR方法主要有任意引物PCR(abritrarilyprimedPCR,Ap-PCR)、针对任意引物PCR、多重PCR(muhiplex-PCR)、实时PCR(Real-timePCR)。 1、任意引物PCRMatsumoto等采用任意引物PCR对V.p进行检测。他们针对V。
细菌RNA制备实验
革兰氏阴性细菌中提取 革兰氏阳性细菌中提取 实验材料 RNA 试
细菌糖发酵实验
实验材料 大肠埃希氏菌产气肠杆菌普通变形杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒 NaOH溶液肌酸甲基红试剂吲哚试剂乙醚溴甲基酚紫指示剂仪器、耗材 超净工作台恒温培养箱高压灭菌锅试管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基糖发酵培养基实验步骤 1. 试管标记 取分别装有不同糖类(如葡萄糖、蔗糖和乳糖等
细菌简单染色实验
实验方法原理 常用碱性染料进行简单染色,这是因为:在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,而碱性染料在电离时,其分子的染色部分带正电荷(酸性染料电离时,其分子的染色部分带正电荷)。因此碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着色。经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比,在显微镜下更易于识别
细菌的生化实验
各种细菌具有各自独特的酶系统,因而对底物的分解能力不同,其代谢产物也不同。用生物化学方法测定这些代谢产物,可用来区别和鉴定细菌的种类。利用生物化学方法来鉴别不同细菌,称为细菌的生物化学试验或称生化反应。生物化学试验的方法很多,这里主要介绍碳水化合物的代谢试验1.糖(醇、苷)类发酵试验(1)原理:不同
细菌简单染色实验
实验方法原理常用碱性染料进行简单染色,这是因为:在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,而碱性染料在电离时,其分子的染色部分带正电荷(酸性染料电离时,其分子的染色部分带正电荷)。因此碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着色。经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比,在显微镜下更易于识别,
细菌RNA制备实验
实验材料 RNA试剂、试剂盒 STET氯仿乙酸钠氯化铯无水乙醇EDTA仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 1. 培养100 ml 大肠杆菌或500 ml 蓝细菌至对数生长期,加入1/20体积终止缓冲液,置于冰上。2. 于4℃用JA-10转子17 700 g 离心5 min 收集细胞。3.
细菌糖发酵实验
实验材料大肠埃希氏菌产气肠杆菌普通变形杆菌枯草芽孢杆菌试剂、试剂盒NaOH溶液肌酸甲基红试剂吲哚试剂乙醚溴甲基酚紫指示剂仪器、耗材超净工作台恒温培养箱高压灭菌锅试管移液管杜氏小套管葡萄糖蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基糖发酵培养基实验步骤1. 试管标记 取分别装有不同糖类(如葡萄糖、蔗糖和乳糖等)发酵培
细菌芽孢染色实验
实验方法原理 用着色力强的染色剂孔雀缘或石炭酸复红,在加热条件下染色,使染料不仅进入菌体也可进入芽孢内卡进入菌体的染料经水洗后被脱色,而芽孢一经着色难以被水洗脱当用对比度大的复染剂染色后,芽孢仍保留初染剂的颜色,而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色,使芽孢和菌体更易于区分。实验材料 蜡样芽孢杆菌(约2d
细菌的生化实验
各种细菌具有各自独特的酶系统,因而对底物的分解能力不同,其代谢产物也不同.用生物化学方法测定这些代谢产物,可用来区别和鉴定细菌的种类.利用生物化学方法来鉴别不同细菌,称为细菌的生物化学试验或称生化反应.生物化学试验的方法很多,这里主要介绍碳水化合物的代谢试验1.糖(醇、苷)类发酵试验 (1)原
细菌RNA制备实验——革兰氏阴性细菌中提取
实验材料RNA试剂、试剂盒STET氯仿乙酸钠氯化铯无水乙醇EDTA仪器、耗材离心机分光光度计摇床实验步骤1. 培养100 ml 大肠杆菌或500 ml 蓝细菌至对数生长期,加入1/20体积终止缓冲液,置于冰上。2. 于4℃用JA-10转子17 700 g 离心5 min 收集细胞。3. 用2
细菌的分布观察实验
仪器、耗材普通琼脂培养基血平板镊子实验步骤1. 空气中细菌的分布(1)方法:采用沉降法,暴皿15分钟,常规培养24小时观察结果。(2)结果观察:培养基表面菌落生长情况。2. 皮肤表面细菌的分布(1)方法:采用涂抹法,将手指于酒精消毒前后分别涂抹琼脂平板表面,常规培养24小时观察结果。(2)结果观察:
细菌的分布观察实验
仪器、耗材 普通琼脂培养基血平板镊子实验步骤 1. 空气中细菌的分布(1)方法:采用沉降法,暴皿15分钟,常规培养24小时观察结果。(2)结果观察:培养基表面菌落生长情况。2. 皮肤表面细菌的分布(1)方法:采用涂抹法,将手指于酒精消毒前后分别涂抹琼脂平板表面,常规培养24小时观察结果。(2)结果观
细菌克隆的溶解实验
细菌克隆的溶解实验 实验方法原理 具有原噬菌体的细菌称为溶原性细菌。噬菌体分为烈性噬菌体和溶原性噬菌体,在感染于寄主细菌细胞时,前者往往在菌体内增殖并将菌体裂
细菌克隆的溶解实验
试剂、试剂盒 IPTG溶源菌抽提缓冲液氯化钠溶菌酶LB 琼脂平板仪器、耗材 气体恒溫箱液氮Millipore 滤纸水浴摇床牙签或接种环噬菌体λgt11λgt18-23λZAP 和λZipLox 重组子大肠杆菌 Y1090 hsdR 菌株及 Y1089 菌株实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液,缓冲液和试
细菌肥达反应实验
实验方法原理试管凝集反应是一种半定量的凝集反应。常用已知抗原测定受检血清中有无相应抗体及其含量,以辅助临床诊断或供流行病学调查分析。实验材料伤寒杆菌“H”菌液伤寒杆菌“O” 菌液试剂、试剂盒诊断血清生理盐水仪器、耗材小试管吸管实验步骤1. 取洁净小试管14只分两排排列于试管架上,每排7只依次用蜡笔注
细菌运动性观察实验
实验方法原理 实验材料 苏云金芽孢杆菌假单胞菌金黄色葡萄球菌试剂、试剂盒 硝酸银鞭毛染色液 Leifson 氏鞭毛染色液0.01% 美蓝水溶液仪器、耗材 载玻片盖玻片凹载玻片无菌水凡士林显微镜实验步骤 玻片的准备、菌种材料的准备同鞭毛染色实验。1. 涂凡士林取洁净凹载玻片,在其四周涂少许凡士林(图
噬菌体侵染细菌实验
这种说法有点偏颇。1、当噬菌体的DNA用32磷标记后,它吸附到大肠杆菌表面,然后把DNA注入到大肠杆菌里面,利用其中的原料复制子代的DNA。离心后,较轻的噬菌体悬浮在上清液中,大肠杆菌及一些较重的颗粒沉淀在底部,由于噬菌体中含有32磷的DNA都注入到大肠杆菌里面,所以上清液放射性很低,底部的沉淀物放
细菌肥达反应实验
实验方法原理 试管凝集反应是一种半定量的凝集反应。常用已知抗原测定受检血清中有无相应抗体及其含量,以辅助临床诊断或供流行病学调查分析。实验材料 伤寒杆菌“H”菌液伤寒杆菌“O” 菌液试剂、试剂盒 诊断血清生理盐水仪器、耗材 小试管吸管实验步骤 1. 取洁净小试管14只分两排排列于试管架上,每排7只依