50%终点法测定病毒滴度实验

实验方法原理 实验材料 病毒试剂、试剂盒 含 2%小牛血清的 Eagle's 维持液仪器、耗材 细胞培养箱、细胞培养板实验步骤 1. 制备细胞 先制备好单层细胞培养物,在低倍显微镜下观察,挑选生长良好的细胞,按「传代细胞培养」法进行,将细胞单层洗涤、消化、计数。配制所需浓度的细胞悬液,细胞数目可因细胞种类而异,通常为 20 万 -30 万/ml。预先将微量细胞培养板设计好,标记;用微量加样器将细胞悬液加人微孔中,每孔 200µl。2. 孵育细胞 将装有细胞悬液的微孔板置于 5% CO2 培养箱中, 37℃培养直至细胞生长成良好的单层。3. 接种病毒 用含 2%小牛血清的 Eagle's 维持液作为稀释液,将待测病毒作连续 10 倍稀释,如 10-1 、 10-2 、 10-3 …… 10-10 等。将培养板中的培养液全部倾弃,用微量加样器把每个稀释度的病毒液依次、对号......阅读全文

50%终点法测定病毒滴度实验

实验方法原理50% 终点 (50% endpoint) 法是将病毒悬浮液经一系列稀释后,接种至动物、鸡胚或培养成单层的细胞,将每个稀释度造成的动物、鸡胚致死量或细胞病变做成曲线,找出造成 50% 动物、鸡胚死亡或细胞病变的终点稀释度。 LD50 (50 % Lethal dose) 为造成 50%动

50%终点法测定病毒滴度实验

实验方法原理 实验材料 病毒试剂、试剂盒 含 2%小牛血清的 Eagle's 维持液仪器、耗材 细胞培养箱、细胞培养板实验步骤 1. 制备细胞 先制备好单层细胞培养物,在低倍显微镜下观察,挑选生长良好的细胞,按「传代细胞培养」法进行,将细胞单层洗涤、消化、计数。配制所需浓度的细胞悬液

病毒滴度的概念

也即病毒的毒力,或毒价,衡量病毒滴度的单位有最小致死量(MLD)、最小感染量(MID)和半数致死量(LD50),其中以LD50最常用。它是指在一定时间内能使半数实验动物致死的病毒量。然而,病毒对实验动物的致病作用不一定都以死亡为标志,例如以感染发病作指标,则可以半数感染量(ID50)测定;此外,当实

病毒滴度的测定

稀释计数法滴度单位:TU/ml,指每毫升中含有的具有生物活性的病毒颗粒数。”TU”为”transducing units”的缩写,中文为“转导单位”,表示可以感染并进入到靶细胞中的病毒基因组数。第一天 细胞准备将生长状态良好的293T细胞消化计数后稀释至1×105/ml,加入96孔板,100µl/孔

杆状病毒滴度检测

实验概要本实验介绍了检测病毒滴度的方法。实验原理根据噬菌斑数计算病毒滴度。主要试剂1. 4% agarose gel:2g agrose   50ml 水,高压灭菌2. 2×Grace(unsupplemented):9.14g粉末(invitrogen) 0.07gNaHCO3 H2O,调PH6.

反转录病毒产毒细胞系建立实验——测定病毒滴度

实验材料病毒原液试剂、试剂盒G418仪器、耗材离心机培养箱实验步骤1.  感染的前1天按1:10至1:20将靶细胞NIH 3T3分传于6 cm 培养皿中。 2.  进行感染的当天,移去靶细胞的培养液,加入含有病毒原液的培养液。用1~2 ml 含 有0.01 μl~0.1 ml 病毒原液的培养液感染6

用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验

实验方法原理 空斑形成单位 (plaque forming units, PFUs)试验,是将不同稀释倍数的动物病毒与平铺于平板表面的宿主细胞混合,当病毒颗粒在一大片宿主细胞上引发感染时,会造成细胞被溶解而形成空斑,每个空斑系由一个病毒颗粒所造成,计算空斑数目再乘以稀释倍数,即可得知原来的病毒感

杆状病毒储液制备实验——噬斑试验测定滴度

实验材料对数生长期单层培养的 Sf 9 细胞试剂、试剂盒杆状病毒储液昆虫细胞培养液仪器、耗材琼脂糖顶层覆盖物台盼蓝顶层覆盖物(选用)60 mm 组织培养皿27℃ 培养箱1.5 ml 带螺口盖的冻存管实验步骤1. 用含 10% 胎牛血清的 TNM-FH 培养液稀释处于对数生长期的 Sf 9 细胞至约

用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验4

在细胞培养板内做病毒空斑形成单位试验实验材料病毒试剂、试剂盒95% 酒精胰酶含 5%小牛血清的 Eagle仪器、耗材细胞培养板实验步骤(1) 用细胞培养板 (6孔),若用旧板,洗净后浸于 95% 酒精中5 min, 再用紫外线照射 2-4 h备用,新板可直接使用。(2) 将传代细胞系经胰酶消化分散后

用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验3

用传代细胞系平皿法测量病毒空斑形成单位实验材料病毒细胞系试剂、试剂盒含 10% 小牛血清、89%水解乳蛋白一酵母浸液培养液仪器、耗材培养皿实验步骤(1) 将单层细胞 (2X 106/ml, 6 ml)培养在直径 60 mm 的平皿上,生长液为含 10% 小牛血清、89%水解乳蛋白一酵母浸液培养液,加

用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验2

虫媒病毒在鸡胚成纤维细胞中的空斑形成单位试验实验方法原理病毒常杀死被病毒感染的细胞 即产生致细胞病变作用。用只染活细胞(如中性红)或只染死细胞(如台盼兰)的染料对单层细胞染色以检测空斑。也可以使用活性染料溴化二苯基四氮唑(MTT) 进行染色,使用 MTT 的优点是黄色的 MTT 能将活细胞染成深蓝色

血凝试验和干扰滴定测定病毒滴度

实验材料待检的病毒标本试剂、试剂盒0.85% 的无菌生理盐水阿氏 (Alsever)液磷酸盐缓冲液 (PBS)红细胞悬液仪器、耗材96 孔微量血凝板灭菌注射器三角烧瓶离心管实验步骤1. 选择适当的 96 孔微量血凝板,如果使用鸡或火鸡红细胞,应选用 V 型微量血凝板;如果使用豚鼠或人"O"型红细胞,

血凝试验和干扰滴定测定病毒滴度

实验方法原理 实验材料 待检的病毒标本试剂、试剂盒 0.85% 的无菌生理盐水阿氏 (Alsever)液磷酸盐缓冲液 (PBS) 红细胞悬液仪器、耗材 96 孔微量血凝板灭菌注射器三角烧瓶离心管实验步骤 1. 选择适当的 96 孔微量血凝板,如果使用鸡或火鸡红细胞,应选用 V 型微量血凝板;如果使用

MVA-病毒储液制备实验——免疫染色法滴度测定

实验方法原理MVA 病毒滴度通常是用免疫染色法进行测定,因为 MVA 不能在 CEF 或 BHK-21 细胞中形成噬斑。实验材料CEF 或 BHK-21 细胞MVA病毒储液试剂、试剂盒MEM-10 和 MEM-2.5 完全培养基1:1 丙酮/甲醇PBS(含和不含3% FBS两种)PBS/H2O2兔抗

慢病毒行业新标准——绝对定量滴度测定

  绝对定量时代——引领慢病毒行业新标准   高大上的慢病毒是怎样炼成的(一)   慢病毒活性滴度用什么单位?   看TU!看TU!看TU!   TU=transducing units,即每毫升中含有的具有生物活性的病毒颗粒数。其他的VG/mL,VP/mL都是所有病毒颗粒数,死的活的都算上

痘苗病毒储液制备——噬斑分析测定滴度

实验方法原理经胰酶作用的系列稀释病毒储液常被用于感染适当的细胞系。经过几天的培养后,吸出培养基,将细胞用结晶紫染色。由于感染细胞变缩、变圆和脱落,形成直径 1~2 mm 颜色较淡的噬斑。实验材料生长良好的贴壁培养的单层 BSC-1 细胞病毒储液试剂、试剂盒0.1% 结晶紫(溶于 20% 乙醇)仪器、

用蚀斑试验测定病毒贮液的滴度实验_蚀斑试验法

实验方法原理空斑形成单位 (plaque forming units, PFUs)试验,是将不同稀释倍数的动物病毒与平铺于平板表面的宿主细胞混合,当病毒颗粒在一大片宿主细胞上引发感染时,会造成细胞被溶解而形成空斑,每个空斑系由一个病毒颗粒所造成,计算空斑数目再乘以稀释倍数,即可得知原来的病毒感染单位

抗体滴度定义

  打个比方,通过间接库姆伯斯试验(indirect Coombs test)检测一个孕妇血清中anti-Rh 抗体。一个患者可能报告通过此试验检出的抗体滴度为16,这表示只要血清的稀释度不超过1/16(1份比例的血清和15份比例的稀释液),此试验都能得到阳性结果,即可识别出抗原。如果稀释度超过1/

滴度的概念

滴度,是一种表述浓度的用词,通常在化学,病理学和免疫学中使用。滴度是稀释度的倒数。病毒滴度即病毒悬液的浓度,又称病毒的效价,噬菌斑形成单位数或感染中心数,就是指pfu的数值。

养多细胞皿数会提高慢病毒滴度吗

上清液滴度是一样的,因为你养的皿数多了,培养基体积也相应的增加了,如果浓缩的话肯定对滴度提高是有帮助的。ps:慢病毒滴度主要与细胞状态、质粒质量、转染效率相关性比较大,在这三个因素都比较好的情况下提高皿数更有利于滴度的提高。如果本身出毒量比较低,只是提高皿数成本比较高。

进口胎牛血清对细胞及病毒滴度的影响

  进口胎牛血清是妊娠后期未出生的剖腹取胎牛的血清。胎牛血清营养成分完全而丰富,代谢产物极少,微生物感染的可能性zui小,品质zui高,是组织细胞培养和病毒增殖培养的重要营养来源。  血清是一种成分复杂的混合物,不同批次血清对细胞生长的促进作用不同大规模细胞培养中由血清引起的细胞生长状态不佳及病毒滴

病毒透射电镜病毒标本制备实验——悬滴标本法

实验方法原理病毒等微小颗粒标本可取其培养物经稀释或分离提纯后直接滴于附有支持膜的载网上用电镜观察。实验材料病毒试剂、试剂盒稀释液仪器、耗材透射电镜实验步骤悬液应尽量除去杂质如培养基残渣,细胞碎片、糖类及各种盐类的结晶等,这些杂质的存在会干扰染色及电镜观察。用该法的缺点是由于电子穿透能力很弱,只能观察

绝对定量滴度测定

慢病毒活性滴度用什么单位?看TU!看TU!看TU!TU=transducing units,即每毫升中含有的具有生物活性的病毒颗粒数。其他的VG/mL,VP/mL都是所有病毒颗粒数,死的活的都算上,一片虚假繁荣,请自由玩儿去!慢病毒活性滴度怎么标定最准?绝对定量!绝对定量!绝对定量!又绝对又定量的方

什么是抗体滴度

抗体滴度用来衡量某种抗体(antibody)识别特定抗原决定部位(epitope)所需要的最低浓度(也即最大稀释度)。一般表示为:仍能产生阳性结果的最大稀释度。通常通过ELISA方法来检测抗体滴度。

梅毒滴度的概念

  梅毒滴度的概念是:梅毒滴度是梅毒血清血检查是检查血清中抗体的点子,滴度的高低就是反应患者血清中抗体的多少。  梅毒滴度患者是唯一的传染源。性接触传染占95%。关键通过性交由破损处传染,梅毒滴度螺旋体好多存在于皮肤粘膜伤害外貌,也见于唾液、乳汁、精液、尿液中。未经治疗的患者在劝化梅毒滴度一年内最具

慢病毒包装试剂盒包出病毒的滴度一般是多少

过表达慢病毒>10^8 PFU/ml干扰慢病毒>10^8 PFU/ml

高滴定度慢病毒载体产物实验

基本方案 高滴定度 HIV-I 基本载体转染 293T 细胞实验步骤实验材料293T细胞                                                          试剂、试剂盒杜氏改良培养基                                  

高滴定度慢病毒载体产物实验

基本方案 高滴定度 HIV-I 基本载体转染 293T 细胞实验步骤             实验材料 293T细胞

高滴定度慢病毒载体产物实验

实验材料293T细胞试剂、试剂盒杜氏改良培养基TE 缓冲液CaCl22 X HeBSPBS漂白剂仪器、耗材乙醇喷壶组织培养皿培养箱灭菌离心管过滤器组织培养瓶实验步骤展开

关于乙肝抗体滴度的简介

  乙肝抗体指的是乙肝保护性抗体,即乙肝表面抗体,而乙肝抗体滴度指的是乙肝表面抗体的浓度。当乙肝表面抗体浓度达到一定程度时才能够更有效的保护人体免受乙肝病毒的入侵。