病毒的培养方法实验——动物接种法

实验方法原理注意选择动物种类,年龄。按病毒侵袭部位的不同,选择适宜的接种途径,例如脑炎病毒以注射脑内最敏感。接种后经一定潜伏期,动物发病或死亡即进行解剖。根据动物的症状表现,器官病理改变,受染脏器组织悬液能在同种动物进行连续传代,并排除其他微生物污染的可能性等,即可证明有病毒的增殖。实验材料小白鼠实验步骤以无菌0.25 毫升注射器抽取脑炎病毒悬液0.1 毫升,去除注射器内的气泡。取出小白鼠,左手将小白鼠固定,固定时用大拇指和食指握住小白鼠的头部,左手手掌轻轻按住小白鼠的体部,使其俯卧在桌面上右手以灭菌棉签蘸以碘酒,消毒小白鼠的右侧颞部皮毛。右手拿注射器在小白鼠颞部(眼与耳根连线的中点略偏耳朵的方向)剌入,进入颅腔进针2~3 毫米,不要插得太深,注射量为0.02~0.03 毫升(不可超过0.05 ml)。注射完毕,将用过的注射器放入煮针锅内煮沸消毒。动物一般在3~4 天后开始发病,食欲减退,活动迟钝,毛耸,振颤,慢慢发展为麻痹,瘫......阅读全文

病毒的培养方法实验——动物接种法

实验方法原理注意选择动物种类,年龄。按病毒侵袭部位的不同,选择适宜的接种途径,例如脑炎病毒以注射脑内最敏感。接种后经一定潜伏期,动物发病或死亡即进行解剖。根据动物的症状表现,器官病理改变,受染脏器组织悬液能在同种动物进行连续传代,并排除其他微生物污染的可能性等,即可证明有病毒的增殖。实验材料小白鼠实

实验动物接种途径和接种方法——皮下接种法及腹腔接种法

实验材料实验动物试剂、试剂盒病毒试剂仪器、耗材注射器实验步骤皮下接种。注射时轻轻捏起皮肤,手持注射器将针头刺入,固定后即可进行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下,大鼠在背部或侧下腹部;豚鼠在后大腿内侧、背部等脂肪少的部位;兔在背部或耳根部注射;狗多在大腿外侧注射。皮下接种多用于观察动物病毒感染后的免疫学

实验动物接种途径和接种方法试验——颅内接种法

实验方法原理实验材料实验动物试剂、试剂盒病毒试剂仪器、耗材注射器实验步骤颅内接种法。将临床标本或特定的病毒直接接种于动物脑内,使动物形成实验性中枢神经系统感染。(1) 小白鼠:接种时用拇指与食指固定鼠头,消毒注射部位,于眼后角、耳前线和颅中线构成的三角区域中间进行注射,进针 2-3 mm。注射量乳鼠

病毒的培养方法实验——鸡胚培养法

病毒必须在易感的活细胞内才能增殖,因此,根据不同病毒选择敏感动物,离体组织细胞和鸡胚进行分离培养。实验方法原理鸡胚培养方法操作简便,适用于流感病毒,痘病毒,疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种,即绒毛尿囊膜接种法,羊膜腔(羊水囊)接种法,尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不

动物实验的接种途径和方法

 动物实验的接种途径和方法是检验技师考试的内容,医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。  动物实验的接种途径和方法包括:  ①皮内接种:通常以背部皮肤为宜。  ②皮下接种:选用腹壁、背部或腹股沟等处。  ③肌肉接种:一般选用臀部和大腿部肌肉,若为禽类以胸部肌肉为宜。  ④静脉接种:家兔以耳静脉外缘为

病毒的培养方法实验——传代细胞培养法

实验方法原理从人及动物某些组织,特别是肿瘤组织,经多次传代可建立传代细胞系,这种细胞能无限地传代,某些传代细胞对病毒敏感范围较广,可用作病毒的分离鉴定,如HeLa 细胞,Hep-2 细胞及KB 细胞。三种细胞均来自人肿瘤组织细胞,HeLa 细胞来自子宫颈癌,Hep-2 细胞来自喉癌而KB 细胞来自上

实验动物接种途径和接种方法试验

实验方法原理 实验材料 实验动物试剂、试剂盒 病毒试剂仪器、耗材 注射器实验步骤 皮下接种。注射时轻轻捏起皮肤,手持注射器将针头刺入,固定后即可进行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下,大鼠在背部或侧下腹部;豚鼠在后大腿内侧、背部等脂肪少的部位;兔在背部或耳根部注射;狗多在大腿外侧注射。皮下接种多用于观察

实验动物接种途径和接种方法试验——静脉接种

实验材料实验动物试剂、试剂盒病毒试剂仪器、耗材注射器实验步骤静脉接种。可造成病毒全身性感染,可观察病毒的致病性或机体对病毒的清除机制。(1) 小鼠、大鼠的静脉注射:常采用尾静脉注射。鼠尾静脉共有 3 根,左右两侧和背侧各 1根.两侧尾静脉比较容易固定,常被采用。(2) 豚鼠的静脉注射:一般采用前肢皮

动物病毒的鸡胚培养实验

实验方法原理 本实验用痘苗病毒和鸡新城疫病毒接种鸡胚。痘苗病毒适宜于在绒毛尿囊膜上生长,经培养后,产生肉眼可见的白色痘疱样病变,似小结节或白色小片云翳状。鸡新城疫病毒适宜接种在尿囊腔和羊膜腔内,生长后,鸡胚全身皮肤出现出血点,以脑后最显著。实验材料 痘苗病毒(Vavvinia virus)鸡新城疫病

动物病毒的鸡胚培养实验

实验方法原理本实验用痘苗病毒和鸡新城疫病毒接种鸡胚。痘苗病毒适宜于在绒毛尿囊膜上生长,经培养后,产生肉眼可见的白色痘疱样病变,似小结节或白色小片云翳状。鸡新城疫病毒适宜接种在尿囊腔和羊膜腔内,生长后,鸡胚全身皮肤出现出血点,以脑后最显著。实验材料痘苗病毒(Vavvinia virus)鸡新城疫病毒(

病毒的培养方法实验—组织培养法原代细胞单层培养

实验方法原理组织培养是目前培养病毒应用最广的一种培养方法,其优点是①经济适用,结果正确且敏感;②较实验动物易于控制。原代细胞单层培养法,是指动物(包括脊椎动物和无脊椎动物)的组织自机体取出后,经胰酶或其他细胞分散剂消化处理,得到单个细胞悬液。以一定量接种到特定容器中,加入细胞生长所必需的营养液,置合

病毒的培养方法实验

实验方法原理 鸡胚培养方法操作简便,适用于流感病毒,痘病毒,疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种,即绒毛尿囊膜接种法,羊膜腔(羊水囊)接种法,尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不同目的采用适宜的接种方法。实验步骤 1.  鸡胚的检查将9~11 日龄鸡胚置于检卵器上,照视观察

斜面培养接种法、穿刺接种法各有什么不同

1、培养的微生物种类不同(1)斜面培养适用于好氧微生物的培养;(2)液体培养适用于好氧微生物和植物组织培养,以迅速得到大量繁殖体为目的;(3)穿刺培养主要用于厌氧或兼性厌氧微生物的培养。2、微生物接种位置不同(1)斜面培养在斜面固体培养基面上对细菌、霉菌等微生物进行培养,能充分观察所培养的微生物的生

斜面培养接种法、穿刺接种法各有什么不同

1、培养的微生物种类不同(1)斜面培养适用于好氧微生物的培养;(2)液体培养适用于好氧微生物和植物组织培养,以迅速得到大量繁殖体为目的;(3)穿刺培养主要用于厌氧或兼性厌氧微生物的培养。2、微生物接种位置不同(1)斜面培养在斜面固体培养基面上对细菌、霉菌等微生物进行培养,能充分观察所培养的微生物的生

支原体培养实验——支原体固体培养基接种法

支原体(mycoplasma):又称霉形体,为目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体(支原体是原核细胞,原核细胞的细胞器只有核糖体)。实验材料肺炎支原体试剂、试剂盒糖酵解培养基基础培养基牛血清酵母浸液酚红醋酸铊青霉素仪器、耗材培养皿烧杯玻璃棒天平移液管离心机棉花拭子实

细菌分离之斜面培养基接种法实验

实验方法原理此法适用于纯培养和保存菌种,也可用于尿素和克氏双糖培养基的鉴别试验。由于目的不同接种的方法略有差异。用于纯培养的斜面接种法是将接种环(针)灭菌, 挑取单个菌落从培养基底向上划一道直线,然后以蛇形划线接种在琼脂斜面上即可,鉴别培养基斜面接种是用接种针,挑取待鉴定菌落的细菌,一般应取菌落

细菌分离之斜面培养基接种法实验

实验方法原理此法适用于纯培养和保存菌种,也可用于尿素和克氏双糖培养基的鉴别试验。由于目的不同接种的方法略有差异。用于纯培养的斜面接种法是将接种环(针)灭菌, 挑取单个菌落从培养基底向上划一道直线,然后以蛇形划线接种在琼脂斜面上即可,鉴别培养基斜面接种是用接种针,挑取待鉴定菌落的细菌,一般应取菌落的顶

接种病毒方法小结

1.应该在细胞状态最好的时候,进行病毒接种或复苏;2.接种前头天,进行细胞传代,细胞数量应以能让细胞在第二天内达到覆盖满90%的培养瓶为准,并且一定要在细胞传代后48h内接种病毒;3.第二天细胞长为单层且状态较好时,开始接种病毒;4.先移弃培养瓶中的生长液,用1*PBS轻轻洗细胞面3次,最后用移液管

接种病毒方法小结

1.应该在细胞状态最好的时候,进行病毒接种或复苏;2.接种前头天,进行细胞传代,细胞数量应以能让细胞在第二天内达到覆盖满90%的培养瓶为准,并且一定要在细胞传代后48h内接种病毒;3.第二天细胞长为单层且状态较好时,开始接种病毒;4.先移弃培养瓶中的生长液,用1*PBS轻轻洗细胞面3次,最后用移液管

支原体培养实验——支原体半固体培养基接种法

实验方法原理一、标本采集 支原体常侵及人和动物的粘膜表面,一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中,或取其分泌液,若标本是组织块,可在灭菌乳钵或玻璃匀浆后接种,取样后应尽快接种培养。 二、分离培养 混种法:在制备半固体培养基时,培养基加热溶化,温度降至50℃时,添加动物血清

厌氧菌的接种培养方法

 厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌,必须创造一个无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂,或用物理、化学方法去除环境中的游离氧,以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基,牛心脑浸液培养基等。  常用的厌氧培养方法有许多,可根据实际情况选用。  厌氧缸法 接种好标本的平板或液体培养基试

厌氧菌接种培养方法

厌氧菌在有氧的情况下不能生长.要培养厌氧菌,必须创造一个无氧的环境.通常用培养基中加入还原剂,或用物理、化学方法去除环境中的游离氧,以降低氧化还原电势.如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基,牛心脑浸液培养基等.常用的厌氧培养方法有许多,可根据实际情况选用. 厌氧缸法接种好标本的平板或液体培养基试管,可放入

病毒的鸡胚培养_卵黄囊接种

实验方法原理卵黄囊接种法主要用于虫媒病毒、衣原体及立克次体等的分离和繁殖。这些大的病原体主要在卵黄囊的内皮细胞生长,且生长速度很快,立克次体在染色后也可看到。实验材料鸡胚试剂、试剂盒消毒剂 (2. 5% 碘酒和 75% 酒精)仪器、耗材检卵灯照明灯卵杯卵盘鸡胚开孔器等实验步骤1. 接种步骤与方法(1

病毒的鸡胚培养_羊膜腔接种

病毒的鸡胚培养可用于:(1)某些病毒分离、增殖;(2)病毒的毒力测定、中和试验;(3)生产疫苗等。实验方法原理 羊膜腔接种主要应用于从临床材料(如患者咳嗽液等)分离流感病毒等。这种接种途径可直接感染羊膜腔的内胚层,也可被鸡胚咽下或吸入,引起全胚胎感染。另外,病毒也可被排泄到尿囊腔中,使尿囊腔中含有大

病毒的鸡胚培养_尿囊腔接种

实验方法原理尿囊腔接种法广泛应用于流感病毒、流行性腮腺炎病毒和新城疫病毒的适应和传代培养,这些病毒被注射到尿囊腔后,可在内皮细胞中复制,复制的病毒被释放到尿囊液中,因此,在尿囊液中含有大量的病毒。实验材料鸡胚试剂、试剂盒消毒剂 (2. 5% 碘酒和 75% 酒精)仪器、耗材检卵灯照明灯卵杯卵盘鸡胚开

微生物污染的排除实验——动物体内接种除菌法

实验步骤把受支原体污染的肿瘤细胞可接种在同种动物皮下或腹腔中,借动物免疫系统消灭支原体,而肿瘤细胞却能在体内继续生长,待—定时间后,从体内取出细胞再进行培养繁殖。但此法稍繁琐,按同一原理也可在体外进行。

病毒的鸡胚培养_绒毛尿囊膜接种

实验方法原理绒毛尿囊膜接种常用于牛痘病毒、天花病毒、单纯疱疹病毒的分离,因为这些病毒在绒毛尿囊膜上可形成肉眼可见的斑点状或痘疱状病灶。另外,病毒可在绒毛尿囊膜上进行滴定,因为感染性病毒颗粒的数目可以通过产生的斑和痘的数目来计算。该方法还可用于抗病毒血清的滴定试验,即在有抗体存在的情况下,痘疱形成受到

昆虫病毒的培养实验

实验方法原理培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法,后者比较容易成功,使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾(Prodenialitura)核型多角体感染宿主来培养病毒。斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后,在细胞核内形成多角体,多角体内包含着很多病毒粒子。斜

昆虫病毒的培养实验

实验方法原理 培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法,后者比较容易成功,使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾(Prodenialitura)核型多角体感染宿主来培养病毒。斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后,在细胞核内形成多角体,多角体内包含着很多病毒粒子。

动物病毒毒力测定实验——TCID50-的测定方法

病毒感染能力测定是评估其毒力的常用方法之一,通常采用测定实验动物的半数致死量(50% lethel dose,LD50)和测定细胞培养物的半数组织(细胞)培养物感染量(50% tissue culture infectious dose,TCID50)来评估病毒的感染能力(毒力)。用细胞培养物测定病