植物体内过氧化物酶活性的测定实验

实验方法原理在过氧化氢存在下,过氧化物酶能使愈创木酚氧化,生成茶竭色4-邻甲氧基苯酚,在470nm波长处测定生成物的吸光度(A)值,即可求出该酶活性。实验材料植物叶片试剂、试剂盒磷酸缓冲液愈创木酚仪器、耗材分光光度计离心机离心管研钵移液管移液管架试管试管架洗耳球实验步骤一、材料、仪器设备及试剂1. 材料:植物叶片2. 仪器设备:分光光度计,离心机,离心管,研钵,移液管,移液管架,试管,试管架,洗耳球。3. 试剂及配制:0.1mol·L-1磷酸缓冲液(pH7)。反应液(100 ml 0.1mol·L-1磷酸缓冲液(pH6)中加入0.5 ml 愈创木酚、1 ml 30﹪H2O2,充分摇匀)。二、实验步骤1. 酶液提取称取植物叶片1g,剪碎置于已冷冻过的研钵中,加入少量石英砂,分两次加入总量为10 mlpH7磷酸缓冲液,研磨成匀浆后,倒入离心管中,在8000 r / min离心15min,上清液即为粗酶提取液,倒入小试管低温下放置备用......阅读全文

酶活性的测定实验

酶活性的测定可应用于:(1)酶动力学的研究;(2)酶抑制的研究。实验方法原理1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量的量度,取决于指定的条件。SI单位是katal,1 katal = 1 mol /s,更实际

酶活性测定实验

实验方法原理U/L=K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度.以后每隔30秒测定一次.5. 实验结果:计算ΔA/min求出测定结果.

酶活性测定实验

实验方法原理U/L=K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度.以后每隔30秒测定一次.5. 实验结果:计算ΔA/min求出测定结果.

过氧化物酶活性的测定就有哪些方法

冷热水测定实验48过氧化物酶活性的测定(比色法)过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶,它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有

过氧化物酶活性的测定就有哪些方法

实验 48 过氧化物酶活性的测定(比色法)过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶,它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系,在植物生长发育过程中,它的活性不断发生变化,因此测量这种酶,可以反映某一时期植物体内代谢的变化.一、原理在有过氧化氢存在下,过氧化物酶能使愈创木酚氧化,生成

过氧化物酶活性测定的方法有哪些

实验48过氧化物酶活性的测定(比色法)过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶,它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系,在植物生长发育过程中,它的活性不断发生变化,因此测量这种酶,可以反映某一时期植物体内代谢的变化。一、原理在有过氧化氢存在下,过氧化物酶能使愈创木酚氧化,生成茶褐

过氧化物酶活性的测定(比色法)

原理   过氧化物酶广泛分布于植物的各个组织器官中。在有过氧化氢存在下,过氧化物酶能使愈创木酚氧化,生成茶褐色物质,可用分光光度计测量生成物的含量。 仪器药品   721型分光光度计     离心机   秒表           天平   研钵         

植物体内硝态氮含量的测定

实验材料 植物材料试剂、试剂盒 硝态氮标准溶液氢氧化钠溶液水杨酸─硫酸溶液仪器、耗材 分光光度计天平试管吸量管容量瓶洗耳球电炉铝锅玻璃泡

植物体内硝态氮含量的测定

 硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量往往能反映土壤中硝态氮供应情况,因此可作为土壤肥氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量,不仅能够反映出植物的氮素营养情况,而且对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。    (一)原理    在浓酸条件下,NO3-与水杨酸反应,生成硝基水杨酸

NK细胞活性测定实验

实验方法原理 用放射性核素标记靶细胞,当靶细胞受到破坏时,放射性核素被释放出来,通过测定释放或残留在未被破坏细胞内的放射性核素放射活性,即可计算和推测杀伤细胞的细胞毒活性。常用的放射性核素有51Cr、3H-Dr、125I-UdR等。本实验采用51Cr释放法检测人NK细胞活性。实验材料 靶细胞试剂、试

植物过氧化物酶的简易鉴定实验

实验方法原理 过氧化物酶是卟啉环中含有铁的金属蛋白质。过氧化物酶与过氧化氢形成一种化合物,在这种化合物中的过氧化氢被活化,从而能氧化酚类化合物,其作用如同氢的受体一样。实验材料 马铃薯块茎试剂、试剂盒 邻苯二酚酒精溶液H2O2仪器、耗材 试管实验步骤 马铃薯块茎,切碎,加到两个试管中,其中一个先煮沸

植物过氧化物酶的简易鉴定实验

实验方法原理过氧化物酶是卟啉环中含有铁的金属蛋白质。过氧化物酶与过氧化氢形成一种化合物,在这种化合物中的过氧化氢被活化,从而能氧化酚类化合物,其作用如同氢的受体一样。实验材料马铃薯块茎试剂、试剂盒邻苯二酚酒精溶液H2O2仪器、耗材试管实验步骤马铃薯块茎,切碎,加到两个试管中,其中一个先煮沸数分钟,然

药物对动物体内NK细胞活性的影响实验

实验方法原理 肺癌是最常见的严重严胁人类健康和生命的恶性肿瘤之一, 机体免疫功能低下,与肺癌的发生发展密切相关。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 RPMI1640 培养基中止液Hank. s曲拉通X-100仪器、耗材 酶联免疫监测仪96 孔24 孔平底培养板离心沉淀机实验步骤 1.  动物分组及用药(1)

药物对动物体内NK细胞活性的影响实验

瘤细胞悬液皮下接种法实验方法原理肺癌是最常见的严重严胁人类健康和生命的恶性肿瘤之一, 机体免疫功能低下,与肺癌的发生发展密切相关。实验材料小鼠试剂、试剂盒RPMI1640 培养基中止液Hank. s曲拉通X-100仪器、耗材酶联免疫监测仪96 孔24 孔平底培养板离心沉淀机实验步骤1.  动物分组及

过氧化物酶的测定实验

供体:ABTS 供体:愈创木酚 供体:联二茴香胺             实验方法原理 实验材料

过氧化物酶的测定实验

实验方法原理 实验材料 酶样品试剂、试剂盒 磷酸钾ABTSH2O2 溶液仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」25℃ 时,在 414 nm 处,ε414=24.6×103 l/(mmol· mm)。必须注意,1 mol H2O2 形成 2 mol 氧化的 ABTS(Szuto

活体法检测物体内硝酸还原酶活性实验

实验步骤 一、材料仪器设备及试剂1. 材料:水稻或小麦的叶片、幼穗等。2. 仪器设备:真空抽气泵;真空干燥器;小烧杯;玻璃瓶塞;其它用具同离体法。3. 试剂及配制:亚硝酸钠标准液(与离体法相同)。0.1mol·L-1KNO3(配制方法同离体法)。1%磺胺(配制方法同离体法);0.02%萘基乙烯胺(配

活体法检测物体内硝酸还原酶活性实验

实验步骤:一、材料仪器设备及试剂1. 材料:水稻或小麦的叶片、幼穗等。2. 仪器设备:真空抽气泵;真空干燥器;小烧杯;玻璃瓶塞;其它用具同离体法。3. 试剂及配制:亚硝酸钠标准液(与离体法相同)。0.1mol·L-1KNO3(配制方法同离体法)。1%磺胺(配制方法同离体法);0.02%萘基乙烯胺(配

活体法检测物体内硝酸还原酶活性实验

实验步骤一、材料仪器设备及试剂1. 材料:水稻或小麦的叶片、幼穗等。2. 仪器设备:真空抽气泵;真空干燥器;小烧杯;玻璃瓶塞;其它用具同离体法。3. 试剂及配制:亚硝酸钠标准液(与离体法相同)。0.1mol·L-1KNO3(配制方法同离体法)。1%磺胺(配制方法同离体法);0.02%萘基乙烯胺(配制

植物体内可溶性蛋白含量的测定

一、原理LoWry法是双缩脲法(Biuret)和福林酚法(Folin-酚)的结合与发展。其原理是蛋白质溶液用碱性铜溶液处理后,碱性铜试剂与蛋白质中的肽键作用产生双缩脲反应,形成铜—蛋白质的络合盐。再加入酚试剂后,在碱性条件下,这种被作用的蛋白质上的酚类基团极不稳定,很容易还原酚试剂中的磷钨酸和磷钼酸

植物体内游离脯氨酸含量的测定

实验概要掌握小麦叶片内游离脯氨酸含量的测定方法。实验原理植物在正常条件下,游离脯氨酸含量很低,但遇到干旱、低温、盐碱等逆境时,游离脯氨酸便会大量积累,并且积累指数与植物的抗逆性有关。因此,脯氨酸可作为植物抗逆性的一项生化指标。脯氨酸是水溶性最大的氨基酸,具有很强的水合能力,其水溶液具有很高的水势。脯

植物体内游离氨基酸总量的测定

一、原理游离氨基酸的氨基可与水合茚三酮反应,产生蓝紫色化合物,其颜色的深浅与游离氨基酸的含量成正比。二、仪器设备分光光度计;电子天平;容量瓶25ml或50ml 3个;漏斗(直径6厘米)3个、滤纸适量;20ml刻度试管 7支;移液管0.5ml 3支、5ml 1支;试管架;玻棒;吸耳球;剪刀;移液管架;

植物过氧化物酶同工酶测定

凡能催化同一种化学反应,但其分子结构和带电性质不同的一组酶称同工酶(isoenzyme)。同工酶谱的差异是基因表达的差异造成的,所以在研究植物基因调控与生长发育及其与环境条件的关系以及许多生理生化和遗传问题时,常常要分析同工酶谱的差异。因此,同工酶研究在理论和实践中都有非常重要的意义。一、原理聚丙烯

谷丙转氨酶的活性测定实验

显色法             实验方法原理 血清谷丙转氨酶(SGPT)能催化丙氨酸与酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸,丙酮酸在酸性条件下与2,4-二硝基苯肼可缩合成丙酮酸二硝基苯腙,该腙

淀粉酶活性的测定实验

实验方法原理α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐热,在高温下易钝化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化,通常提取液同时有两种淀粉酶存在,测定时,可根据它们的特性分别加以处理,钝化其中之一,即可测出另一酶的活性。将提取液加热到70℃维持15分钟以钝化β-淀粉酶,便可测定

淀粉酶活性的测定实验

  实验方法原理α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐热,在高温下易钝化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化,通常提取液同时有两种淀粉酶存在,测定时,可根据它们的特性分别加

淀粉酶活性的测定实验

实验方法原理:α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐热,在高温下易钝化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化,通常提取液同时有两种淀粉酶存在,测定时,可根据它们的特性分别加以处理,钝化其中之一,即可测出另一酶的活性。将提取液加热到70℃维持15分钟以钝化β-淀粉酶,便可测

抗坏血酸过氧化物酶(AsAPOD)活性的测定

实验概要测定植物中抗坏血酸过氧化物酶(AsA-POD)的活性。实验原理    AsA-POD催化AsA与H2O2反应,使AsA氧化成单脱氢抗坏血酸(MDAsA)。随着AsA被氧化,溶液中290nm波长下的消光度值(A290)下降,根据单位时间内A290减少值,计算AsA-POD活性。AsA氧化量

植物体内可溶性的测定(福林-酚法)

实验概要本文介绍了福林-酚法测定植物体内可溶性蛋白质含量的原理及操作步骤等。实验原理该方法是双缩脲法的发展,包括两步反应:1. 在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质—铜络合物。2.   此络合物将试剂磷钼酸—磷钨酸(FolIn试剂)还原,混合物深蓝色(磷钼蓝和磷钨蓝混合物),颜色深浅与蛋白质含量成

植物体内可溶性蛋白和非可溶性蛋白含量的测定实验

实验方法原理 植物材料经Tris-HCl缓冲液研磨、离心后,可溶性蛋白质溶于上清液中,非可溶性蛋白则存在于沉淀部分。将沉淀用碱水解,则会得到非可溶性蛋白的提取液。蛋白质提取液与考马斯亮蓝G-250反应呈蓝色。在一定范围内,蛋白质的含量与反应液在595nm波长的吸光度呈正比,由此可求出蛋白质的含量。实