鉴定分析植物蛋白复合物的蓝绿非变性凝胶电泳实验
试剂、试剂盒十二烷基 β-D-麦芽糖苷增溶液TritonX-100 增溶液洋地黄阜苷增溶液考马斯亮蓝染色液丙烯酰胺溶液BN 凝胶缓冲液实验步骤3.1 BN-PAGE 样品的制备所有样品制备步骤必须在 4°C 下操作，在开始制备样品前（见 26.3.1 节 1 和 26. 3.1 节 2) ，要制备好 BN 凝胶（见 26. 3. 2) 。1. 膜组分( 1 ) 按照标准的方法步骤制备要研究的膜组分，如细胞质膜、类囊体膜或线粒体膜。或者使用完整细胞器，如质体、线粒体或过氧化物酶体，作为 BN-PAGE 的初始实验材料。( 2 ) 确定蛋白质浓度，如用 Lowry 方法等。( 3 ) 将蛋白质浓度调为 10 μg/μl。( 4 ) 15000 g 离心 100 μl 样品 10 min，沉淀膜或细胞器组分。( 5 ) 用十二烷基 β-D-麦芽糖苷，Triton X-100 或洋地黄皂苷增溶液悬浮沉淀物（见注释 1)。( 6 ) 将悬......阅读全文
影响凝胶聚合的因素
1) Acr及Bis的纯度：应选用分析纯的Acr及Bis，如试剂不纯，含有杂质或丙烯酸时，则凝胶聚合不均一，或聚合时间延长甚至不聚合， 因而需进一步纯化。 Acr和Bis贮液的pH值为4.9-5.2，当pH值的改变大于0.4pH单位则不能使用，因在偏酸或偏碱的环境中，它们可不断水解放出丙烯酸和N
醋酸纤维素膜电泳分离鉴定蛋白质实验_电泳法
混合蛋白质样品中各种蛋白质的等电点不同, 在pH8 . 6 的巴比妥缓冲液中, 各种蛋白质所带的静电荷量不同, 加上蛋白质分子大小不相同, 在电场中移动的速度也不等, 例如, 血清或卵清样品中白蛋白等电点比其他蛋白质低, 在pH8 . 6 时带的负电荷比其他蛋白质多, 加上白蛋白的分子较小, 因此在
凝胶的原理方法
Native-PAGE原理非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)是在不加入SDS 疏基乙醇等变性剂的条件下， 对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，常用于同工酶的鉴定和提纯。未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝胶电泳可以使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电，电泳后将凝胶切成两半，一半
质粒DNA的提取与电泳鉴定
质粒DNA的提取是从事基因工程工作中的一项基本实验技术，但提取方法有很多种，以下介绍一种最常用的方法： 碱裂解法：此方法适用于小量质粒DNA的提取，提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下： 1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2ml LB培养基。 2、37℃振荡培养过夜。 3
质粒DNA的提取与电泳鉴定
质粒DNA的提取是从事基因工程工作中的一项基本实验技术，但提取方法有很多种，以下介绍一种最常用的方法：碱裂解法：此方法适用于小量质粒DNA的提取，提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下：1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2mlLB培养基。2、37℃振荡培养过夜。3、取1.5
相互作用蛋白鉴定实验——鉴定诱饵蛋白（LacZ的活性分析）
实验方法原理捕捉相互作用蛋白的第一步是构建能够表达 LexA 与目的蛋白的融合体的质粒。这种质粒转化到包含 LEU2 和lacZ 报道基因的报道酵母株中，并要行一系列的对照实验来鉴定所构建的诱饵蛋白是否适用，是否需要修饰，或是否应改变酵母菌报道条件。这些对照实验实现了诱饵蛋白在酵母菌中作为一种稳定蛋
酶测定法实验
在本单元中，用一种较简单的方法测定它对核心 RNA 聚合酶自非特异性模板 poly(dAT) 起始转录的刺激作用。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。试剂、试剂盒核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液
Nature：鉴定出核孔复合物的三维结构
核孔复合物（Nuclear Pore Complex, NPC）是细胞中最大的通道，跨越核膜的双层膜。这个非凡的通道为细胞核和细胞质之间来回运输大分子提供通道。迄今为止，由于它的大尺寸和动态性，从结构和功能上全面理解它一直受到阻碍。 在一项新的研究中，美国研究人员首次获得酵母NPC的近乎完整的三维结
做电泳实验常见条带问题分析
一、微笑形区带（两边翘起，中间凹下）： 形成原因：主要是由凝胶中间部分凝固不均匀引起的，多出现于较厚的凝胶中。 处理办法：待其充分凝固再做实验。 二、皱眉形区带（两边向下，中间鼓起）： 形成原因：主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是由两板之间的底部间隙气泡未排除干
做电泳实验常见条带问题分析
一、微笑形区带（两边翘起，中间凹下）： 形成原因：主要是由凝胶中间部分凝固不均匀引起的，多出现于较厚的凝胶中。处理办法：待其充分凝固再做实验。二、皱眉形区带（两边向下，中间鼓起）：形成原因：主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是由两板之间的底部间隙气泡未排除干净引起的。处理办法：可在两板之间加入适量缓
蛋白质样品中蛋白类杂质的检测方法
摘要：本文围绕蛋白质纯度的重要性，阐述了蛋白类杂质的检测方法，包括电泳法，色谱法，沉降速率测定法，质谱法，光散射法。任何方法都不能直接定量蛋白质样品的纯度。无论最终目的是为了解释分析数据、验证过程质量，还是为了确保生物制剂产品的安全性，样品纯度的测定都是至关重要的环节。随着蛋白类生物制品的发展，蛋白
木本植物蛋白质提取实验
实验材料树皮试剂、试剂盒沉淀缓冲液漂洗缓冲液溶解缓冲液仪器、耗材离心管实验步骤3.1 提取总蛋白质 （见注释 5)( 1 ) 将去塞的 10 ml 空离心管称重。我们选用韧性好的聚碳酸酯旋盖圆底高速离心管。( 2 ) 细胞碎裂：500 mg 新鲜组织（保存在 -80°C ) 在液氮中用研钵和杵捣成粉
木本植物蛋白质提取实验
实验材料树皮 试剂、试剂盒沉淀缓冲液 漂洗缓冲液
木本植物蛋白质提取实验
实验材料 树皮试剂、试剂盒 沉淀缓冲液漂洗缓冲液溶解缓冲液仪器、耗材 离心管实验步骤 3.1 提取总蛋白质 （见注释 5)( 1 ) 将去塞的 10 ml 空离心管称重。我们选用韧性好的聚碳酸酯旋盖圆底高速离心管。( 2 ) 细胞碎裂：500 mg 新鲜组织（保存在 -80°C ) 在液氮中用研钵和
从RNA抽提到电泳鉴定1
RNA抽提一，准备工作1， 实验器具与材料：（1） 移液枪：1ml、200ul、10ul（2） 吸头：1ml、200ul、20ul（3） 吸头台：放置1ml吸头的一个，放置200ul和20ul的吸头一个（4） EP管1.5ml、100ul（5） 玻璃研磨器（6） 容量瓶：1000ml（7） 盐水瓶：
从RNA抽提到电泳鉴定2
逆转录（RT）一，准备工作1， 实验器具与材料：（1）移液枪：200ul、10ul（2）吸头：200ul、20ul（3）EP 管1.5ml、100ul（4）水浴箱2，实验器具的处理与准备塑料制品：（包括吸头、EP管等）将塑料制品逐个浸泡于 1‰DEPC水中（必要时小枪头需要用吸管打入DEPC水）37
从RNA抽提到电泳鉴定3
3， 稍离心4， 100℃沸水浴1分钟5， 趁热加入Tag酶0.5ul（冰上操作）6， 再加入50ul液体石蜡封闭7， 10000rmp离心1分钟8， PCR条件94℃ 1min58℃ 50sec72℃ 1min30sec进行40个循环，然后72℃ 10min 完后4℃保温。9，10000rmp离心
裸子植物鉴定实验_松科鉴定
实验材料苏铁带球果新鲜材料、苏铁大抱了叶新鲜叶片（或腊叶标本）、银杏腊叶标木（或新鲜叶片）银杏种子纵切片油松新鲜材料（或腊叶标本）油松叶横切片、侧柏新鲜材料（或腊叶标本）试剂、试剂盒乙酸洋红仪器、耗材显微镜镊子解剖针载玻片盖玻片滴管培养皿吸水纸实验步骤（三）松科 Pinaeeae油松 ( 图 2-2
醋酸纤维素膜电泳分离鉴定蛋白质实验
电泳法 实验方法原理 混合蛋白质样品中各种蛋白质的等电点不同, 在pH8 . 6 的巴比妥缓冲液中, 各种蛋白质所带的静电荷量不同, 加上蛋白质分子大小不
醋酸纤维素膜电泳分离鉴定蛋白质实验
实验方法原理 混合蛋白质样品中各种蛋白质的等电点不同, 在pH8 . 6 的巴比妥缓冲液中, 各种蛋白质所带的静电荷量不同, 加上蛋白质分子大小不相同, 在电场中移动的速度也不等, 例如, 血清或卵清样品中白蛋白等电点比其他蛋白质低, 在pH8 . 6 时带的负电荷比其他蛋白质多, 加上白蛋
制备电泳实验——连续电泳
仪器、耗材聚丙烯酰胺凝胶电泳琼脂糖电泳实验步骤1. 连续洗脱电泳使用连续洗脱的聚丙烯酰胺凝胶电泳或琼脂糖电泳能制备微克到毫克级的多肽，蛋白或核酸。装置可以是各种各样的。有的是把样品直接加在固体凝胶的表面，分子经过电泳分离后，由流动的缓冲液洗脱，纯化后的分子被浓缩，并由蠕动泵和部分收集器收集。2. 连
免疫电泳实验_电泳
试剂、试剂盒Tris-巴比妥缓冲液贮液电极缓冲液琼脂糖溶液实验步骤电泳时温度可控制在 10~15℃，同前述电泳的方法一样，先在冷却板上铺一层煤油，再铺胶。电极芯与凝胶的边缘接触 5~10 mm，并保持平行，电泳时的电场强度约为 20 V/cm。
细菌鉴定实验
实验方法原理 玻片凝集反应（slide agglutirlation）是将已知的抗体直接与未知的颗粒性抗原物质（如细菌，立克次体，钩端螺旋体等）混合，在有适当电解质存在的条件下，如两者对应便发生特异性结合而形成肉眼可见的凝集物，即为阳性：如两者不对应便无凝集物出现，即为阴性。此法属定性试验，
关于免疫电泳（M蛋白鉴定）的简介
M蛋白是浆细胞或B淋巴细胞单克隆大量增殖时所产生的一种异常免疫球蛋白，常出现于恶性淋巴瘤、巨球蛋白血症、多发性骨髓瘤患者的血或尿中，其本质是免疫球蛋白或其片段（轻链、重链等）。M蛋白的测定依赖于免疫学方法。首先应采用血清蛋白区带电泳，以证实M蛋白的存在，然后进行免疫球蛋白测定和免疫电泳，做进一步
质粒DNA提取及电泳分析实验结果图的分析
1，虽然不知道你点了多少，如果是1ul，2ul，这个质粒的提取量也就还行，就我的感觉，应该在200ng/ul的浓度或更高（看你点了多少样）；2，不告诉大家你用的marker，分子量试不好说的，更何况，你没酶切过，用质粒与线性的Marker比较没有任何意义。纯度也没什么大问题，质粒提取出现3条是最正常
实验室分析仪器电泳仪电泳分析常用方法
(一)醋酸纤维素薄膜电泳 醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。这种薄膜对蛋白质样品吸附性小,几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象,又因为膜的亲水性比较小,它所容纳的缓冲液也少,电泳时电流的大部分由样品传导,所以分离速度快,电泳时间短,样
植物蛋白的简介
植物蛋白尽管一般不如动物蛋白好，但仍是人类膳食蛋白质的重要来源。谷类一般含蛋白质6%-10%，不过其中必需氨基酸种或多种含量低（限制氨基酸）。薯类含蛋白质2%-3%。某些坚果类如花生、核桃、杏仁和莲子等则含有较高的蛋白质（15%-30%）。豆科植物如某些干豆类的蛋白质含量可高达40%左右。特别是
植物蛋白的来源
谷类一般含蛋白质6%-10%，蛋白质含量不算高，但由于是人们的主食，所以仍然是蛋白质的主要来源。 [2] 豆类含有丰富的蛋白质，特别是大豆含蛋白质高达36%-40%，氨基酸组成也比较合理，在体内的利用率较高，是植物蛋白质中非常好的蛋白质。某些坚果类如花生、核桃、杏仁和莲子等则含有较高的蛋白质（1
裸子植物鉴定实验_苏铁科鉴定
实验材料苏铁带球果新鲜材料、苏铁大抱了叶新鲜叶片（或腊叶标本）、银杏腊叶标木（或新鲜叶片）银杏种子纵切片油松新鲜材料（或腊叶标本）油松叶横切片、侧柏新鲜材料（或腊叶标本）试剂、试剂盒乙酸洋红仪器、耗材显微镜镊子解剖针载玻片盖玻片滴管培养皿吸水纸实验步骤苏铁科cycadaceae苏铁为常绿乔木，茎短不
裸子植物鉴定实验_银杏科鉴定
实验材料苏铁带球果新鲜材料、苏铁大抱了叶新鲜叶片（或腊叶标本）、银杏腊叶标木（或新鲜叶片）银杏种子纵切片油松新鲜材料（或腊叶标本）油松叶横切片、侧柏新鲜材料（或腊叶标本）试剂、试剂盒乙酸洋红仪器、耗材显微镜镊子解剖针载玻片盖玻片滴管培养皿吸水纸实验步骤（二）银杏科 Ginkgoaceae银杏 ( 图