报告基因实验——植物提取物中LUC活性的检测

实验材料植物组织试剂、试剂盒裂解液萤光素酶分析缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、完整组织1. 液氮速冻植物组织(5~50 mg),研磨成粉末状。2. 100~400 ul 裂解液室温重悬,组织匀浆。3. 16000 g,4℃ 离心 15 min,弃掉破碎的细胞。4. 检测提取物中的蛋白质浓度。5. 立即使用提取物,或者 -80℃ 保存。二、原生质体1. 50 g 离心 4 min,小份收集(1 x106 ) 原生质体。2. 用 2 ml 的 3M 缓冲液重悬,50 g 离心 4 min。3. 400 ul 裂解液重悬,短暂涡旋(或者通过 26G 的抽吸)。4. 16000 g,4℃ 离心 15 min,沉淀破碎的细胞。检测提取物的蛋白质浓度。三、萤光素酶的检测1. 取 20 ul 分装的组织提取液于不透明的微型板,以未转化组织的提取物作对照。2. 设置光度计程序,加入 100 ul 萤光素酶分析缓冲液,等待 2s,在 ......阅读全文

标记基因的分类

选择基因和报告基因都可以看做是标记基因,都起着标记目的基因是否成功转化的作用,但是它们又有着各自的特点。选择基因(又称选择标记基因),主要是一类编码可使抗生素或除草剂失活的蛋白酶基因,这种基因在执行其选择功能时,通常存在检测慢(蛋白酶作用需要时间)、依赖外界筛选压力(如抗生素、除草剂)等缺陷。而报告

如何提高植物细胞中-ADH-和-ALDH-的活性?

以下方法可能有助于提高植物细胞中乙醇脱氢酶(ADH)和乙醛脱氢酶(ALDH)的活性:适度缺氧处理:在一定程度上创造缺氧环境,诱导植物细胞启动应对缺氧的机制,从而提高 ADH 和 ALDH 的活性。但缺氧程度和时间需要控制,过度缺氧会对植物造成伤害。激素调节:使用适当浓度和类型的植物激素处理,例如乙烯

什么是LUC基因

LUC基因指报告基因,是一个分子生物学概念,它是指一类在细胞、组织/器官或个体处于特定情况下会表达并使得他们产生易于检测、且实验材料原本不会产生的性状的基因。作为报告基因,在遗传选择和筛选检测方面必须具有以下几个条件:已被克隆和全序列已测定;表达产物在受体细胞中本不存在,即无背景,在被转染的细胞中无

白芍提取物的活性成分介绍

  根含芍药甙(paeoniflorin)、氧化芍药甙(oxypaeoniflorin)、芍药内酯甙(albiflorin)、苯甲酰芍药甙(benzoylpaeoniflorin)、芍药甙元酮(paeoniflorigenone)、丹皮酚原甙(paeonolide)、丹皮酚(paeonol);尚含苯

白芸豆提取物的活性介绍

  白芸豆中含有的芸豆蛋白是一种天然的淀粉酶抑制剂,其效果优于小麦及别的农作物中提取的,其主要用于治疗肥胖症和糖尿。  白芸豆提取物的功效成份菜豆素(又名芸豆蛋白,英文Phaseolin)是一种天然的α-淀粉酶抑制剂(α-amylase inhibitor)。  淀粉酶抑制剂是一种纯天然生物活性物质

常山提取物的活性成分介绍

  常山含有效成分黄常山碱,简称常山碱,主要为黄常山碱甲、乙及丙,三者为互变异构体。还含黄常山定以及4-喹唑酮、伞形花内酯等。从根及叶中分离出的退热碱和异退热碱,相应地就是黄常山碱乙和黄常山碱甲。叶含生物碱总置约0.5%,其中黄常山碱的含量比根中的多10~20倍。另含少量三甲胺。根含总生物碱约0.1

蒲公英提取物的活性成分介绍

  蒲公英全草含蒲公英甾醇、胆碱、菊糖、果胶等。根中含蒲公英醇、蒲公英赛醇、ψ-葡公英甾醇、蒲公英甾醇、β-香树脂醇、豆甾醇、β-谷甾醇、胆碱、有机酸、果糖、蔗糖、葡萄糖、葡萄糖甙以及树脂、橡胶等。叶含叶黄素、蝴蝶梅黄素、叶绿醌、。花中含山金车二醇、叶黄素和毛莨黄素。花粉中含β-谷甾醇、5z-豆甾-

荧光素酶报告基因用品的选择与应用(二)

       如果您的实验需要构建双荧光素酶报告载体,我们有下列产品供您挑选:        1.我们有双荧光素酶报告载体产品  产品名称 货号 规格 产品描述 pEZX-FR01 ZX001 10ug 包

荧光素酶的作用原理及应用

荧光素酶(luciferase)是自然界中能够产生生物荧光的酶的总称。荧光素酶可以催化荧光素氧化成氧化荧光素,在荧光素氧化的过程中,会发出生物荧光。然后可以通过荧光测定仪测定荧光素氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系,可以极其灵敏、高效地检测基因的表达,是检测转录因子与目的基因

报告基因实验——利用MUG检测-β葡萄糖醛酸酶(GUS)

报告基因实验可以用于:(1)植物分子生物学研究;(2)用以鉴别基因的表达模式;(3)在获得稳定转化植株的过程中也可用作转化细胞的标记。实验方法原理报告基因是一个分子生物学概念,它是指一类在细胞、组织/器官或个体处于特定情况下会表达并使得他们产生易于检测、且实验材料原本不会产生的性状的基因。作为报告基

双荧光素酶报告基因检测实验技术服务

1、  实验简介Luciferase报告基因系统是以 荧光素(luciferin) 为底物来检测 萤火虫荧光素酶 (fireflyluciferase)活性的实验。荧光素底物会在荧光素酶作用下会发光(波长540-600nm),且光强能反应荧光素酶的表达量。荧光素酶的蛋白表达量与启动子活性、mRNA的

双荧光素酶报告基因检测实验技术服务

1、  实验简介Luciferase报告基因系统是以 荧光素(luciferin) 为底物来检测 萤火虫荧光素酶 (fireflyluciferase)活性的实验。荧光素底物会在荧光素酶作用下会发光(波长540-600nm),且光强能反应荧光素酶的表达量。荧光素酶的蛋白表达量与启动子活性、mRNA的

双荧光素酶检测的原理和应用

一、荧光素酶报告基因的检测原理荧光素酶(Luciferase)是生物体内催化荧光素(luciferin)或脂肪醛(firefly aldehyde)氧化发光的一类酶的总称,来自于自然界能够发光的生物。自然界存在的荧光素酶来自萤火虫、发光细菌、发光海星、发光节虫、发光鱼、发光甲虫等。细菌荧光素酶对热敏

研究发现植物核孔蛋白在响应ABA信号与盐胁迫中的作用

  12月12日,中国科学院逆境生物学研究中心朱健康研究组和普渡大学博士后祝英方的研究成果,以An Arabidopsis Nucleoporin NUP85 modulates plant responses to ABA and salt stress为题,在线发表在PLOS Genetics上

植物细胞中-ADH-和-ALDH-的活性与植物的抗逆性有何关系?

植物细胞中乙醇脱氢酶(ADH)和乙醛脱氢酶(ALDH)的活性与植物的抗逆性密切相关。在遭受逆境(如水淹、土壤板结导致氧气供应不足)时,植物可能会进行无氧呼吸产生乙醇。此时,较高的 ADH 和 ALDH 活性有助于及时将乙醇转化为毒性较低的物质,减少乙醇对细胞的毒害,从而增强植物在缺氧等逆境下的生存能

NK细胞活性检测实验步骤

  细胞毒检测技术包括补体依赖细胞毒试验、NK细胞介导的细胞毒试验和特异性CTL活性检测,常用的实验技术有后两种。NK细胞(natural killer cell)是在天然免疫系统发挥主要作用的效应细胞,可直接杀伤病毒感染的靶细胞和某些肿瘤细胞。而细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymp

报告基因实验——MUG-荧光分析

实验材料组织提取物试剂、试剂盒GUS 缓冲液MUG仪器、耗材96 孔板数显荧光计实验步骤1. 分别取 25 ul 和 50 ul 组织提取物样品于 96 孔板中(黑色或者白色),包括未转化的对照组织,加 GUS 缓冲液至总体积为 200  ul,混匀。2. 加入 100 μl 含 2.5 mg/ml

常春藤提取物的药理活性

  常春藤提取物是一种从植物叶子提取得到的提取物。其主要用途是促进呼吸系统健康,但它还可以用于皮肤抵御衰老。这种提取物有胶囊和液体形式,可以在很多软膏和霜剂中发现它。常春藤原生于欧洲南部,不能将其与南美的有毒常春藤相互混淆。  常春藤的一些成分有化痰作用。这意味着它有助于减少呼吸系统中积聚的黏液。皂

灰树花提取物的活性成分

  灰树花其主要活性成份是灰树花蛋白多糖,多糖组份中以葡聚糖为主,以具有β-(1→6)分支的β-(1→3)葡聚糖为基本结构,含少量的木糖和甘露糖。

问荆提取物的功能与活性成分

  功能  1. 利尿和肾脏问题  问荆最著名的用法是作为温和的利尿剂(“排水药”)以增加排尿和减轻水肿,并作为多种膀胱和肾脏问题(包括肾结石和膀胱感染)的治疗药物。问荆对泌尿-生殖系统是一类极好的收敛剂,因其极高的有机硅含量而可减少出血和治疗伤口。问荆同样在治疗失禁和幼儿尿床方面具有极高的价值。其

仙鹤草提取物的活性成分

  含仙鹤草素、仙鹤草内酯(Agrimonolide)、鞣质(为焦性儿茶酚鞣质、没食子鞣质等(6.67%-13.71%))、甾醇、有机酸、酚性成分、皂甙。

罗汉果提取物的活性成分

  果中含非糖甜味的成分,主要是三萜甙类:罗汉果甜苷(mogroside)Ⅴ及Ⅳ,苷Ⅴ的甜度是蔗糖(srcrose)的256-344倍,苷Ⅳ的甜度为蔗糖的126倍。还含大量葡萄糖(glucose)[6],果糖(fructose)占14%。又含锰、铁、镍、硒、锡、碘、钼等26种无机元素、蛋白质、维生素

麦冬提取物的活性成分及功效

  活性成分  含麦冬皂甙A、B、B’、C、C’、D、D’(ophiopogoninA,B,B’,C,C’、D,D’)、麦冬酮A、B(ophiopogononeA,B)、甲基麦冬黄酮A、B(methy-lophiopogononeA,B)、二氢麦冬黄酮A、B(ophiopogonanoneA,B)等

双荧光LUC波长名称

萤火虫荧光素酶。双荧光LUC是基于荧光素酶的发光原理,形成了双荧光素酶报告基因检测系统。该波长名称为萤火虫荧光素酶,由于传统荧光染料的发射波长在400-800nm之间,以及肝脏等组织的强吸收和高背景荧光的特性,双光子显微成像在成像深度和信噪比方面尚存不足。

双荧光LUC波长名称

萤火虫荧光素酶。双荧光LUC是基于荧光素酶的发光原理,形成了双荧光素酶报告基因检测系统。该波长名称为萤火虫荧光素酶,由于传统荧光染料的发射波长在400-800nm之间,以及肝脏等组织的强吸收和高背景荧光的特性,双光子显微成像在成像深度和信噪比方面尚存不足。

活体成像在过量表达SoCYP85A1基因的应用

黑胫病是烟草生产中危害最大的病害之一。近期,来自青岛农业大学的研究人员从菠菜中克隆了一个新的细胞色素抗性基因SoCYP85A1。该基因在烟草中的过表达显著增强了烟草对黑胫病的抗性,但不同转基因株系的抗性水平不同。在转基因植株中检测到油菜素甾酮castasterone (CS) 的大量积累。而且,So

细胞活性检测DNA合成增殖实验

BrdU检测法BrdU为胸腺嘧啶核苷(Thymine)的衍生物,可用于标记活细胞中新合成的DNA(细胞活性周期S期),BrdU可随着DNA复制进入子细胞,因此在加入BrdU后分裂增殖的细胞DNA都会带有BrdU标记,可通过抗BrdU单克隆抗体检测,借此检测细胞的增殖能力,但BrdU单克隆抗体检测过程

MTT法细胞活性检测实验步骤

MTT是一种粉末状化学试剂,全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝,是一种黄颜色的染料。MTT主要有两个用途:

酶标仪在植物领域的三种应用总结

一、简介   在基于哺乳动物细胞的研究中,酶标仪主要应用于: (1) 常规分子检测,如核酸、蛋白浓度及酶活性分析等;(2) 信号转导研究, 如一些细胞信号事件如 ROS,修饰的检测;(3) 整体细胞水平的分析,如细胞的活力、凋亡和杀伤等。然而在植物领域中,酶标 仪的应用则偏向前