谷类植物种子蛋白质提取实验

实验材料白蛋白球蛋白试剂、试剂盒提取液漂洗液溶解液烧化剂甘油溶液实验步骤3.1 种子总蛋白提取的普适方法使用普适方法的目的在于从研磨好的种子中提取总蛋白质,不考虑具体的蛋白质种类 。此方法由 Damerval 等 [ 9] 及 Granier [ 10 ] 提出,它可以用于所有的种子,参见第 1 章 。这种方法不仅特别适用于从绿熟种子中提取蛋白质,也适用于从早期形成阶段的谷类植物籽粒,种皮、胚或正在发育的胚乳中提取蛋白质。一些特殊组织,如糊粉层、胚和胚乳能够从发育中的籽粒及成熟的籽粒中分离出来。不像分离胚那样容易,分离糊粉层需要时间和经验,要在显微镜下剖开很多种子才能得到足够的材料用于蛋白质提取和双向电泳。一株植物上收获到的种子存在差异,所以要从有代表性的穗、花序、荚等收集未成熟的种子。根据所使用的方法,即在溶解之前沉淀(见下文)或直接溶解(见下文),在蛋白质提取量或者在双向电泳凝胶上的蛋白质图谱会有所不同。不管怎样,一旦应用了......阅读全文

谷类植物种子蛋白质提取实验

实验材料白蛋白                                                                  球蛋白                                                          试剂、试剂盒提取液      

谷类植物种子蛋白质提取实验

实验材料白蛋白球蛋白试剂、试剂盒提取液漂洗液溶解液烧化剂甘油溶液实验步骤3.1 种子总蛋白提取的普适方法使用普适方法的目的在于从研磨好的种子中提取总蛋白质,不考虑具体的蛋白质种类 。此方法由 Damerval 等 [ 9] 及 Granier [ 10 ] 提出,它可以用于所有的种子,参见第 1 章

谷类植物种子蛋白质提取实验

实验材料 白蛋白球蛋白试剂、试剂盒 提取液漂洗液溶解液烧化剂甘油溶液实验步骤 3.1 种子总蛋白提取的普适方法使用普适方法的目的在于从研磨好的种子中提取总蛋白质,不考虑具体的蛋白质种类 。此方法由 Damerval 等 [ 9] 及 Granier [ 10 ] 提出,它可以用于所有的种子,参见第

木本植物蛋白质提取实验

实验材料树皮                                                          试剂、试剂盒沉淀缓冲液                                                                  漂洗缓冲液    

木本植物蛋白质提取实验

实验材料 树皮试剂、试剂盒 沉淀缓冲液漂洗缓冲液溶解缓冲液仪器、耗材 离心管实验步骤 3.1 提取总蛋白质 (见注释 5)( 1 ) 将去塞的 10 ml 空离心管称重。我们选用韧性好的聚碳酸酯旋盖圆底高速离心管。( 2 ) 细胞碎裂:500 mg 新鲜组织(保存在 -80°C ) 在液氮中用研钵和

木本植物蛋白质提取实验

实验材料树皮试剂、试剂盒沉淀缓冲液漂洗缓冲液溶解缓冲液仪器、耗材离心管实验步骤3.1 提取总蛋白质 (见注释 5)( 1 ) 将去塞的 10 ml 空离心管称重。我们选用韧性好的聚碳酸酯旋盖圆底高速离心管。( 2 ) 细胞碎裂:500 mg 新鲜组织(保存在 -80°C ) 在液氮中用研钵和杵捣成粉

蛋白质的提取及粗分离实验

硫酸铵盐析法             实验方法原理 分离纯化蛋白质,首先要从原材料中提取目的蛋白,然后通过粗分离的方法除去大量杂质,最后进行精细分离,得到目的蛋白。本实验以新型基因

蛋白质的提取及粗分离实验

分离纯化蛋白质,首先要从原材料中提取目的蛋白,然后通过粗分离的方法除去大量杂质,最后进行精细分离,得到目的蛋白。本实验以新型基因重组人TNF为例阐明重组蛋白TNF的提取及初步分离。实验方法硫酸铵盐析法实验方法原理分离纯化蛋白质,首先要从原材料中提取目的蛋白,然后通过粗分离的方法除去大量杂质,最后进行

根分生细胞核蛋白质提取实验

实验材料细胞核试剂、试剂盒Ficoll硫酸葡萄聚糖Tris-HClEDTA正辛醇仪器、耗材阿拉伯树胶高速分散搅拌器实验步骤3.1 植物材料( 1 ) 洋葱鳞茎,除去棕色干枯的外皮,用自来水清洗,将每一个正立放在加有大约 90 ml 过滤水的圆桶状玻璃容器中,这样只有底部浸没在水中(见注释 3)。水必

根分生细胞核蛋白质提取实验

实验材料 细胞核试剂、试剂盒 Ficoll硫酸葡萄聚糖Tris-HClEDTA正辛醇仪器、耗材 阿拉伯树胶高速分散搅拌器实验步骤 3.1 植物材料( 1 ) 洋葱鳞茎,除去棕色干枯的外皮,用自来水清洗,将每一个正立放在加有大约 90 ml 过滤水的圆桶状玻璃容器中,这样只有底部浸没在水中(见注释 3

根分生细胞核蛋白质提取实验

实验材料细胞核                                                          试剂、试剂盒Ficoll                                                                  硫酸葡萄聚糖

蛋白质免疫印迹实验组织蛋白提取

  组织蛋白提取  1)所需器材:制冰机、标记笔、两套1.5ml EP管(最好高温高压处理)、一个大冰盒、一个1.5ml EP管盒、手套、眼科剪(最好高温高压处理)、新鲜组织或保存于-80℃冰箱组织、保存于4℃冰箱的PBS(最好高温高压处理)、移液枪、吸头(最好高温高压处理)、两套研磨棒(最好高温高

蛋白质提取分离纯化鉴定的实验方案

一.血清ǐ-球蛋白的初步提取1. 血细胞与血清分离:取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm离心20min .弃沉淀,留上清备用(沉淀为血细胞,上部为血清).2. 乳糜粒分离:4000rpm 10°C离心10分钟,采用密度梯度离心梯度液配置:离心管下部3/4容积加血浆,上部1/4容积

蛋白质提取分离纯化鉴定的实验方案

一.血清ǐ-球蛋白的初步提取1. 血细胞与血清分离:取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm离心20min .弃沉淀,留上清备用(沉淀为血细胞,上部为血清).2. 乳糜粒分离:4000rpm 10°C离心10分钟,采用密度梯度离心梯度液配置:离心管下部3/4容积加血浆,上部1/4容积

蛋白质如何提取

大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液,少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中,因些,可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶.(一)水溶液提取法稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,提取时需要均匀的搅拌,以利

如何提取蛋白质?

  对于每个大肠杆菌表达的目的蛋白,确定其产生、定位及估计培养基或细胞中的产量都相当重要。为了简化确定工作,通常对总细胞蛋白及培养液、周质、可溶胞质和不溶胞质部分进行小规模分析。分析的结果有利于诱导条件优化或确定大规模诱导条件,以及采用合适的蛋白抽提方法用来纯化目的蛋白。下面简单的介绍总细胞蛋白的提

蛋白质如何提取

大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液,少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中,因些,可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶.(一)水溶液提取法稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,提取时需要均匀的搅拌,以利

蛋白质免疫印迹实验悬浮细胞蛋白提取相关

  悬浮细胞蛋白提取  1)所需器材:制冰机、标记笔、两套1.5ml EP管(最好高温高压处理)、两个大冰盒、长满细胞的培养瓶、10ml离心管、手套、移液枪、吸头(最好高温高压处理)、滤纸、保存于4℃冰箱的PBS(最好高温高压处理)、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟(PMSF,一种蛋白酶抑制剂,剧毒)、离

紫花苜蓿茎细胞壁蛋白质提取实验

试剂、试剂盒 乙酸钠NaCl抗坏血酸匀浆缓冲液洗脱缓冲液仪器、耗材 液氮研钵和研杵布氏漏斗真空室或真空泵实验步骤 3.1 组织破碎、清洗、凝胶检测纯度( 1 ) 收集 7~8 g 成熟(节间 4~6 ) 紫花苜蓿茎。这一重量的成熟茎组织这一数量中含有的细胞壁的蛋白质应多于 1 mg ( 见注释 2)

紫花苜蓿茎细胞壁蛋白质提取实验

试剂、试剂盒乙酸钠NaCl抗坏血酸匀浆缓冲液洗脱缓冲液仪器、耗材液氮研钵和研杵布氏漏斗真空室或真空泵实验步骤3.1 组织破碎、清洗、凝胶检测纯度( 1 ) 收集 7~8 g 成熟(节间 4~6 ) 紫花苜蓿茎。这一重量的成熟茎组织这一数量中含有的细胞壁的蛋白质应多于 1 mg ( 见注释 2) 。收

紫花苜蓿茎细胞壁蛋白质提取实验

试剂、试剂盒:乙酸钠                                                                  NaCl                                                                  抗坏血酸

蛋白质免疫印迹实验贴壁细胞蛋白提取

  贴壁细胞蛋白提取(细胞蛋白含量一般约为1x10-9mg/细胞)  1)所需器材:制冰机、细胞刮刀、标记笔、两套1.5ml EP管(最好高温高压处理)、两个大冰盒、手套、长满细胞的培养瓶、保存于4℃冰箱的PBS、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟(PMSF,一种蛋白酶抑制剂,剧毒)、移液枪、吸头(最好高温

蛋白质、多肽提取分离

1 分离方法   采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括:盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化,同时上述这些方

蛋白质提取与制备

1蛋白质提取与制备蛋白质提取与制备蛋白质种类很多,性质上的差异很大,既或是同类蛋白质,因选用材料不同,使用方法差别也很大,且又处于不同的体系中,因此不可能有一个固定的程序适用各类蛋白质的分离。但多数分离工作中的关键部分基本手段还是共同的,大部分蛋白质均可溶于水、稀盐、稀酸或稀碱溶液中,少数与脂类结合

蛋白质提取和纯化

蛋白质提取和纯化(主要内容如下)Protein Extraction Protein PurificationProtein PrecipitationColumn PreparatioinQ & A Posted in the Method ForumProtein ExtractionWhole

蛋白质、多肽提取分离

1 分离方法   采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括:盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化,同时上述这些方法也是蛋白、多肽类物

蛋白质的蛋白质的提取技术

选择材料及预处理   以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别,把它们分配到可用机械方

木质部和韧皮部汁液蛋白质提取实验

实验材料韧皮部汁液试剂、试剂盒HClNaOH丙酮甲醇DTTβ-苯巯基乙醇仪器、耗材刀片螺旋盖试管实验步骤3.1 收集木质部汁液木质部汁液属于植物细胞外空间,含有的特殊蛋白质的种类和浓度随植物的状态而变化。因为纯净的木质部汁液容易从大多数植物中得到,所以容易用蛋白质组学工具进行木质部汁液蛋白质的鉴别。

木质部和韧皮部汁液蛋白质提取实验

实验材料:韧皮部汁液    试剂、试剂盒:HCl                                                                  NaOH                                                        

蛋白质纯化所需的生物提取物制备的实验

实验步骤一、化学法和酶法细胞裂解微量的细胞裂解经常通过化学法或酶法或二者共同采用来完成。例如, 超声和弗式细胞压碎器 (Frenchpress 均质机) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培养液的情况,而且应用这些机械的方法经常会遇到过度的产热和样品被氧化等问题。微量细胞裂解的简化方面的重大进